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三種動物源食品中五lü酚檢測的前處理方法對比：

說明：

1、 一步快速凈化法來自《動物源食品中多重獸藥殘留快速萃取方法》，此方法由中國臺灣農(nóng)藥試驗所開發(fā)的獸殘質譜快檢技術，為中國臺灣地區(qū)的推薦公告方法。

2、 FaVEx-NM一步法凈化需要的耗材清單

2-1 離心管/移液搶/0.22μm濾頭/酸化乙腈溶液

2-2 強力振蕩器（手擬式更佳）/離心機

2-3 FaVEx-NM一步法凈化柱

《一步法快速凈化》的前處理方法：

原理：試樣中殘留的五lü酚經(jīng)10mL酸化乙腈提取后，強力震蕩、離心后，取5mL上清液加入FaVEx-NM柱管，柱下連接0.22μm濾頭，以每秒一滴的速度流出，濾液上機到LC-MSMS分析。

1-1 FaVEx-NM凈化柱不需活化/平衡/淋洗/洗脫

1-2 僅消耗10mL酸化乙腈，大大節(jié)省溶劑；

1-3 樣品提取液緩慢經(jīng)過填料后，雜質被保留在填料上，濾液即為目標溶液；

1-4 此方法不需要氮吹濃縮及溶劑轉溶，大大節(jié)省設備和時間；

此方法極度精簡前處理步驟，節(jié)省為“樣品溶液一步通過凈化柱"即完成凈化步驟，通過調整填料配方及萃取溶劑的比例，獲取符合定量分析要求的回收率和RSD。

參考：《FaVEx-NM一步法快速萃取凈化法 動物源食品中五lü酚殘留檢測 液質質法》

適用于禽畜肉、內臟、水產(chǎn)、奶、蛋等動物源食品中五lü酚鈉殘留的測定。

《GB 23200.92-2016》的前處理方法：

原理：試樣中殘留的五lü酚經(jīng)堿性乙腈水溶液提取后，過MAX固相萃取柱凈化，濃縮定容后，外標法，液質質法定量分析。

1-1 MAX柱，使用前依次使用5mL甲醇和5mL水活化平衡后使用

1-2 稱取2g左右基質后，加入堿性乙腈水溶液后強力振蕩、超聲提取5min，離心后取上清液合并為提取液

1-3 把上述提取溶液轉入經(jīng)過預處理的MAX柱中，經(jīng)過上樣、淋洗、洗脫后，收集的洗脫液氮吹濃縮至1mL，加水定容至2mL

1-4 過0.22μm濾膜后，上機到LC-MS/MS分析

此方法中有三個步驟比較消耗人力和時間：

一是經(jīng)過兩次堿性乙腈水溶液的提取，得到10mL左右的提取液；

二是MAX柱經(jīng)過活化、平衡、淋洗、洗脫等傳統(tǒng)SPE柱的預處理和使用步驟，相對復雜；

三是4mL左右的洗脫液氮吹濃縮至1mL左右，氮吹濃縮不僅耗費時間，批量濃縮時需要時時盯著，否則可能影響實驗結果的平行性。

參考：《GB 23200.92-2016 食品安全國家標準 動物源性食品中五lv酚殘留量的測定液相色譜-質譜法》適用于豬肝、豬腎、豬肉、牛奶、魚肉、蝦、蟹等動物源性食品中五lv酚殘留的測定。

《GB 29708-2013》的前處理方法：

原理：試樣中殘留的五lv酚鈉經(jīng)三lv乙酸沉淀蛋白，經(jīng)環(huán)己烷-乙酸乙酯溶液提取，經(jīng)乙酸酐-吡啶溶液衍生后，上機到GC-MS外標法定量分析。

1-1 稱取5g樣品，加水和三lü乙酸溶液萃取后，調節(jié)pH后再加有機溶劑沉淀蛋白，離心，提取有機層，重復一次，合并有機層后，于45℃旋轉蒸干。

1-2 加有機試劑衍生化后，于60℃下反應15min，加入碳酸鉀溶液，充分混勻后靜置分層，取有機相，供GC-MS測定。

此前處理方法中每個步驟都相對復雜，其中“沉淀蛋白、液液萃取、旋蒸蒸干、衍生化反應"，更要消耗大量人力、溶劑、時間和設備，而且不容易做到良好的結果平行性。這樣復雜的前處理操作方法，現(xiàn)在不常用了。

參考：《GB 29708-2013 食品安全國家標準 動物性食品中五lv酚鈉殘留量的測定 氣相色譜-質譜法》適用于豬的肌肉、肝臟和腎臟及雞的肌肉和肝臟組織中五lv酚鈉殘留量的檢測。

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