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技術(shù)文章
士鋒生物神經(jīng)系統(tǒng)染色技術(shù)介紹
點擊次數(shù):779 發(fā)布時間:2013-10-31
神經(jīng)病理學(xué)是組織病理學(xué)的一個重要組成部分,神經(jīng)病理學(xué)技術(shù)是一門較特殊的病理技術(shù)。神經(jīng)組織的結(jié)構(gòu)和功能較為復(fù)雜的特殊,用常規(guī)方法處理,常得不到想要的東西,因此,要想獲取想要的東西,必須靠特殊的處理方法,才能將其充分地顯示出來。神經(jīng)系統(tǒng)方面可顯示的物質(zhì)較多,如尼氏小體、髓鞘、變性髓鞘、神經(jīng)纖維和神經(jīng)膠質(zhì)細胞等等。這些都要靠特殊的銀浸染技術(shù),才能顯示出來。下面將介紹幾種顯示上述物質(zhì)的方法。
應(yīng)用:神經(jīng)系統(tǒng)染色應(yīng)用于神經(jīng)系統(tǒng)方面的各種疾病,如創(chuàng)傷、中毒、感染等引起神經(jīng)系統(tǒng)方面的疾病,應(yīng)作正常髓鞘和變性髓鞘的染色,以觀察髓鞘的變化及脫失情況,如脫髓鞘假瘤與彌漫的纖維星型細胞瘤鏡下有非典型性核分裂象和彌漫浸潤的單核細胞,充分發(fā)育的巨噬細胞缺少細胞將會誤診為膠質(zhì)瘤,應(yīng)作膠質(zhì)細胞和神經(jīng)纖維染色。
(一)蘇木素VG法染中樞神經(jīng)
1、切片脫蠟至70%酒精
2、Weigert氏鐵蘇木素染10分鐘
3、自來水稍洗
4、如有必要,用1%鹽酸酒精分化
5、流水洗10-15分鐘
6、VG液染30分鐘
7、蒸餾水快洗
8、95%酒精分化
9、脫水、透明、封固
結(jié)果:細胞:灰黑色
髓鞘:灰白色
膠原:紅色
肌纖維:黃色
神經(jīng)細胞細胞漿 黃色/琥珀色
膠質(zhì)纖維 琥珀色
(二)神經(jīng)細胞尼氏體染色
正常的神經(jīng)細胞都含有一定數(shù)量的尼氏化,它們主要分布于神經(jīng)細胞的漿中,形狀有大有小,如三角形,有的為橢圓形。這些物質(zhì)能被大部分的藍色染料所染色,這些染料如焦油堅牢紫(Cresyl fast violet)亞甲藍(methylene blue)甲苯胺藍(toluidine blue)硫董(thionin)等鈄其染為藍色。但是,當(dāng)神經(jīng)細胞受傷后,胞質(zhì)內(nèi)的尼氏體更可發(fā)生變化,嚴重的可消失。
焦油堅牢紫顯示尼氏體
焦油堅牢紫 1g
蒸餾水 100ml
操作方法:
1、切片脫蠟至水
2、用焦油堅牢紫水溶液浸染20-30分鐘
3、水洗
4、用95%酒精分化
5、*脫水,二甲苯透明,中性樹膠
結(jié)果:神經(jīng)細胞單位:紫-藍色
細胞核:紫-藍色
尼氏體:紫-深藍色
注意:1、應(yīng)用酒精分化切片,要迅速,防止過度分化,將切片上的顏色全部脫掉。
神經(jīng)纖維染色