商品介紹:
測定意義動(dòng)物肝臟、腎臟是氨基酸代謝的主要器官,故尿中氨基酸的變化最能反應(yīng)肝、腎的生理狀態(tài)。植物體內(nèi)氨基酸含量對(duì)研究植物在不同條件下及不同生長發(fā)育時(shí)期氮代謝變化、植物對(duì)氮素的吸收、運(yùn)輸、同化及營養(yǎng)狀況等有重要意義。另外,氨基酸還能反應(yīng)灼傷、傷寒等方面情況。測定原理氨基酸的α-氨基可與水合茚三酮反應(yīng),產(chǎn)生藍(lán)紫色化合物,其顏色的深淺與氨基酸的含量成正比。需自備儀器及用品95%乙醇,研缽、冰、臺(tái)式離心機(jī)、可見分光光度計(jì)、1ml玻璃比色皿、可調(diào)式移液槍、雙蒸水,水浴鍋,10ml帶蓋試管或EP管。 |
商品屬性:
試劑的組成和配制:
酸性提取液:液體50mL×1瓶,4℃保存;堿性提取液:液體50mL×1瓶,4℃保存;試劑一:液體10 mL×1瓶,4℃保存;試劑二:液體3 mL×1瓶,4℃保存;試劑三:粉劑×1瓶,-20 ℃保存,用時(shí)加入3mL蒸餾水,混勻,用不完的試劑4℃保存一周;試劑四:粉劑×1瓶,4 ℃保存,用時(shí)加入3mL蒸餾水,混勻,用不完的試劑4℃保存一周;試劑五:液體3.6mL×1瓶,4 ℃保存;試劑六:液體30mL×1瓶,4 ℃保存;試劑七:液體50mL×1瓶,4 ℃保存。
自備儀器和用品:
可見分光光度計(jì)、臺(tái)式離心機(jī)、移液器、1 ml玻璃比色皿、研缽、冰和蒸餾水。
NAD+和NADH的提取:
1、血清(漿)中NAD+和NADH的提取 NAD+的提?。喊凑昭澹{)體積(ml):酸性提取液體積(ml)為1:5~10的比例(建 議取約0.1ml血清(漿),加入1ml酸性提取液),95℃水浴5min(蓋緊,以防止水分散失); 冰浴中冷卻后,10000g 4 ℃離心10min;取500μl上清液,加入500μl堿性提取液使之中 和,混勻,10000g 4 ℃離心10min,取上清,置冰上待測。 NADH的提取:按照血清(漿)體積(ml):堿性提取液體積(ml)為1:5~10的比例(建 議取約0.1ml血清(漿),加入1ml堿性提取液),95℃水浴5min(蓋緊,以防止水分散失); 冰浴中冷卻后,10000g 4 ℃離心10min;取500μl上清液,加入500μl酸性提取液使之中 和,混勻,10000g 4 ℃離心10min,取上清,置冰上待測。 | 2、組織中NAD+和NADH的提?。?/span> NAD+的提取:按照組織質(zhì)量(g):酸性提取液體積(ml)為1:5~10的比例(建議取約0.1g 組織,加入1ml酸性提取液),冰浴研磨,95℃水浴5min(蓋緊,以防止水分散失);冰浴 中冷卻后,10000g 4 ℃離心10min;取500μl上清液,加入500μl堿性提取液使之中和,混勻,10000g 4 ℃離心10min,取上清,置冰上待測。 NADH的提取:按照組織質(zhì)量(g):堿性提取液體積(ml)為1:5~10的比例(建議取約0.1g 組織,加入1ml堿性提取液),冰浴研磨,95℃水浴5min(蓋緊,以防止水分散失);冰浴 中冷卻后,10000g 4 ℃離心10min;取500μl上清液,加入500μl酸性提取液使之中和, 混勻,10000g 4 ℃離心10min,取上清,置冰上待測。 | 3、細(xì)胞或細(xì)菌中NAD+和NADH的提?。?/span> NAD+的提?。合仁占?xì)胞或細(xì)菌到離心管內(nèi),棄上清,按照細(xì)菌或細(xì)胞數(shù)量(104個(gè)):酸性 提取液體積(ml)為500~1000:1的比例(建議500萬細(xì)菌或細(xì)胞加入1ml酸性提取液), 超聲波破碎(冰浴,功率20%或200W,超聲3s,間隔10s,重復(fù)30次),95℃水浴5min (蓋緊,以防止水分散失);冰浴中冷卻后,10000g 4 ℃離心10min;取500μl上清液,加 入500μl堿性提取液使之中和,混勻,10000g 4 ℃離心10min,取上清,置冰上待測。 NADH的提?。合仁占?xì)胞或細(xì)菌到離心管內(nèi),棄上清,按照細(xì)菌或細(xì)胞數(shù)量(104個(gè)):堿 性提取液體積(ml)為500~1000:1的比例(建議500萬細(xì)菌或細(xì)胞加入1ml堿性提取液), 超聲波破碎(冰浴,功率20%或200W,超聲3s,間隔10s,重復(fù)30次),95℃水浴5min (蓋緊,以防止水分散失);冰浴中冷卻后,10000g 4 ℃離心10min;取500μl上清液,加 入500μl酸性提取液使之中和,混勻,10000g 4 ℃離心10min,取上清,置冰上待測。 |
ADH測定操作:
1. 分光光度計(jì)預(yù)熱30 min,調(diào)節(jié)波長到340 nm,蒸餾水調(diào)零。
2. 試劑二在25℃水浴中保溫30 min。
3. 空白管:在1mL石英比色皿中依次加入100μL蒸餾水、800μL試劑二和100μL試劑四,迅速混勻后于340nm測定吸光值變化,分別記錄15s和75s時(shí)吸光值,分別記為A1和A2?!鰽空白管=A1-A2。。
4. 測定管:在1mL石英比色皿中依次加入100μL上清液、800μL試劑二和100μL試劑四,迅速混勻后于340nm測定吸光值變化,分別記錄15s和75s時(shí)吸光值,分別記為A3和A4。△A測定管=A3-A4。
注意:空白管只需測定一次。
他環(huán),烯土霉(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名: Amlodipine角蛋白13抗體包裝25g
托宗(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名: Amlodipine白免疫球蛋白樣受體-B抗體包裝500g
雄諾龍(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名: NizatidineCD33L抗體包裝100g
門冬胰島(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名: Carboxymethyl cellulose 角蛋白10抗體包裝25g
蒙脫石(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名: Fludarabine軸突生長因子CD108抗體包裝5g
孟魯司特鈉(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名: Fludarabine唾液結(jié)合性免疫球蛋白樣凝集5抗體包裝1g
咪喹莫特(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名: G-418 disulfate,GeneticinCD329抗體包裝1g
咪唑(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名: Erlotinib嗜粒趨化蛋白14抗體包裝1g
咪唑煙(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名: N-Acetyl-cysteine1號(hào)染色體開放閱讀框57抗體包裝250mg
米(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名: Zopiclone2號(hào)染色體開放閱讀框18抗體包裝100ml
米奈鈣(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名: Zopiclone色c氧化6抗體包裝100g
米力農(nóng)(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名: Aniracetam嗜粒趨化蛋白24抗體包裝25g
米諾地爾(硫鹽)敏樂啶(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名: Aniracetam巨噬炎性蛋白15包裝100ml
米屈肼(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名: L-Glutamine巨噬炎性蛋白抗體包裝500ml
米替福新(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名: RoflumilastCD72蛋白抗體包裝1g
擬青霉屬Paecilomyces│sp. 質(zhì)量規(guī)格:>720IU/MG,BR膜DNA抗體試劑盒1-脫氧野尻霉;1-Deoxynoji
醋化醋桿菌Acetobacter│aceti 質(zhì)量規(guī)格:效價(jià)測定角蛋白21-1片段試劑盒他克莫司;Tacrolimus
肺炎克雷伯氏菌Klebsiella│pneumoniae 質(zhì)量規(guī)格:EP/USP角蛋白18-M65試劑盒10-脫乙?;投II;10-Dea
氨基酸(AA)含量測試盒50管/48樣飼料 鉛 硬脂酸鈷風(fēng)疹病IgM抗體Elisa
南方散斑殼 啉鹽酸鹽抗組織轉(zhuǎn)谷氨酰IgG抗體Elisa
枯草芽孢桿 1,3,4,6-四-O-乙酰基-2-脫氧-2-苯二甲酰亞氨基-β-D-吡喃葡萄糖抗組織轉(zhuǎn)谷氨酰IgM抗體Elisa
異常漢遜酵母異常變種 氮雜環(huán)丁烷-3-甲酸甲酯鹽酸鹽糖原磷酸化aElisa
冠突散囊 1,4-二異基苯硫氧還蛋白氧化還原Elisa
大腸埃希氏 三氟乙酰賴骨硬化蛋白Elisa
赤曲霉 乙烯基雙茚基二化鋯, 外消旋混合物肌特異性增強(qiáng)因子2D抗體Elisa
橢圓孫秀芹氏 3-氨基-5-苯基噻吩-2-甲酸甲酯活化轉(zhuǎn)錄因子3Elisa
雙胞雙鐮孢 氧化白藜蘆半胱蛋白1Elisa
桃色枝頂孢 扁豆堿格氏病Elisa
松針散斑殼 L-谷 1-甲酯麥角蛋白IgG抗體Elisa
同絲毛殼 白皮杉水痘-帶狀皰疹病IgA抗體Elisa
釀酒酵母 白藜蘆抗組織轉(zhuǎn)谷氨酰IgA抗體Elisa
貴州青霉 曲勃龍(R-1881)糖原磷酸化Elisa
考克氏屬 尼泊金異酯α半乳糖苷Elisa
注意事項(xiàng):
①加入試劑的順序應(yīng)一致,以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時(shí)間一樣。
②使用干凈的塑料容器配置洗滌液。
③按照說明書中標(biāo)明的時(shí)間、加液的量及順序進(jìn)行溫育操作。
④底物A應(yīng)揮發(fā),避免長時(shí)間打開蓋子。底物B對(duì)光敏感,避免長時(shí)間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實(shí)驗(yàn)完成后應(yīng)立即讀取OD值。
⑤洗滌酶標(biāo)板時(shí)應(yīng)充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標(biāo)反應(yīng)孔中吸水。
⑥使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時(shí),避免使用帶金屬部分的加樣器 。
⑦實(shí)驗(yàn)中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質(zhì)。
⑧試劑應(yīng)按標(biāo)簽說明書儲(chǔ)存,使用前恢復(fù)到室溫。稀稀過后的標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)丟棄,不可保存。
⑨不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號(hào)的試劑不要混用。