乙酸凝膠緩沖液公司正在銷售的產(chǎn)品：Anti-TNS3 Antibody大鼠抗中性粒/中心體抗體
Anti-TOMM20 Antibody人蕈堿型乙酰膽堿受體
Anti-TOP2B Antibody大鼠磷脂酰肌抗體IgG/IgM
Anti-TOP2A Antibody人糖蛋白49A
Anti-TOP3B Antibody人抑制素β-B
Anti-TOP3A Antibody大鼠復(fù)合前列腺特異性抗原

公司產(chǎn)品僅用于科研具有質(zhì)量可靠、效果穩(wěn)定、靈敏度高、操作簡單、易保存等特點，咨詢并訂購！

產(chǎn)品分類：蛋白電泳

儲存條件：4℃,12個月

用途：配置乙酸非變性連續(xù)PAGE凝膠的配制

注意事項：主要由乙酸鈉、冰乙酸組成,按不同比例混合獲得相應(yīng)pH值。

 

 

配制與標(biāo)定的實驗原理：

1、用EDTA二鈉鹽配制EDTA標(biāo)準(zhǔn)溶液的原因；

EDTA是四元酸，是一種白色晶體粉末，常用H4Y表示，溶解度很小，室溫溶解度為0.02g/100g H2O。

2、標(biāo)定EDTA標(biāo)準(zhǔn)溶液的工作基準(zhǔn)試劑，基準(zhǔn)試劑的預(yù)處理：稱量前一般應(yīng)先用稀鹽酸洗去氧化層，然后用水洗凈，烘干。

配制步驟：

1、取適量鋅片放在100mL燒杯中，用0.1mol·L-1 HCl溶液（自配）清洗1min，再用自來水、純水洗凈，烘干、冷卻。

2、用直接稱量法在干燥小燒杯中準(zhǔn)確稱取0.15～0.2g Zn，蓋好小表面皿。

3、用滴管從燒杯口加入5mL 1:1 鹽酸，待Zn溶解后吹洗表面皿、杯壁，小心地將溶液轉(zhuǎn)移至250mL容量瓶中，用純水稀釋至標(biāo)線，搖勻。

 

 

實驗方法與判定：

1.對照品溶液的穩(wěn)定性

2.對照品溶液的配制：精密量取腦對照品適量，加無水乙醇制成每1ml含腦1mg的溶液，作為對照品溶液。

3.色譜條件：以交聯(lián)鍵合聚乙二醇為固定相的毛細管柱；柱溫120℃；進樣口溫度250℃；檢測器溫度250℃；分流進樣，分流比10:1。理論塔板數(shù)按腦計算應(yīng)不低于10000。

4.實驗方法：配制的對照品溶液，一份置冷處保存，一份置室溫中保存，在第1、3、7、10、15天重新配制一份對照品溶液，三種儲備液同時稀釋制成每1ml中約含50ug的溶液。照氣相色譜法，并依據(jù)新對照品的峰面積計算原對照品溶液的含量。記錄下來，保證原對照品溶液含量在考察期相對平均偏差不超過2.0%，驗證對照品溶液在使用期內(nèi)穩(wěn)定可靠。

哈茨木霉青霉G抗體Anti-CCKBR AntibodyGTP活化蛋白(GAP)

松鼠葡萄球菌松鼠亞種磷酯Cβ1抗體Anti-CCL1 AntibodyGTPNRas(NRAS)

紅色紅曲霉富含脯/絲卷曲螺旋蛋白1抗體Anti-CCL1 AntibodyGremlin-1蛋白(GREM1)

根瘤菌NADPH氧化活化蛋白p47抗體Anti-CCL11 AntibodyGDP解離抑制因子2(GdI2)

大豆慢生根瘤菌蛋白體PRS7抗體Anti-CCL11 AntibodyG1/S特異性周期蛋白E1(CCNE1)

黑腐皮殼菌蛋白體PSMα1抗體Anti-CCL11 AntibodyF-肌動蛋白(F-actin)

中華根瘤菌蛋白體PSMα2抗體Anti-CCL11 AntibodyFOS 樣抗原2(FOSL2)

解淀粉芽孢桿菌解淀粉亞種蛋白體PSMα6抗體Anti-CCL13 AntibodyFMS樣酪激3配體(Flt-3L)

竹喙球菌蛋白體PSMα7抗體Anti-CCL17 AntibodyFMS樣酪激3(Flt3)

猴頭菇孕誘導(dǎo)阻斷因子1抗體Anti-CCL19 AntibodyFc受體樣蛋白3(FCRL3)

鏈格孢多腺苷二磷多聚16抗體Anti-CCL18 AntibodyFAS配體(Fas L)

釀酒酵母成對樣同源結(jié)構(gòu)域轉(zhuǎn)錄因子2抗體Anti-CCL16 AntibodyFAM172A蛋白(FAM172A)

微紅帚霉RNA聚合II抗體Anti-CCL2 AntibodyE選擇(E-Selectin/CD62E)

加鏈霉菌T淋巴凋亡相關(guān)蛋白TDAG51抗體Anti-CCL2 AntibodyE選擇(E-Sel)

德假單胞菌蛋白調(diào)解因子9抗體Anti-CCL21 AntibodyE鈣粘著蛋白/上皮性鈣黏附蛋白(E-Cad)

大腸埃希氏菌胰腺激抗體Anti-CCL20 AntibodyEphrin-B2(EFNB2)

地衣芽孢桿菌Bacillus│licheniformis 質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品

巨大芽孢桿菌Bacillus megaterium 質(zhì)量規(guī)格：>98%,進分

鹽漬鹽單胞菌Halomonas│salaria 質(zhì)量規(guī)格：>99%,BR
乙酸凝膠緩沖液ABCG1/FITC  熒光su標(biāo)記兔抗人、大、小鼠ABCG1IgG規(guī)格： 0.2ml

ABCG2/FITC  熒光su標(biāo)記兔抗人、大、小鼠ABCG2IgG規(guī)格： 0.2ml

ABCG4/FITC  熒光su標(biāo)記抗ABC膜轉(zhuǎn)運蛋白IgG規(guī)格： 0.2ml

c-Abl /FITC  熒光su標(biāo)記兔抗人、大、小鼠非受體酪氨suan激meic-AblIgG規(guī)格： 0.2ml

ABL2/FITC  熒光su標(biāo)記ABL2IgG規(guī)格： 0.2ml

使用方法：

1.  常用篩選濃度

注意：用來篩選穩(wěn)轉(zhuǎn)株的工作濃度需要根據(jù)細胞類型，培養(yǎng)基，生長條件和細胞代謝率而變化，推薦使用濃度為50-1000μg/mL。對于第一次使用的實驗體系建議通過建立殺滅曲線（kill curve），即劑量反應(yīng)性曲線，來確定最佳篩選濃度。

一般而言，哺乳動物細胞50-500μg/mL；細菌/植物細胞20-200μg/mL；真菌300-1000μg/mL。

2. 殺滅曲線的建立

注意：為了篩選得到穩(wěn)定表達目的蛋白的細胞株，需要確定能夠殺死未轉(zhuǎn)染宿主細胞的抗生素濃度，可通過建立殺滅曲線（劑量反應(yīng)曲線）來實現(xiàn)，至少選擇5個濃度。

1）  第一天：未轉(zhuǎn)化的細胞按照20-25%的細胞密度鋪在合適的培養(yǎng)板上，37℃，CO2培養(yǎng)過夜；注：對于需要更高密度來檢測活力的細胞，可增加接種量。

2）  根據(jù)細胞類型，設(shè)定合適范圍內(nèi)的濃度梯度。以哺乳動物細胞為例，可設(shè)定50，100，250，500，750，1000μg/mL。先用去離子水或者PBS buffer按照1:10的比例將母液稀釋到5 mg/ml，然后按照下表稀釋到相應(yīng)濃度的工作液。

3）  第二天：替換舊的培養(yǎng)基，換用新鮮配制的含有相應(yīng)濃度藥物的培養(yǎng)基。每個濃度做三個平行孔。

4）  接下來每3-4天更換新的含藥物培養(yǎng)基。

5）  按照固定的周期（如每2天）進行活細胞計數(shù)來確定阻止未轉(zhuǎn)染細胞生長的恰當(dāng)濃度。選擇在理想的天數(shù)（通常是7-10天）內(nèi)能夠殺死絕大多數(shù)細胞的濃度為穩(wěn)定轉(zhuǎn)染細胞篩選用的工作濃度。

3.   穩(wěn)定轉(zhuǎn)染細胞的篩選

1）  轉(zhuǎn)染48h后，用含有適當(dāng)濃度的潮霉素B篩選培養(yǎng)基來傳代細胞（直接傳代或者稀釋后傳代）。

注意：細胞處于活躍分裂狀態(tài)時抗生素的殺傷。則當(dāng)細胞過于稠密，其效率會降低。為了得到較好的篩選效果，最好將細胞稀釋至豐度不超過25%

2）  每隔3-4天更換含有藥物的篩選培養(yǎng)液。

3）  篩選7天后觀察并評估細胞克隆（集落）的形成情況。集落的形成可能還需要一周或者更多的時間，這取決于宿主細胞類型，轉(zhuǎn)染，以及篩選效果。

4）   挑取并轉(zhuǎn)移5-10個抗性克隆于35mm細胞培養(yǎng)板，繼續(xù)用含藥物的篩選培養(yǎng)液維持培養(yǎng)7天。

5）   之后更換正常培養(yǎng)基培養(yǎng)即可。