對于某些比較透明的被檢物體，普通光學(xué)顯微鏡不能有效的觀察其細(xì)節(jié)，只能通過暗場顯微技術(shù)來達(dá)到觀察目的。暗場顯微鏡技術(shù)是利用斜射照明法阻擋透過標(biāo)本細(xì)節(jié)的直射光，以反射光和衍射光來觀察標(biāo)本。在普通顯微鏡下直射光透過標(biāo)本的時(shí)候，一部分光被吸收，另一部分光透射或折射，形成標(biāo)本細(xì)節(jié)內(nèi)部結(jié)構(gòu)的真實(shí)投影。因此，在普通顯微鏡下所看到的是物體形態(tài)和結(jié)構(gòu)。普通顯微鏡下可以看到0.45um的細(xì)節(jié)，而暗場顯微鏡下竟能看到0.2-0.004um的極徽小物體。這個(gè)范圍的物體叫亞粒子,因此暗場顯微鏡也可以稱裂隙限外顯微鏡。而在暗場顯微鏡下從側(cè)面照射到物體的光束，繞射或反射造成物體外形的側(cè)影。因此暗場顯微鏡下所看到的只是物體的輪廓或物體的運(yùn)動(dòng)。

暗場顯微鏡特別適用于膠體化學(xué)領(lǐng)域中觀察溶質(zhì)粒子的布朗運(yùn)動(dòng)，適用于觀察原蟲、細(xì)菌的鞭毛、偽足運(yùn)動(dòng)，醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)學(xué)范圍適用于觀察人體體液中螺旋體、尿管形、結(jié)晶或各種粒子.在這一點(diǎn)上，暗場顯微鏡遠(yuǎn)比其他種類顯微鏡要*得多。在多功能顯微鏡上，可以通過加裝暗場附件達(dá)到組成暗場顯微鏡的目的，而暗場顯微鏡的zui關(guān)鍵部件是暗場聚光鏡。

尼康顯微鏡是尼康光學(xué)儀器公司的下屬品牌。尼康公司成立于 1917 年，由當(dāng)時(shí)三家日本光學(xué)產(chǎn)品制造商合并而成，公司zui初的名字叫日本光學(xué)工業(yè)株式會(huì)社 ("日本光學(xué)")，主要進(jìn)行精密光學(xué)玻璃的制造與研發(fā)。1925 年，尼康制造出了*臺配有可旋轉(zhuǎn)物鏡轉(zhuǎn)盤和可更換物鏡的顯微鏡 – Joico 顯微鏡?，F(xiàn)今，尼康已成為zui為的品牌，在光學(xué)儀器市場牢牢占據(jù)了地位，作為*一家生產(chǎn)自用玻璃的顯微鏡企業(yè)，整個(gè)生產(chǎn)活動(dòng)為其提供了細(xì)致入微的*。憑借在光學(xué)儀器領(lǐng)域 90 多年持續(xù)不斷的專家知識積累，加之將提高創(chuàng)新能力和誠信作為公司使命，尼康自始至終都站在光學(xué)和技術(shù)創(chuàng)新的zui前沿

暗場觀察時(shí)不能使用油浸系或水浸系物鏡，而用干燥系物鏡中鏡口率在0.85以下的物鏡。假如使用鏡口率過大的物鏡時(shí)，除微粒子反射的光束以外的旁射光束也可進(jìn)入物鏡前透鏡.就是這種放大率并不大的物鏡下，可以達(dá)到觀察亞微粒子的要求。具體操作如下：

　　1.安裝暗場聚光器檢查聚光器的光軸(并非晶體光軸而指幾何光學(xué)光軸)是否與顯微鏡的光路一致。聚光鏡用中心調(diào)節(jié)旋鈕合軸調(diào)整之后，圈錐光束的交點(diǎn)集中到標(biāo)本平面上。

　　2.放標(biāo)本放置標(biāo)本時(shí)在聚光鏡前透鏡與載物片之間必須浸油。否則來自標(biāo)本細(xì)節(jié)的反射光和衍射光束在載物玻片表面進(jìn)行全反射。觀察結(jié)果趨于失敗。

　　3.調(diào)節(jié)聚光鏡焦點(diǎn)操縱光源會(huì)聚透鏡務(wù)使圓錐形光束的交點(diǎn)照射到標(biāo)本平面上。

　　4.迭擇物鏡用于暗場觀察的物鏡中.油浸系或水浸系的物鏡不能使用。就是干燥系物鏡中也要挑選鏡率在0.85以下為好。如果物鏡鏡口率過大時(shí)，來自聚光鏡的部分直射光束進(jìn)入物鏡前透鏡，從而干擾暗視野成像效應(yīng)。如果使用油浸系物鏡觀察時(shí)，必須調(diào)節(jié)物鏡內(nèi)裝孔徑光欄。

　　5.光派的選擇暗場顯微鏡中光能損失太大。因此必須選擇光強(qiáng)zui大的光源，才能取得較好效果。尤其以超聚光鏡觀察膠體微粒運(yùn)動(dòng)時(shí)，光強(qiáng)愈大愈好.

　　6.浸油的方法聚光鏡與載玻片間浸油時(shí)特別注意是否有氣泡。氣泡可招致暗視野觀察效果的*破壞。