如何為LC-MS選擇合適的HPLC色譜柱?
質(zhì)譜(MS)是液相色譜(LC)流行的檢測技術(shù)之一。該技術(shù)也與LC-UV(UV)檢測中使用的許多流動相緩沖液和溶劑不兼容。除此之外,LC-MS檢測還必須考慮HPLC色譜柱的尺寸。
所有這些都意味著,與為其他檢測系統(tǒng)選擇色譜柱相比,為LC-MS選擇合適的HPLC色譜柱需要考慮更多。在這里,我們概述了為LC-MS選擇HPLC色譜柱時的幾個重要考慮因素
選擇合適的色譜柱固定相
這是為LC-MS選擇HPLC色譜柱時最重要的考慮因素。色譜柱種類繁多,包括反相、正相和離子交換。
反相非常適合LC-MS,因為它可以使用水相和有機流動相組合對多種化合物進行高分辨率分離。
離子交換柱需要與質(zhì)譜儀不兼容的無機緩沖溶液。如果離子交換柱必須與質(zhì)譜儀(MS)一起使用,請確保使用與MS檢測兼容的揮發(fā)性緩沖液和溶劑。在將樣品注入LC-MS之前,您還應該對樣品進行脫鹽。
使用揮發(fā)性緩沖液
緩沖液用于通過保持流動相的pH值來幫助獲得良好的峰形、分離度和選擇性。雖然有許多潛在的緩沖液可供選擇,但對于LC-MS,您應該使用含有銨鹽的揮發(fā)性緩沖液,而不是磷酸鹽緩沖液等非揮發(fā)性緩沖液。
如果可能,通常應避免在LC-MS中使用與任何離子化合物和固定相形成離子和共價鍵配合物的離子對試劑。如果不可能,則僅使用這些試劑的揮發(fā)性形式。
無論您將哪種HPLC色譜柱用于LC-MS,請務必根據(jù)制造商的規(guī)格進行制備和調(diào)節(jié),并保持其清潔。這將有助于延長色譜柱的使用壽命,并確保您獲得所需的結(jié)果。