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20411ES01PNGase F （N-糖酰胺酶F或肽N-糖苷酶 F）
| 參考價(jià): | 面議 |
具體成交價(jià)以合同協(xié)議為準(zhǔn)- 20411ES01 產(chǎn)品型號(hào)
- Yeasen/翌圣生物 品牌
- 生產(chǎn)商 廠商性質(zhì)
- 上海市 所在地
訪問次數(shù)：1441更新時(shí)間：2022-02-10 11:53:27
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產(chǎn)品簡(jiǎn)介
| 供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 15000 U |
|---|---|---|---|
| 貨號(hào) | 20411ES01 | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 醫(yī)療衛(wèi)生,生物產(chǎn)業(yè) |
產(chǎn)品介紹
PNGase F （N-糖酰胺酶F或肽N-糖苷酶 F）
產(chǎn)品信息
產(chǎn)品名稱 | 產(chǎn)品編號(hào) | 規(guī)格 | 價(jià)格（元） |
PNGase F (N-糖酰胺酶F或肽N-糖苷酶 F） | 20411ES01 | 15000 U | 763 |
PNGase F (N-糖酰胺酶F或肽N-糖苷酶 F） | 20411ES02 | 75000 U | 3373 |
產(chǎn)品描述
N-糖苷酶 F (PNGase F)是一種酰胺水解酶，經(jīng)過和平空間站伊麗莎菌克隆，并在 E. coli大腸桿菌中重組表達(dá)，可以裂解由天冬酰胺連接的高甘露糖、雜合和復(fù)雜的寡糖糖蛋白。PNGase F的切割位點(diǎn)為糖蛋白內(nèi)側(cè)N-乙酰葡萄糖胺（GlcNAc）和天冬酰氨殘基之間的酰胺鍵，同時(shí)將酶解后蛋白上的天冬氨酰轉(zhuǎn)化為天冬氨酸。本產(chǎn)品常應(yīng)用于抗體及其相關(guān)蛋白*去糖基化。
產(chǎn)品性質(zhì)
中文別名（Chinese synonym） | N-糖酰胺酶F；N-糖苷酶 F |
英文別名（English synonym） | PNGase F |
來源（Source） | 大腸桿菌表達(dá) |
純度（Purity） | 經(jīng)SDS-PAGE及HPLC分析，純度> 90% |
分子量（Molecular weight） | 36 kDa |
比活性（Specific activity） | 1,800,000 U/mg |
緩沖液組分（Buffer） | 20 mM Tris-HCl pH 7.5, 50 mM NaCl, 5 mM EDTA,50%Glycerol. |
酶活定義（Unit Definition） | 1個(gè)酶活力單位指在10 μL的反應(yīng)體系中，37℃條件下1小時(shí)從 10 μg變性RNase B中除去超過95%的碳水化合物所需要的酶量。 |
運(yùn)輸和保存方法
干冰運(yùn)輸；-20℃保存；有效期12個(gè)月。
使用方法
1、變性條件下蛋白質(zhì)去糖基化：
1）將1μL 5%SDS和1μL 1 M DTT加入到12 μL目標(biāo)糖蛋白（50 μg），總體積14 μL；
2）100℃溫度下煮沸10 min使其變性，室溫冷卻5 min；
3）加入2 μL的0.5M磷酸鈉緩沖液（pH 7.5）。如果pH在PNGase F（pH 6-10）范圍內(nèi)，可以使用其他緩沖液。20 mL 0.5 M磷酸鈉（調(diào)制pH 7.5）的配置: 8.4 mL 1 M Na2HPO4，1.6 mL 1 M NaH2PO4 。
4）加入2 μL的10％NP-40。可用Triton X-100替代NP-40。PNGase F 的活性受 SDS 的抑制，所以在反應(yīng)混合物中必須加入 NP-40。
5）加入1-2 μL的PNGase，在37℃孵育1-3 h。
2、非變性條件下蛋白質(zhì)去糖基化：
1）在50 mM碳酸氫銨（pH 7.8）中加入20 μg的糖蛋白至終體積為18μL；
2）加入1-2 μL的PNGase F，在37°C孵育2-18 h。
注意：在變性條件下大多數(shù)底物能夠更好的去糖基化，在非變性條件下可能需要增加PNGase F的量和延長(zhǎng)孵育時(shí)間。具體酶濃度見管壁標(biāo)簽
注意事項(xiàng)
為了您的安全和健康，請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。
HB210129
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