詳細介紹
商品屬性:
產(chǎn)品名稱 | |
檢測方法 | 微量法 |
產(chǎn)品規(guī)格 | 100管/96樣 |
產(chǎn)品貨號 | AS632153 |
商品介紹:
測定意義: 氧自由基作用于脂質(zhì)的不飽和脂肪酸,生成過氧化脂質(zhì);后者逐漸分解為一系列復雜的化合物,其中包括MDA。通過檢測MDA的水平即可檢測脂質(zhì)氧化的水平。 測定原理: MDA與硫代巴bi妥酸(thiobarbituric acid,TBA)縮合,生成紅色產(chǎn)物,在532nm有最大吸收峰,進行比色后可估測樣品中過氧化脂質(zhì)的含量;同時測定600nm下的吸光度,利用532nm與600nm下的吸光度的差值計算MDA的含量。 需自備的儀器和用品: 可見分光光度計/酶標儀、水浴鍋、臺式離心機、可調(diào)式移液器、微量玻璃比色皿/96孔板、研缽、冰和蒸餾水。 |
試劑的組成和配制:
酸性提取液:液體50mL×1瓶,4℃保存;堿性提取液:液體50mL×1瓶,4℃保存;試劑一:液體10 mL×1瓶,4℃保存;試劑二:液體3 mL×1瓶,4℃保存;試劑三:粉劑×1瓶,-20 ℃保存,用時加入3mL蒸餾水,混勻,用不完的試劑4℃保存一周;試劑四:粉劑×1瓶,4 ℃保存,用時加入3mL蒸餾水,混勻,用不完的試劑4℃保存一周;試劑五:液體3.6mL×1瓶,4 ℃保存;試劑六:液體30mL×1瓶,4 ℃保存;試劑七:液體50mL×1瓶,4 ℃保存。
自備儀器和用品:
可見分光光度計、臺式離心機、移液器、1 ml玻璃比色皿、研缽、冰和蒸餾水。
NAD+和NADH的提取:
1、血清(漿)中NAD+和NADH的提取 NAD+的提?。喊凑昭澹{)體積(ml):酸性提取液體積(ml)為1:5~10的比例(建 議取約0.1ml血清(漿),加入1ml酸性提取液),95℃水浴5min(蓋緊,以防止水分散失); 冰浴中冷卻后,10000g 4 ℃離心10min;取500μl上清液,加入500μl堿性提取液使之中 和,混勻,10000g 4 ℃離心10min,取上清,置冰上待測。 NADH的提?。喊凑昭澹{)體積(ml):堿性提取液體積(ml)為1:5~10的比例(建 議取約0.1ml血清(漿),加入1ml堿性提取液),95℃水浴5min(蓋緊,以防止水分散失); 冰浴中冷卻后,10000g 4 ℃離心10min;取500μl上清液,加入500μl酸性提取液使之中 和,混勻,10000g 4 ℃離心10min,取上清,置冰上待測。 | 2、組織中NAD+和NADH的提?。?/span> NAD+的提取:按照組織質(zhì)量(g):酸性提取液體積(ml)為1:5~10的比例(建議取約0.1g 組織,加入1ml酸性提取液),冰浴研磨,95℃水浴5min(蓋緊,以防止水分散失);冰浴 中冷卻后,10000g 4 ℃離心10min;取500μl上清液,加入500μl堿性提取液使之中和,混勻,10000g 4 ℃離心10min,取上清,置冰上待測。 NADH的提取:按照組織質(zhì)量(g):堿性提取液體積(ml)為1:5~10的比例(建議取約0.1g 組織,加入1ml堿性提取液),冰浴研磨,95℃水浴5min(蓋緊,以防止水分散失);冰浴 中冷卻后,10000g 4 ℃離心10min;取500μl上清液,加入500μl酸性提取液使之中和, 混勻,10000g 4 ℃離心10min,取上清,置冰上待測。 | 3、細胞或細菌中NAD+和NADH的提取: NAD+的提?。合仁占毎蚣毦诫x心管內(nèi),棄上清,按照細菌或細胞數(shù)量(104個):酸性 提取液體積(ml)為500~1000:1的比例(建議500萬細菌或細胞加入1ml酸性提取液), 超聲波破碎(冰浴,功率20%或200W,超聲3s,間隔10s,重復30次),95℃水浴5min (蓋緊,以防止水分散失);冰浴中冷卻后,10000g 4 ℃離心10min;取500μl上清液,加 入500μl堿性提取液使之中和,混勻,10000g 4 ℃離心10min,取上清,置冰上待測。 NADH的提?。合仁占毎蚣毦诫x心管內(nèi),棄上清,按照細菌或細胞數(shù)量(104個):堿 性提取液體積(ml)為500~1000:1的比例(建議500萬細菌或細胞加入1ml堿性提取液), 超聲波破碎(冰浴,功率20%或200W,超聲3s,間隔10s,重復30次),95℃水浴5min (蓋緊,以防止水分散失);冰浴中冷卻后,10000g 4 ℃離心10min;取500μl上清液,加 入500μl酸性提取液使之中和,混勻,10000g 4 ℃離心10min,取上清,置冰上待測。 |
ADH測定操作:
1. 分光光度計預熱30 min,調(diào)節(jié)波長到340 nm,蒸餾水調(diào)零。
2. 試劑二在25℃水浴中保溫30 min。
3. 空白管:在1mL石英比色皿中依次加入100μL蒸餾水、800μL試劑二和100μL試劑四,迅速混勻后于340nm測定吸光值變化,分別記錄15s和75s時吸光值,分別記為A1和A2。△A空白管=A1-A2。。
4. 測定管:在1mL石英比色皿中依次加入100μL上清液、800μL試劑二和100μL試劑四,迅速混勻后于340nm測定吸光值變化,分別記錄15s和75s時吸光值,分別記為A3和A4?!鰽測定管=A3-A4。
注意:空白管只需測定一次。
注意事項:
①加入試劑的順序應一致,以保證所有反應板孔溫育的時間一樣。
②使用干凈的塑料容器配置洗滌液。
③按照說明書中標明的時間、加液的量及順序進行溫育操作。
④底物A應揮發(fā),避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感,避免長時間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實驗完成后應立即讀取OD值。
⑤洗滌酶標板時應充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標反應孔中吸水。
⑥使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時,避免使用帶金屬部分的加樣器 。
⑦實驗中不用的板條應立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質(zhì)。
⑧試劑應按標簽說明書儲存,使用前恢復到室溫。稀稀過后的標準品應丟棄,不可保存。
⑨不用的其它試劑應包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。
溶血酰基轉(zhuǎn)移3(LPCAT3)英文名:LPCAT3 ELISA Kit貓眼綜合征染色體候選基因6抗體包裝25g
溶血?;D(zhuǎn)移2(LPCAT2)英文名:LPCAT2 ELISA Kit21號染色體開放閱讀框2抗體包裝25mg
溶血?;D(zhuǎn)移1(LPCAT1)英文名:LPCAT1 ELISA Kit9號染色體開放閱讀框86抗體包裝25G
溶血磷脂受體3(LPAR3)英文名:LPAR3 ELISA Kit21號染色體開放閱讀框128抗體包裝5G
溶體性磷2(ACP2)英文名:ACP2 ELISA Kit6號染色體開放閱讀框62抗體包裝100g
妊娠關(guān)聯(lián)血漿蛋白A(PAPPA)英文名:PAPPA ELISA KitCCZ1蛋白抗體包裝500g
熱休克轉(zhuǎn)錄因子4(HSF4)英文名:HSF4 ELISA Kit腦蛋白5抗體包裝1g
熱休克轉(zhuǎn)錄因子1(HSF1)英文名:HSF1 ELISA Kit21號染色體開放閱讀框58抗體包裝5g
熱休克蛋白β8(HSPβ8)英文名:HSPβ8 ELISA Kit20號染色體開放閱讀框43抗體包裝1g
熱休克蛋白β6(HSPβ6)英文名:HSPβ6 ELISA Kit9號染色體開放閱讀框43抗體包裝5g
熱休克蛋白β2(HSPβ2)英文名:HSPβ2 ELISA Kit幾丁質(zhì)3樣蛋白3抗體包裝100ml
熱休克蛋白40(HSP40)英文名:HSP40 ELISA Kit趨化樣因子超家族成員2抗體包裝500ml
染色質(zhì)裝配因子1亞基B(CHAF1B)英文名:CHAF1B ELISA Kit趨化樣因子超家族成員2亞型1抗體包裝1g
染色質(zhì)域解旋DNA結(jié)合蛋白4(CHD4)英文名:CHD4 ELISA Kit18號染色體開放閱讀框1抗體包裝5g
染色框同源物3(CBX3)英文名:CBX3 ELISA Kit色c氧化VIIA亞型2抗體包裝100g
黑曲霉Aspergillus│niger 質(zhì)量規(guī)格:> 95%,BR主要組織相容性復合體,II類,DQα2試劑盒知母皂苷E;Anemarsaponin
蜜蜂生球擬酵母Torulopsis│apicola 質(zhì)量規(guī)格:HPLC>95%,標準品周期依賴性激5試劑盒知母皂苷元;Sarsasapogenin
乳乳球菌Lactococcus│lactis 質(zhì)量規(guī)格:純度> 98%,BR,可用于培養(yǎng)周期依賴性激4試劑盒醉椒;Kavain
丙二醛(MDA)測試盒100管/96樣假交替單胞 2-異基乙酰乙酸乙酯血清腫瘤相關(guān)物質(zhì)Elisa
豬瘟病 2,3,5-三氟溴苯血清總補體Elisa
擬青霉 2-氨基異乙酯血栓海綿蛋白Elisa
蘇云金芽胞桿肯尼亞亞種 2-氨基乙酯血栓前體蛋白Elisa
四川散斑殼 N-(芐氧羰基)-1H-吡唑-1-甲脒血栓A2Elisa
柱狀田頭菇 乙酸異辛酯血栓B2Elisa
耐冷冷桿 乙酸異丁酯血栓調(diào)節(jié)蛋白Elisa
栗疫 2,4,6-基-3-環(huán)己烯-1-甲;異環(huán)檸檬血糖Elisa
梨葉殼小圓孢 代單丁基錫酸血纖蛋白原降解產(chǎn)物Elisa
熱帶假絲酵母 2,4-二-3,5-二血纖維蛋白溶原Elisa
節(jié)桿 N-BOC-1H-吡唑-1-甲脒血小板VASP;P2Y12Elisa
Pseudarthrobacter 3,4,5-氧基苯乙血小板第三因子Elisa
微桿 3-甲基硫代酸已酯血小板第四因子Elisa
釀酒酵母 普施安藍 MX-R血小板反應蛋白;凝血敏感蛋白1Elisa
深藍鐮孢 3--2-甲酸血小板反應蛋白4Elisa