Tris-MOPS-SDS電泳緩沖液公司正在銷售的產(chǎn)品：Anti-TRADD Antibody人多巴D1受體
Anti-TRA2A Antibody大鼠血小板衍生生長因子AB
Anti-TRA2A Antibody人腎上腺素能a1A受體
Anti-TRADD Antibody大鼠血小板衍生生長因子可溶性受體α
Anti-TRAF3IP2 Antibody大鼠神經(jīng)營養(yǎng)因子4
Anti-TRAPPC1

產(chǎn)品分類：蛋白電泳

儲(chǔ)存條件：4℃,避光,6個(gè)月

用途：含有Tris、MOPS、SDS等組成。

公司產(chǎn)品僅用于科研具有質(zhì)量可靠、效果穩(wěn)定、靈敏度高、操作簡單、易保存等特點(diǎn)，咨詢并訂購！

 

配制與標(biāo)定的實(shí)驗(yàn)原理：

1、用EDTA二鈉鹽配制EDTA標(biāo)準(zhǔn)溶液的原因；

EDTA是四元酸，是一種白色晶體粉末，常用H4Y表示，溶解度很小，室溫溶解度為0.02g/100g H2O。

2、標(biāo)定EDTA標(biāo)準(zhǔn)溶液的工作基準(zhǔn)試劑，基準(zhǔn)試劑的預(yù)處理：稱量前一般應(yīng)先用稀鹽酸洗去氧化層，然后用水洗凈，烘干。

配制步驟：

1、取適量鋅片放在100mL燒杯中，用0.1mol·L-1 HCl溶液（自配）清洗1min，再用自來水、純水洗凈，烘干、冷卻。

2、用直接稱量法在干燥小燒杯中準(zhǔn)確稱取0.15～0.2g Zn，蓋好小表面皿。

3、用滴管從燒杯口加入5mL 1:1 鹽酸，待Zn溶解后吹洗表面皿、杯壁，小心地將溶液轉(zhuǎn)移至250mL容量瓶中，用純水稀釋至標(biāo)線，搖勻。

 

 

實(shí)驗(yàn)方法與判定：

1.對照品溶液的穩(wěn)定性

2.對照品溶液的配制：精密量取腦對照品適量，加無水乙醇制成每1ml含腦1mg的溶液，作為對照品溶液。

3.色譜條件：以交聯(lián)鍵合聚乙二醇為固定相的毛細(xì)管柱；柱溫120℃；進(jìn)樣口溫度250℃；檢測器溫度250℃；分流進(jìn)樣，分流比10:1。理論塔板數(shù)按腦計(jì)算應(yīng)不低于10000。

4.實(shí)驗(yàn)方法：配制的對照品溶液，一份置冷處保存，一份置室溫中保存，在第1、3、7、10、15天重新配制一份對照品溶液，三種儲(chǔ)備液同時(shí)稀釋制成每1ml中約含50ug的溶液。照氣相色譜法，并依據(jù)新對照品的峰面積計(jì)算原對照品溶液的含量。記錄下來，保證原對照品溶液含量在考察期相對平均偏差不超過2.0%，驗(yàn)證對照品溶液在使用期內(nèi)穩(wěn)定可靠。

使用方法：

1.  常用篩選濃度

注意：用來篩選穩(wěn)轉(zhuǎn)株的工作濃度需要根據(jù)細(xì)胞類型，培養(yǎng)基，生長條件和細(xì)胞代謝率而變化，推薦使用濃度為50-1000μg/mL。對于第一次使用的實(shí)驗(yàn)體系建議通過建立殺滅曲線（kill curve），即劑量反應(yīng)性曲線，來確定最佳篩選濃度。

一般而言，哺乳動(dòng)物細(xì)胞50-500μg/mL；細(xì)菌/植物細(xì)胞20-200μg/mL；真菌300-1000μg/mL。

2. 殺滅曲線的建立

注意：為了篩選得到穩(wěn)定表達(dá)目的蛋白的細(xì)胞株，需要確定能夠殺死未轉(zhuǎn)染宿主細(xì)胞的抗生素濃度，可通過建立殺滅曲線（劑量反應(yīng)曲線）來實(shí)現(xiàn)，至少選擇5個(gè)濃度。

1）  第一天：未轉(zhuǎn)化的細(xì)胞按照20-25%的細(xì)胞密度鋪在合適的培養(yǎng)板上，37℃，CO2培養(yǎng)過夜；注：對于需要更高密度來檢測活力的細(xì)胞，可增加接種量。

2）  根據(jù)細(xì)胞類型，設(shè)定合適范圍內(nèi)的濃度梯度。以哺乳動(dòng)物細(xì)胞為例，可設(shè)定50，100，250，500，750，1000μg/mL。先用去離子水或者PBS buffer按照1:10的比例將母液稀釋到5 mg/ml，然后按照下表稀釋到相應(yīng)濃度的工作液。

3）  第二天：替換舊的培養(yǎng)基，換用新鮮配制的含有相應(yīng)濃度藥物的培養(yǎng)基。每個(gè)濃度做三個(gè)平行孔。

4）  接下來每3-4天更換新的含藥物培養(yǎng)基。

5）  按照固定的周期（如每2天）進(jìn)行活細(xì)胞計(jì)數(shù)來確定阻止未轉(zhuǎn)染細(xì)胞生長的恰當(dāng)濃度。選擇在理想的天數(shù)（通常是7-10天）內(nèi)能夠殺死絕大多數(shù)細(xì)胞的濃度為穩(wěn)定轉(zhuǎn)染細(xì)胞篩選用的工作濃度。

3.   穩(wěn)定轉(zhuǎn)染細(xì)胞的篩選

1）  轉(zhuǎn)染48h后，用含有適當(dāng)濃度的潮霉素B篩選培養(yǎng)基來傳代細(xì)胞（直接傳代或者稀釋后傳代）。

注意：細(xì)胞處于活躍分裂狀態(tài)時(shí)抗生素的殺傷。則當(dāng)細(xì)胞過于稠密，其效率會(huì)降低。為了得到較好的篩選效果，最好將細(xì)胞稀釋至豐度不超過25%

2）  每隔3-4天更換含有藥物的篩選培養(yǎng)液。

3）  篩選7天后觀察并評(píng)估細(xì)胞克?。洌┑男纬汕闆r。集落的形成可能還需要一周或者更多的時(shí)間，這取決于宿主細(xì)胞類型，轉(zhuǎn)染，以及篩選效果。

4）   挑取并轉(zhuǎn)移5-10個(gè)抗性克隆于35mm細(xì)胞培養(yǎng)板，繼續(xù)用含藥物的篩選培養(yǎng)液維持培養(yǎng)7天。

5）   之后更換正常培養(yǎng)基培養(yǎng)即可。

乳乳球菌乳亞種端粒抑制因子PinX-1抗體Anti-CCR4 AntibodyCD14分子(CDl4)

黑色小單孢菌泌乳受體抗體Anti-CCR5 AntibodyCD147分子(CD147)

球孢白僵菌多囊腎蛋白1樣3抗體Anti-CCR4 AntibodyCD146分子(CD146)

寄生曲霉磷肌相互作用蛋白抗體Anti-CCR5 AntibodyCD134分子(CD134)

厚粉紅隔孢伏革菌核苷磷化抗體Anti-CCR9 AntibodyCD117分子(CD117)

根瘤菌磷化蛋白激C/p-PKC ε抗體Anti-CCR5 AntibodyCD10分子(CD10)

香菇膜調(diào)控蛋白Paralemmin 1抗體Anti-CCR5 AntibodyCC趨化因子受體7(CCR7)

猴假單胞菌脯羥化2抗體Anti-CCR6 AntibodyCC趨化因子受體5(CCR5)

莖腐霉鞘脂激活蛋白原抗體Anti-CCS AntibodyCC趨化因子受體2(CCR2)

大腸埃希氏菌外周二氮受體抗體Anti-CCT3 Antibody(PB0972)CC趨化因子受體1(CCR1)

柔嫩艾耳球蟲雄激誘導(dǎo)增殖抑制蛋白抗體Anti-CCT2 AntibodyCC趨化因子7(CCL7/MCP3/SCYA6/SCYA7)

葡萄座腔菌磷化絲抗體Anti-CCT5 AntibodyCC趨化因子5(CCL5/D17S136E/SCYA5)

金黃亞種中心粒周蛋白抗體Anti-CCT4 Antibody(PB1015)CCAAT增強(qiáng)子結(jié)合蛋白ε(C/EBPε)

澳型核果褐腐病菌小鼠增殖核抗原單克抗體Anti-CCT7 AntibodyCCAAT增強(qiáng)子結(jié)合蛋白δ(C/EBPδ)

Rhizobacter磷化視網(wǎng)膜母瘤樣蛋白p107抗體Anti-CD11c/Itgax AntibodyCCAAT增強(qiáng)子結(jié)合蛋白α(C/EBPα)

可可球二孢蛋白體PSMβ3抗體Anti-CCT8 AntibodycAMP反應(yīng)元件結(jié)合蛋白(CREB)

檸檬色赤桿菌Erythrobacter│citreus 質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR

銅綠假單胞菌Pseudomonas│aeruginosa 質(zhì)量規(guī)格：0.98

大腸埃希氏菌Escherichia│coli 質(zhì)量規(guī)格：0.98
Tris-MOPS-SDS電泳緩沖液Acinus(phospho S1180)/FITC  熒光su標(biāo)記腺泡磷suan化AcinusIgG規(guī)格： 0.2ml

Ack1/FITC  熒光su標(biāo)記Ack1IgG規(guī)格： 0.2ml

Ack1(Phospho-Tyr284) /FITC  熒光su標(biāo)記兔抗人、大、小鼠磷suan化Ack1IgG規(guī)格： 0.2ml

Phospho-Ack1(Tyr857/858) /FITC  熒光su標(biāo)記兔抗人、小鼠磷suan化Ack1IgG規(guī)格： 0.2ml

Phospho-Ack1(Tyr326) /FITC  熒光su標(biāo)記兔抗人、大、小鼠磷suan化Ack1IgG規(guī)格： 0.2ml