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液相色譜柱有多少種分類(lèi)和填料
液相色譜是一種分離和分析化合物的實(shí)驗(yàn)室技術(shù)。在液相色譜中，柱子是實(shí)現(xiàn)分離的關(guān)鍵部分，其內(nèi)填充有固定相材料，稱(chēng)為填料或色譜介質(zhì)。根據(jù)不同的分離機(jī)制、應(yīng)用和操作條件，液相色譜柱可以分為多種類(lèi)型，每種類(lèi)型的柱子都使用特定的填料。
分類(lèi)：
1. 根據(jù)分離模式的不同，液相色譜柱主要分為以下幾種：
- 正相色譜柱：用于正相色譜，流動(dòng)相為非極性溶劑，固定相為極性填料。
- 反相色譜柱：用于反相色譜，流動(dòng)相為水或水與有機(jī)溶劑混合物，固定相為非極性或弱極性填料。
- 正離子交換色譜柱：用于正離子交換色譜，固定相帶有負(fù)電荷。
- 負(fù)離子交換色譜柱：用于負(fù)離子交換色譜，固定相帶有正電荷。
- 親水相互作用色譜柱(HILIC)：用于親水相互作用色譜，固定相非常親水。
- 分子排阻色譜柱(SEC)：用于分子排阻或凝膠滲透色譜，固定相是多孔的凝膠材料。
- 親和色譜柱：用于親和色譜，固定相具有特定的生物識(shí)別特性。
2. 根據(jù)尺寸和形狀，液相色譜柱可以分為：
- 分析柱：通常較短(幾厘米到十幾厘米)，用于實(shí)驗(yàn)室分析。
- 制備柱：較長(zhǎng)(通常幾十厘米)，用于化合物的純化和制備。
- 微柱/納柱/毛細(xì)管柱：直徑較小，用于需要高分離效率的應(yīng)用。
常見(jiàn)填料：
1. 反相色譜填料：
- C18(十八烷基硅烷)：常用的反相色譜填料，適用于大多數(shù)非極性到中等極性的化合物。
- C8(辛基硅烷)：提供比C18更快的分離，適合中等極性的化合物。
- 苯基或其他芳香基團(tuán)修飾的硅烷：用于特定的π-π相互作用分離。
2. 正相色譜填料：
- 硅膠：純硅石材料，極性很強(qiáng)，適用于極性化合物的分離。
- 氨基丙基修飾的硅烷：提供中等的極性和氫鍵作用力。
3. 親水相互作用色譜(HILIC)填料：
- 二氧化硅基礎(chǔ)上修飾有極性官能團(tuán)，如二醇、酰胺或兩性離子。
4. 離子交換色譜填料：
- 帶有磺酸基團(tuán)(陽(yáng)離子交換)或季銨鹽基團(tuán)(陰離子交換)的聚合物或硅石基質(zhì)。
5. 分子排阻色譜(SEC)填料：
- 交聯(lián)聚苯乙烯-二乙烯基苯(PS-DVB)或多孔硅膠顆粒，有不同的孔徑大小。
6. 特殊用途填料：
- 手性色譜填料：用于對(duì)映體分離，可以是修飾有手性選擇劑的硅膠或聚合物。
- 親和色譜填料：例如，蛋白A修飾的硅膠，用于特定蛋白質(zhì)的純化。