5（6）-羧基熒光素二乙酸酯實(shí)時(shí)熒光定量PCR技術(shù)有效地解決了傳統(tǒng)定量只能終點(diǎn)檢測(cè)的局限，實(shí)現(xiàn)了每一輪循環(huán)均檢測(cè)一次熒光信號(hào)的強(qiáng)度，并記錄在電腦軟件之中，通過(guò)對(duì)每個(gè)樣品Ct值的計(jì)算，根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)獲得定量結(jié)果。

探針?lè)ǎ?/font>
aqMan 探針是一種寡核苷酸探針，它的熒光與目的序列的擴(kuò)增相關(guān)。它與目標(biāo)序列上游引物和下游引物之間的序列配對(duì)。熒光基團(tuán)連接在探針的5’ 末端，而淬滅劑則在3’ 末端。當(dāng)完整的探針與目標(biāo)序列配對(duì)時(shí)，熒光基團(tuán)發(fā)射的熒光因與3’ 端的淬滅劑接近而被淬滅。但在進(jìn)行延伸反應(yīng)時(shí)，聚合酶的5’ 外切酶活性將探針進(jìn)行酶切，使得熒光基團(tuán)與淬滅劑分離。隨著擴(kuò)增循環(huán)數(shù)的增加，釋放出來(lái)的熒光基團(tuán)不斷積累。因此熒光強(qiáng)度與擴(kuò)增產(chǎn)物的數(shù)量呈正比關(guān)系。相對(duì)于染料法,Taqman探針?lè)ň哂懈叩奶禺愋院蜏?zhǔn)確性。
參數(shù)規(guī)格：
產(chǎn)品名稱(chēng)：5(6)-羧基熒光素二乙酸酯
貨號(hào)：FSP178
產(chǎn)品規(guī)格：100 mg
分類(lèi)：熒光核酸試劑
儲(chǔ)存條件：-20℃避光保存，避免反復(fù)凍融。
運(yùn)輸：低溫、避光，快遞免費(fèi)送貨上門(mén)。
產(chǎn)品特點(diǎn)：
產(chǎn)品僅用于科研本產(chǎn)品就是根據(jù)保守區(qū)設(shè)計(jì)引物而開(kāi)發(fā)的高靈敏 PCR檢測(cè)試劑盒 。
儲(chǔ)存條件：
14℃或－20℃樣品收集、處理及保存方法
1. 血清：使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管，操作過(guò)程中避免任何細(xì)胞刺激，收集血液后，3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘將血清和紅細(xì)胞迅速小心地分離。
2. 血漿：EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000 轉(zhuǎn)離心30 分鐘取上清。
3. 細(xì)胞上清液：3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘去除顆粒和聚合物。
4. 組織勻漿：將組織加入適量生理鹽水搗碎。3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘取上清。
5. 保存：如果樣本收集后不及時(shí)檢測(cè)，請(qǐng)按一次用量分裝，凍存于-20℃，避免反復(fù)凍融，在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
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PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟：
方法
1：在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o(wú)菌0.5ml離心管中。     
10×PCR buffer                   
5 μl     dNTP mix （2mM）             
4 μl     引物1（10pM）                 
2 μl     引物2（10pM）                 
2 μl     Taq酶 （2U/μl）               
1 μl     DNA模板（50ng-1μg/μl） 
1 μl      加ddH2O至 50 μl 
視PCR儀有無(wú)熱蓋，不加或添加石蠟油。
2：調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴(kuò)增。一般：在93℃預(yù)變性3-5min，進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，在72℃ 保7min。
3：伴放線(xiàn)放線(xiàn)桿菌探針?lè)晒舛縋CR試劑盒結(jié)束反應(yīng)，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃長(zhǎng)期保存。
4：PCR的電泳檢測(cè)：如在反應(yīng)管中加有石蠟油，需用100μl進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測(cè)。
操作程序：
產(chǎn)品僅用于科研由您提供該實(shí)驗(yàn)中目的基因的相關(guān)資料（如：基因名稱(chēng)、序列等信息），我們共同探討服務(wù)的可能性和技術(shù)路線(xiàn)；
商定服務(wù)收費(fèi)、付款方式、服務(wù)期限等，并簽定技術(shù)服務(wù)合同。
有您提供實(shí)驗(yàn)所需的足夠量的實(shí)驗(yàn)樣本（100mg組織或107個(gè)細(xì)胞），本公司不接受您提供的RNA樣本PCR所需引物/探針（如果用探針?lè)ǎ?，可以由您自己提供，也可以委托本公司設(shè)計(jì)合成（費(fèi)用另計(jì)）。如果由您自己提供，必須是PAGE純化的高質(zhì)量的干粉，本公司不接受已溶解的引物/探針。
我們進(jìn)行RNA抽提、RNA定量、反轉(zhuǎn)錄、Real-time PCR擴(kuò)增、數(shù)據(jù)分析。
提供實(shí)驗(yàn)報(bào)告，包括實(shí)驗(yàn)過(guò)程、所用儀器試劑、擴(kuò)增曲線(xiàn)、標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)和相關(guān)分析數(shù)據(jù)等。
尿苷二磷酸酶使用說(shuō)明書(shū)Bim (C34C5) Rabbit mAb (Alexa Fluor® 700 Conjugate)100 ul

酰基輔酶A合成酶保存CTCF Antibody100 ul

葉綠素AB混合物使用說(shuō)明書(shū)Phospho-YB1 (Ser102) (C34A2) Rabbit mAb100 ul

蘇木色精保存IQGAP1 (D6E3J) Rabbit mAb100 ul

蘇丹Ⅳ使用說(shuō)明書(shū)Di-Methyl-Histone H3 (Lys36) (C75H12) Rabbit mAb20 ul

二氯熒光素實(shí)驗(yàn)步驟Di-Methyl-Histone H3 (Lys36) (C75H12) Rabbit mAb100 ul

茜素黃R實(shí)驗(yàn)步驟Phospho-PLCbeta3 (Ser537) (D8K2R) Rabbit mAb100 ul

酸性茜素藍(lán)B價(jià)格ASF1B (C70E2) Rabbit mAb1 Kit

偶氮氯膦Ⅰ實(shí)驗(yàn)步驟p70 S6 Kinase Substrates Antibody Sampler Kit100 ul

偶氮氯膦mN保存Phospho-IRF-3 (Ser396) (D6O1M) Rabbit mAb150 ul

鄰聯(lián)茴香鹽酸鹽價(jià)格VEGF Receptor 2 Control Proteins100 ul

二甲酚橙四鈉使用說(shuō)明書(shū)IKKε (D20G4) Rabbit mAb20 ul

玫瑰紅6G實(shí)驗(yàn)步驟IKKε (D20G4) Rabbit mAb100 ul

1-基-3-甲基-4-甲?；吝蜻獙?shí)驗(yàn)步驟Pim-1 Antibody1 Kit

4-羥基偶氮價(jià)格PhosphoPlus®α-Synuclein (Ser129) Antibody Duet5 mg

鉍試劑Ⅰ實(shí)驗(yàn)步驟SBI-020 ul

4-（2-吡啶偶氮）間二酚鈉鹽保存DYKDDDDK Tag Antibody (Binds to same epitope as Sigma's Anti-FLAG® M2 Antibody) (Biotinylated)100µg
5(6)-羧基熒光素二乙酸酯Saccharomyces│cerevisiae var.ellipsoideus凍干物安全等級(jí): 1模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: 葡萄酒用菌培養(yǎng)基: CM0077生長(zhǎng)條件: 28℃存儲(chǔ)條件: 真空冷凍干燥法；定期移植法

Pisolithus│tinctorius (Pers.) Coker & Couch分離基物: 子實(shí)體斜面培養(yǎng)物安全等級(jí): 1模式菌株: no培養(yǎng)基: 14生長(zhǎng)條件: 28存儲(chǔ)條件: 定期移植法

Alcanivorax│venustensis分離基物: 水樣/深層海水凍干物安全等級(jí): 1模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: 有機(jī)污染物降解菌/石油烴類(lèi)降解菌培養(yǎng)基: 821生長(zhǎng)條件: 25℃存儲(chǔ)條件: 液氮超低溫凍結(jié)法；-80℃冰箱凍結(jié)法；真空冷凍干燥法

深紅紫鏈霉菌種屬: Streptomyces│violaceorubidus凍干物安全等級(jí): 1模式菌株: yes應(yīng)用領(lǐng)域: 模式菌株培養(yǎng)基: 0038生長(zhǎng)條件: 28℃存儲(chǔ)條件: 液氮超低溫凍結(jié)法;真空冷凍干燥法

Streptomyces│venezuelae分離基物: 土壤凍干物安全等級(jí): 1模式菌株: no培養(yǎng)基: 12生長(zhǎng)條件: 30℃存儲(chǔ)條件: 真空冷凍干燥法

Escherichia│coli分離基物: 乳汁凍干物安全等級(jí): 2模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: 研究分析培養(yǎng)基: 335生長(zhǎng)條件: 37存儲(chǔ)條件: 真空冷凍干燥法;

Escherichia│coli分離基物: 土壤斜面培養(yǎng)物；凍干物安全等級(jí): 1模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: 動(dòng)物疫苗培養(yǎng)基: 411生長(zhǎng)條件: 37℃存儲(chǔ)條件: 液氮超低溫凍結(jié)法；-80℃冰箱凍結(jié)法；真空冷凍干燥法

Rahnella│sp.分離基物: 土壤/南極土壤凍干物安全等級(jí): 1模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: 待定培養(yǎng)基: 33生長(zhǎng)條件: 20-25℃存儲(chǔ)條件: 液氮超低溫凍結(jié)法；-80℃冰箱凍結(jié)法；真空冷凍干燥法

Streptomyces│sp.分離基物: 鹽堿土凍干物安全等級(jí): 1模式菌株: no培養(yǎng)基: 331生長(zhǎng)條件: 37℃存儲(chǔ)條件: 液氮超低溫凍結(jié)法；-80℃冰箱凍結(jié)法；真空冷凍干燥法