詳細(xì)介紹
參數(shù)規(guī)格:
產(chǎn)品名稱:Hoechst 33258染色液(0.1mM)
貨號:FSP173
產(chǎn)品規(guī)格:10 mL/50 mL
分類:熒光核酸試劑
儲存條件:-20℃避光保存,避免反復(fù)凍融。
運輸:低溫、避光,快遞免費送貨上門。
產(chǎn)品特點:
產(chǎn)品僅用于科研本產(chǎn)品就是根據(jù)保守區(qū)設(shè)計引物而開發(fā)的高靈敏 PCR檢測試劑盒 。
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儲存條件:
14℃或-20℃樣品收集、處理及保存方法
1. 血清:使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管,操作過程中避免任何細(xì)胞刺激,收集血液后,3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘將血清和紅細(xì)胞迅速小心地分離。
2. 血漿:EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000 轉(zhuǎn)離心30 分鐘取上清。
3. 細(xì)胞上清液:3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘去除顆粒和聚合物。
4. 組織勻漿:將組織加入適量生理鹽水搗碎。3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘取上清。
5. 保存:如果樣本收集后不及時檢測,請按一次用量分裝,凍存于-20℃,避免反復(fù)凍融,在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
探針法:
aqMan 探針是一種寡核苷酸探針,它的熒光與目的序列的擴增相關(guān)。它與目標(biāo)序列上游引物和下游引物之間的序列配對。熒光基團(tuán)連接在探針的5’ 末端,而淬滅劑則在3’ 末端。當(dāng)完整的探針與目標(biāo)序列配對時,熒光基團(tuán)發(fā)射的熒光因與3’ 端的淬滅劑接近而被淬滅。但在進(jìn)行延伸反應(yīng)時,聚合酶的5’ 外切酶活性將探針進(jìn)行酶切,使得熒光基團(tuán)與淬滅劑分離。隨著擴增循環(huán)數(shù)的增加,釋放出來的熒光基團(tuán)不斷積累。因此熒光強度與擴增產(chǎn)物的數(shù)量呈正比關(guān)系。相對于染料法,Taqman探針法具有更高的特異性和準(zhǔn)確性。
PCR實驗方法步驟:
方法
1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2:調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保7min。
3:伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4:PCR的電泳檢測:如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μl進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
NAMALWA(人Burkitt's淋巴瘤細(xì)胞)現(xiàn)貨供應(yīng)LRSAM1 (D1O5S) Rabbit mAb100 ul
PK-15(豬腎細(xì)胞)現(xiàn)貨供應(yīng)TAF15 (D8V6Q) Rabbit mAb100 ul
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CW-2(人結(jié)腸癌細(xì)胞)價格Oct-4A (C30A3) Rabbit mAb500 ul
MV3(人黑色素瘤細(xì)胞)報價CD45 (HI30) Mouse mAb (PE-Cy7®Conjugate)100 ul
PA319(人大腸癌細(xì)胞)價格Phospho-C/EBPα (Ser21) Antibody20 ul
SF-295(人XG惡性膠質(zhì)瘤細(xì)胞)報價Phospho-C/EBPα (Ser21) Antibody100 ul
MS751(人子宮頸表皮癌細(xì)胞)說明書Phospho-HER3/ErbB3 (Tyr1289) (D1B5) Rabbit mAb100 ul
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人主動脈平滑肌細(xì)胞*培養(yǎng)基報價Phospho-C/EBPα (Thr222/226) Antibody100 ul
人腦靜脈血管平滑肌細(xì)胞*培養(yǎng)基說明書4E-BP2 Antibody20 ul
人腦膜細(xì)胞*培養(yǎng)基價格4E-BP2 Antibody100 ul
人晶狀體上皮細(xì)胞*培養(yǎng)基價格Phospho-4E-BP1 (Thr37/46) (236B4) Rabbit mAb (Alexa Fluor® 488 Conjugate)100 ul
大鼠腸上皮細(xì)胞*培養(yǎng)基報價ZO-2 Antibody20 ul
大鼠膀胱平滑肌細(xì)胞*培養(yǎng)基價格ZO-2 Antibody100 ul
Hoechst 33258染色液(0.1mM)問號狀鉤端螺旋體種屬: Leptospira│interrogans凍干物安全等級: 2模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: 血清學(xué)分型 Pyrogenes biggis培養(yǎng)基: CM0114生長條件: 37℃存儲條件: -80℃冰箱凍結(jié)法
Marinobacter│hydrocarbonoclasticus分離基物: 沉積物凍干物安全等級: 1模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: 海洋菌種資源培養(yǎng)基: 0223生長條件: 30℃存儲條件: 液氮超低溫凍結(jié)法;真空冷凍干燥法
Rhizopus│sp.凍干物安全等級: 1模式菌株: no培養(yǎng)基: 0014生長條件: 25-28℃存儲條件: 液氮超低溫凍結(jié)法;真空冷凍干燥法
Bacillus│firmus Bredemann and Werner分離基物: 根內(nèi)斜面培養(yǎng)物安全等級: 1模式菌株: no培養(yǎng)基: 141生長條件: 28存儲條件: 定期移植法
Aspergillus│awamori凍干物安全等級: 1模式菌株: no培養(yǎng)基: 0015生長條件: 25-28℃存儲條件: 液氮超低溫凍結(jié)法;真空冷凍干燥法
Penicillium│aurantiogriseum凍干物安全等級: 1模式菌株: no培養(yǎng)基: 0013生長條件: 25℃存儲條件: 液氮超低溫凍結(jié)法;真空冷凍干燥法
Haemophilus│parasuis分離基物: 心血凍結(jié)物安全等級: 2模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: 科研教學(xué)培養(yǎng)基: 0生長條件: 37存儲條件: 真空冷凍干燥法;
Staphylococcus│aureus分離基物: 病料凍結(jié)物安全等級: 2模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: 用于科研培養(yǎng)基: 335生長條件: 37
Clostridium│perfringens Type D分離基物: 腸毒血癥羊凍干物安全等級: 2模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: 科研及血清定型培養(yǎng)基: 52生長條件: 35-37存儲條件: 真空冷凍干燥法;
操作程序:
產(chǎn)品僅用于科研由您提供該實驗中目的基因的相關(guān)資料(如:基因名稱、序列等信息),我們共同探討服務(wù)的可能性和技術(shù)路線;
商定服務(wù)收費、付款方式、服務(wù)期限等,并簽定技術(shù)服務(wù)合同。
有您提供實驗所需的足夠量的實驗樣本(100mg組織或107個細(xì)胞),本公司不接受您提供的RNA樣本PCR所需引物/探針(如果用探針法),可以由您自己提供,也可以委托本公司設(shè)計合成(費用另計)。如果由您自己提供,必須是PAGE純化的高質(zhì)量的干粉,本公司不接受已溶解的引物/探針。
我們進(jìn)行RNA抽提、RNA定量、反轉(zhuǎn)錄、Real-time PCR擴增、數(shù)據(jù)分析。
提供實驗報告,包括實驗過程、所用儀器試劑、擴增曲線、標(biāo)準(zhǔn)曲線和相關(guān)分析數(shù)據(jù)等。