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當(dāng)前位置:上海乾思生物科技有限公司>>技術(shù)文章>>膽囊收縮素ELISA試劑盒 實(shí)驗(yàn)重復(fù)性好
引起 ELISA 測(cè)定結(jié)果與文獻(xiàn)報(bào)導(dǎo)不一致的原因主要有三點(diǎn),試劑因素、標(biāo)本因素和操作因素。試劑因素:●1. 試劑應(yīng)選擇靈敏度高、特異性好、穩(wěn)定性好、批間差小、操作方便的試劑。 2.不同廠家的試劑一定不能混用,包括底物和洗滌液。由于校準(zhǔn)標(biāo)準(zhǔn)有差異,還有抗體、檢測(cè)方法、試劑、交叉反應(yīng)等因素都會(huì)導(dǎo)致對(duì)樣本的檢測(cè)結(jié)果不一致。如:有的廠家酶標(biāo)板孔間 CV 值大于 20%,標(biāo)記酶的活性及顯色液的穩(wěn)定性比較差,使用劣質(zhì)的試劑必然導(dǎo)致結(jié)果的假陽(yáng)性或假陰性。 3. 要注意試劑的批號(hào)和出廠日期,雖然試劑的有效期多為 1 年,選擇剛出廠的試劑盒為宜。 4. 避免選擇假的 ELISA 試劑盒。有些廠家為夸大生產(chǎn) ELISA 的指標(biāo)范圍,用一種指標(biāo)來(lái)冒充其它指標(biāo),造成各種種屬、各種指標(biāo)都可以做的假象。標(biāo)本因素和操作因素:● 血清是常用的 ELISA 標(biāo)本,血漿一般可視為與血清同等的標(biāo)本,標(biāo)本引起的假陽(yáng)性和假陰性結(jié)果主要是干擾性物質(zhì)所致,分為內(nèi)源性物質(zhì)和外源性物質(zhì)兩種。 內(nèi)源性物質(zhì):有人認(rèn)為大約40%的人血清標(biāo)本中含有非特異性干擾物質(zhì),可以不同程度影響檢測(cè)結(jié)果。常見(jiàn)的干擾物質(zhì)有:類風(fēng)濕因子、補(bǔ)體、嗜異性抗體、嗜靶抗原自身抗體、醫(yī)源性誘導(dǎo)的抗鼠 Ig (s) 抗體、交叉反應(yīng)物質(zhì)和其它物質(zhì)等。外源性物質(zhì):外源性物質(zhì)常常是由于用于 ELISA測(cè)定的血標(biāo)本的采集、貯存等不當(dāng)所致。如標(biāo)本溶血、標(biāo)本被細(xì)菌污染、標(biāo)本貯存過(guò)久、標(biāo)本凝集不全和采血管中添加物等影響。
人類成纖維細(xì)胞(多種種屬)實(shí)驗(yàn)科研認(rèn)可品牌
膽囊收縮素ELISA試劑盒
檢測(cè)范圍:歡迎QQ或電話索取原版說(shuō)明書.
產(chǎn)品規(guī)格:96T/48T。
主要成分:酶標(biāo)板,試劑,標(biāo)準(zhǔn)品等
經(jīng)營(yíng)種類:進(jìn)口分裝和原裝、國(guó)產(chǎn)
性狀:盒裝液體
試劑盒保存:2-8℃低溫保存。
標(biāo)本:血清、、細(xì)胞上清液、尿液、體液、灌洗液、腦脊髓、心房水、胸房水、組織等。
ELISA常用的方法:雙抗體夾心法、間接法、競(jìng)爭(zhēng)法以及BAS-ELISA等。
預(yù)期應(yīng)用:ELISA法定量測(cè)定血清、、細(xì)胞培養(yǎng)上清或其它相關(guān)生物液體中的含量。
●穩(wěn)定轉(zhuǎn)染●:即進(jìn)入細(xì)胞的質(zhì)粒整合入細(xì)胞基因組中,并能隨細(xì)胞分裂穩(wěn)定傳遞下去。這是相對(duì)瞬時(shí)轉(zhuǎn)染而言的。瞬時(shí)轉(zhuǎn)染的表達(dá)時(shí)間短暫,外源基因?qū)胝匣蚪M的幾率非常低,絕大部分以游離形式存在,不能隨細(xì)胞分裂而一同復(fù)制,導(dǎo)致后拷貝數(shù)被稀釋,無(wú)法達(dá)到持續(xù)表達(dá)外源基因的目的。一般用轉(zhuǎn)染試劑進(jìn)行質(zhì)粒轉(zhuǎn)染,多為瞬時(shí)轉(zhuǎn)染。 ●一般如下情況需要構(gòu)建穩(wěn)定株●: 1. 長(zhǎng)期在目的細(xì)胞中研究基因功能,通過(guò)構(gòu)建穩(wěn)定株,可以大大降低頻繁轉(zhuǎn)染或者病毒包裝的成本,也極大方便實(shí)驗(yàn)研究; 2. 部分蛋白半衰期極長(zhǎng),瞬時(shí) RNA 只能干擾表達(dá),無(wú)法去除已經(jīng)表達(dá)的目的蛋白,通過(guò)構(gòu)建穩(wěn)定株可以實(shí)現(xiàn)更好的基因干擾效果; 3. 瞬轉(zhuǎn)往往會(huì)引入*拷貝數(shù)的表達(dá),導(dǎo)致因?yàn)槿藶橐蛩卦斐蓪?shí)驗(yàn)結(jié)果的不,構(gòu)建穩(wěn)定株可以幫助篩選拷貝數(shù)適量的細(xì)胞進(jìn)行實(shí)驗(yàn)研究; 4. 需要用誘導(dǎo)表達(dá)系統(tǒng)的,主要是一些致死基因或者是需要時(shí)空表達(dá)的; 5. 需要用細(xì)胞做動(dòng)物實(shí)驗(yàn)的,比如裸鼠成瘤等,往往需要構(gòu)建成穩(wěn)轉(zhuǎn)株。
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編輯:小檀20181011
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