商品介紹:
商品介紹 測(cè)定意義: 花色苷是一類易溶于極性溶劑的天然色素,屬黃酮類化合物?;ㄉ諒V泛存在于植物的根、莖、葉、花和果實(shí)中,使其呈現(xiàn)由紅到紫等不同顏色,是植物主要的呈色物質(zhì)。 測(cè)定原理: 采用pH示差法測(cè)定花色苷含量,當(dāng)pH為1.0時(shí)花色苷在530nm處有最大吸收峰,而當(dāng)pH為4.5時(shí),花色苷轉(zhuǎn)變?yōu)闊o色查爾酮形式,在530處無吸收峰, 利用此特性分別測(cè)定在不同pH下的530nm和700nm處的吸光度值。pH示差法減少了溶液pH和溶劑差異的影響,排除了其他非花色苷類物質(zhì)對(duì)檢測(cè)結(jié)果的干擾。 需自備的儀器和用品: 可見分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、水浴鍋、可調(diào)式移液器、微量石英比色皿/96孔板、研缽和蒸餾水。 |
公司產(chǎn)品僅供科研使用:
常見樣本處理方法:
1、血清(漿)樣品:直接檢測(cè)。
2、細(xì)菌、細(xì)胞或組織樣品的制備: 細(xì)菌或培養(yǎng)細(xì)胞:先收集細(xì)菌或細(xì)胞到離心管內(nèi),離心后棄上清;按照細(xì)菌或細(xì)胞數(shù)量(104個(gè)):提取液體積(mL)為500~1000:1的比例(建議500萬細(xì)菌或細(xì)胞加入1mL提取液) ,超聲波破碎細(xì)菌或細(xì)胞(冰浴,功率20%或200W,超聲3s,間隔10s,重復(fù)30次)8000g 4℃離心10min,取上清,置冰上待測(cè)。組織:按照組織質(zhì)量(g) :提取液體積(mL)為1:5~10的比例(建議稱取約0.1g組織,加入1mL提取液),進(jìn)行冰浴勻漿。8000g 4℃離心10min,取上清,置冰上待測(cè)。
產(chǎn)品優(yōu)點(diǎn)如下:
1、快速簡(jiǎn)便:雙試劑,直接操作,快速、簡(jiǎn)便。
2、取樣量微:需要的樣本量是羥胺法的1/10。
3、靈敏度高:檢測(cè)線0.5U/ml,是羥胺法5倍,鄰苯三酚法的200倍
4、穩(wěn)定性好:批內(nèi)CV=5.50%,批間CV=3.32%,試劑盒2~8℃存放3個(gè)月有效。
5、再現(xiàn)性好:變異系數(shù)CV=1.2%。6、回收試驗(yàn): X =102.3%。7、受外界影響因素小:干擾因素少,重復(fù)性強(qiáng)。且特異性強(qiáng),不受類SOD物質(zhì)的干擾8、測(cè)試面廣:可測(cè)動(dòng)物血液、組織、各種體液、灌流液等、各種培養(yǎng)細(xì)胞、細(xì)菌、植物組織、各種水產(chǎn)以及化妝品、保健品等,效果均佳。
測(cè)定步驟:
1.加樣
1. 除包被外都需45度加樣
2.加樣體積要準(zhǔn)確
3.管底加樣,不能加在管壁上
4.加樣時(shí)不能產(chǎn)生氣泡
2.溫浴
1.加標(biāo)本后和加結(jié)合物后,應(yīng)立即放入按規(guī)定的反應(yīng)溫 度的水浴箱。
2.各ELISA板不應(yīng)疊在一起。
3.為避免蒸發(fā),板上應(yīng)加蓋,或?qū)迤椒旁诘撞繅|有濕 紗布的金屬濕盒中。
4.加入底物后,反應(yīng)的時(shí)間和溫度通常不做嚴(yán)格要求。 如室溫高于20℃,ELISA板可避光放在實(shí)驗(yàn)臺(tái)上,以便 不時(shí)觀察,待對(duì)照管顯色適當(dāng)時(shí),即可終止酶反應(yīng)。
3.洗滌
1.洗滌在ELISA過程中不是反應(yīng)步驟,但卻 是決定實(shí)驗(yàn)成敗的關(guān)鍵。
2.目的是洗去反應(yīng)液中沒有與固相抗原或 抗體結(jié)合的物質(zhì)以及在反應(yīng)過程中非特 異性吸附于固相載體的干擾物質(zhì)。
4.讀板
1.陰性對(duì)照顏色極淺,在定性測(cè)定中一般 可采用目視比色。
2.如用酶標(biāo)儀測(cè)定結(jié)果,準(zhǔn)確性決定于 ELISA板底的平整與透明度、酶標(biāo)儀的質(zhì) 量和軟件的算法。
實(shí)驗(yàn)方法學(xué):
一、肝素的配制:
市售肝素凍干粉140單位/mg,1克瓶裝,每瓶140,000單位,稱取0.1克肝素凍干粉,加生理鹽水5ml,配成2800單位/ml。取50~100μl濕潤(rùn)管壁,可抗凝人血3~5ml,血液不會(huì)凝固。老鼠血易凝固,所以最好更濃一些??梢匀?.1克肝素凍干粉,加3ml生理鹽水溶解后,取50~100μl,可抗凝鼠血2~4ml。
肝素抗凝管的制備:取0.1克肝素凍干粉,加2.5ml生理鹽水。取100μl~150μl滴入塑料或玻璃管中,濕潤(rùn)管壁,低于80℃小烤箱中(可以用烤面包的小烤箱),橫向轉(zhuǎn)動(dòng),每隔5~10分鐘轉(zhuǎn)動(dòng)一次,直至干燥后放入4℃保存,可使2~5ml血液不凝固。
二、血液樣本的收集:
全血根據(jù)收集的條件,分成不抗凝和抗凝兩種。同時(shí),不抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血清;抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血漿。
1、不抗凝收集血清:將收集好的全血,靜置1~2小時(shí),直接低速離心分離出血清待用或保存。
2、抗凝收集血漿: 收集抗凝全血,輕輕顛倒充分抗凝后,可直接低速離心分離血漿(也可靜置半小時(shí)左右再低速離心分離血漿)待用或保存。根據(jù)不同抗凝劑的性能特征,選擇合適的抗凝劑。實(shí)驗(yàn)室常用的抗凝劑有肝素的各種鹽、EDTA
選擇抗凝的注意點(diǎn):
①、每一份樣本所加的抗凝劑的量要一致,同時(shí)所取的全血的量也要盡量一致;
②、收集抗凝全血后一定要輕輕顛倒,充分抗凝,防止部分血液未接觸到抗凝劑而導(dǎo)致凝固;
③、抗凝全血收集的血漿相對(duì)較多(1ml抗凝全血能分離出0.4~0.5ml血漿);
④、抗凝收集的血漿冷凍保存后,解凍時(shí)可能會(huì)出現(xiàn)絮狀渾濁,如有則需要離心去掉渾濁后
用于測(cè)定。
Mdm2p53結(jié)合蛋白同源物(MDM2)英文名:MDM2 ELISA Kit磷化半胱蛋白9抗體包裝1g
M2-型激(PKM2)英文名:PKM2 ELISA Kit磷化半胱蛋白9抗體包裝250mg
L-型電壓依賴性鈣離子通道α1D亞基(CACNα1D)英文名:CACNα1D ELISA Kit磷化β 連環(huán)蛋白抗體包裝5g
L-型電壓依賴鈣離子通道α1S亞基(CACNα1S)英文名:CACNα1S ELISA Kit磷化β 連環(huán)蛋白抗體包裝1g
L-型電壓依賴鈣離子通道α1F亞基(CACNα1F)英文名:CACNα1F ELISA Kit磷化β 連環(huán)蛋白抗體包裝5g
L-型電壓依賴鈣離子通道α1C亞基(CACNα1C)英文名:CACNα1C ELISA Kit磷化β 連環(huán)蛋白抗體包裝5g
Lin-28同源物A(LIN28A)英文名:LIN28A ELISA Kit造血干抗原CD133抗體包裝50mg
L1-細(xì)胞粘附分子(L1CAM)英文名:L1CAM ELISA Kit1號(hào)染色體開放閱讀框138抗體包裝100mg
Kruppel樣因子1(KLF1)英文名:KLF1 ELISA Kit6號(hào)染色體開放閱讀框50抗體包裝1g
Klotho蛋白(KL)英文名:KL ELISA Kit1號(hào)染色體開放閱讀框151抗體包裝25ml
Klothoβ蛋白(KLβ)英文名:KLβ ELISA Kit腫瘤壞死因子受體超家族成員9抗體包裝5ml
Ki-67蛋白(Ki67P)英文名:Ki67P ELISA Kit復(fù)合前列腺特異性抗原單克抗體包裝100g
JunB原癌基因(JUNB)英文名:JUNB ELISA Kit組織蛋白z抗體包裝25g
Jagged1蛋白(JAG1)英文名:JAG1 ELISA Kit2號(hào)染色體開放閱讀框84抗體包裝1g
IL2誘導(dǎo)T細(xì)胞激(ITK)英文名:ITK ELISA Kit磷化鈣/鈣調(diào)依賴蛋白激2α抗體包裝1g
釀酒酵母Saccharomyces│cerevisiae 質(zhì)量規(guī)格:HPLC>99%,標(biāo)準(zhǔn)品乙型肝炎病核心抗體IgM試劑盒鹽甜菜堿;Betaine hydroc
雜色曲霉原變種Aspergillus│versicolor var. versicolor 質(zhì)量規(guī)格:>99%,BR乙型肝炎病核心抗體IgG試劑盒鹽堿;Cephaeline hy
弓形蟲(GJS-4株)Toxoplasma│gondii 質(zhì)量規(guī)格:HPLC>99%,標(biāo)準(zhǔn)品乙型肝炎病核心抗體試劑盒α-亞油;α-Linoleic aci
植物花色苷測(cè)試盒100管/96樣紅色紅曲 3-甲氧基-4-氧代-1-羧酸叔丁酯反狀腺原Elisa
平菇(江都156) 抗氧劑 702補(bǔ)體因子H相關(guān)蛋白1Elisa
Pseudomonas entomophila L48 DL-氨酰甘C1q腫瘤壞死因子相關(guān)蛋白3Elisa
產(chǎn)紫青霉 2-氨基-4-羥基吡啶鹽酸鹽14-3-3蛋白Elisa
植物乳桿 酮基丁二酸二乙酯流行性乙型腦炎病IGM抗體Elisa
椿象紅球 2-氟-6-(2H-1,2,3-噻唑-2-基)尿糖Elisa
沙場(chǎng)鏈霉 四乙基醋酸琥珀酰合成Elisa
糞腸球 2-氨基-噻唑-4-甲酰亞硝酸鹽Elisa
短密青霉 2-氨基-3,6-二氟甲酯周期依賴性激4Elisa
交鏈孢 Bz-rC亞磷酰單體乙肝兩對(duì)半Elisa
巨大芽孢桿 2-羥基-5-鹽酸鹽肌球蛋白輕鏈激Elisa
匯合海桿 4-溴-3,5-二三葉因子Elisa
釀酒酵母 2-氨基-4,7-二氫噻吩[2,3-C]吡喃-3-羧酸乙酯8-氧鳥Elisa
粉紅擲孢酵母 N-叔丁氧羰基吡咯-2-甲有機(jī)陰離子轉(zhuǎn)運(yùn)多肽Elisa
Marisediminicola 3-(N-Boc-氨甲基)OATP1B3Elisa