會(huì)員.png)
3
當(dāng)前位置：廣州綠百草科學(xué)儀器有限公司>>技術(shù)文章>>多糖涂敷型手性柱（反相流動(dòng)相）沖洗方法
多糖涂敷型手性柱（反相流動(dòng)相）沖洗方法
當(dāng)手性色譜柱分離度下降、
柱壓過高等色譜柱異常現(xiàn)象發(fā)生時(shí)，
才需要使用本方法沖洗
1、一般情況下，使用常規(guī)方法沖洗色譜柱；若常規(guī)方法無效，則使用特殊方法一沖洗色譜柱；若特殊方法一無效，則使用特殊方法二沖洗色譜柱。
2、沖洗過程中，10µm柱柱壓請(qǐng)勿超過3Mpa，5µm柱柱壓請(qǐng)勿超過6Mpa，3µm柱柱壓請(qǐng)勿超過15Mpa。
3、以下沖洗過程中涉及的流速僅供參考，實(shí)際操作中以柱壓不超過以上說明為宜。
4、以下沖洗過程中提到的20倍柱體積，以4.6*150mm規(guī)格柱為例，約為30mL。
常規(guī)方法：
1、用水/甲醇或水/乙腈(80/20,v/v或85/15,v/v)，流速0.5ml/min，沖洗20倍柱體積；
2、沖洗結(jié)束，驗(yàn)柱或重復(fù)以前的樣品實(shí)驗(yàn)，看是否柱效有提高。
特殊方法一：
1、 用水/甲醇(90/10,v/v)，流速0.5 ml/min，沖洗20倍柱體積；
2、逐漸提高甲醇的比例到100%，然后以甲醇100%，0.3ml/min左右的流速，沖洗20倍柱體積；
3、逐漸增加水的比例至90%，即水/甲醇(90/10,v/v)；
4、沖洗結(jié)束，驗(yàn)柱或重復(fù)以前的樣品實(shí)驗(yàn)，看是否柱效有提高。
特殊方法二：
1、用水/甲醇(90/10,v/v)，流速0.5 ml/min，沖洗20倍柱體積；
2、逐漸提高甲醇的比例到100%，然后以甲醇100%，0.3ml/min左右的流速，沖洗20倍柱體積；
3、再用酸性流動(dòng)相，甲醇/三氟·乙酸(100/0.1,v/v)，0.3ml/min的流速，沖洗20倍柱體積；
4、再用中性流動(dòng)相甲醇過渡，甲醇100%，0.3ml/min的流速，沖洗20倍柱體積；
5、逐漸增加水的比例到90%，即水/甲醇(90/10,v/v)；
6、沖洗結(jié)束，驗(yàn)柱或重復(fù)之前的樣品實(shí)驗(yàn)，看是否有提高柱效。