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產品簡介
| 供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 10 mg |
|---|---|---|---|
| 貨號 | 40727ES10 | 應用領域 | 生物產業(yè) |
產品介紹
DAPI 4’,6-聯(lián)脒-2-苯基吲哚
產品信息
產品名稱 | 產品編號 | 規(guī)格 | 外觀 | 價格（元） |
DAPI 4’,6-聯(lián)脒-2-苯基吲哚 | 40727ES10 | 10 mg | 黃色粉末 | 459.00 |
產品描述
DAPI，也稱DAPI dihydrochloride，是一種常用的核酸染料，可以和雙鏈DNA富含AT序列的小溝結合，產生比自身強20多倍的藍色熒光。和EB(ethidium bromide)相比，DAPI對雙鏈DNA的染色靈敏度要高很多倍。DAPI也可對RNA進行染色，染色機理是其可以選擇性嵌入“AU序列”并發(fā)出熒光。相比DAPI-dsDNA(Ex/Em=358 nm/461 nm)，DAPI-RNA具有較長的大發(fā)射波長(500 nm)，其熒光亮度僅有DAPI-dsDNA的20%。
盡管DAPI不能通過活細胞膜，但可以通過提高濃度使之進入活細胞。DAPI具有很高的光漂白承受水平，能用來檢測酵母線粒體DNA，葉綠體DNA，病毒DNA，Microplasm DNA以及染色體DNA。
DAPI典型的藍色熒光特性使其非常普遍的搭配其他綠色、黃色或紅色熒光染料用于細胞生物學多色熒光標記技術，因此也常作為核酸和染色體的復染劑用于細胞凋亡檢測、RNA原位雜交、直接或間接免疫檢測等領域，其染色后可用熒光顯微鏡觀察或流式細胞儀檢測。推薦工作濃度為0.5-10 μg/L。
產品性質
中文名稱（Chinese Synonym） | 4’,6-聯(lián)脒-2-苯基吲哚 |
英文名稱（English Synonym） | 2-(4-Amidinophenyl)-6-indolecarbamidine dihydrochloride; DAPI dihydrochloride 4’,6-Diamidino-2-phenylindole, dihydrochloride; |
分子式（Molecular Fomular） | C16H15N5 ·2HCl |
分子量（Molecular Weight） | 350.25 |
CAS號（CAS NO.） | 28718-90-3 |
純度（HPLC Purity） | ≥95% |
熒光光譜（Fluorescence Spectral） | DAPI的Ex/Em=340 nm/488 nm; DAPI-DNA的Ex/Em=358 nm/461 nm |
結構式（Structure） |
|
運輸與保存方法
常溫運輸。粉末于4 ℃保存，需避光儲存，有效期3年。
注意事項
1）DAPI對人體有一定刺激性，請注意適當防護。
2）熒光染料都存在淬滅的問題，建議染色后盡量當天完成檢測。
3）為減緩熒光淬滅可以使用抗熒光淬滅封片液。
4）為了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作。
配制母液
用雙蒸水溶解，終濃度為1-5 mg/mL。本產品不可以用緩沖液直接溶解。-20 ℃可保存1年，建議分裝保存，避免反復凍融
使用方法
1. 配制工作液：用雙蒸水或PBS稀釋母液，配制成所需要的工作的濃度（0.5-10 μg/mL），工作液可于4 ℃保存6個月。
2. 固定的細胞或組織染色：對于固定的細胞或組織樣品，固定后，適當洗滌去除固定劑。DAPI染色通常在其他染色的后進行。如果不需要進行其它染色，則直接進行DAPI 染色。
a）對于貼壁細胞或組織切片：加入適量DAPI染色液，覆蓋住樣品即可。
對于懸浮細胞：至少加入待測染色樣品體積3倍的染色液，混勻。室溫放置3-5分鐘。
b）吸除DAPI染色液，用TBST、PBS或生理鹽水洗滌2-3次，每次3-5分鐘。
c）直接在熒光顯微鏡下觀察或封片后熒光顯微鏡下觀察。激發(fā)波長360 nm，發(fā)射波長460 nm。
3. 活細胞或組織染色：
a）細胞培養(yǎng)物中加入適量DAPI染色液，約1/10細胞培養(yǎng)基體積，必須充分覆蓋住待染色的樣品。通常對于六孔板一個孔需加入1 mL染色液，對于96孔板一個孔需加入100 μL染色液。
b）在 37 ℃培養(yǎng)細胞 10～20 分鐘。
c）用 PBS或合適的緩沖液洗細胞兩次。
d）直接在熒光顯微鏡下觀察或封片后熒光顯微鏡下觀察。激發(fā)波長360 nm，發(fā)射波長460 nm。
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