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詳細介紹
商品屬性：
產(chǎn)品名稱 | |
檢測方法 | 可見分光光度法 |
產(chǎn)品規(guī)格 | 50管/24樣 |
產(chǎn)品貨號 | AS632189 |
商品介紹：
測定意義 硝酸還原酶（NiR）是一類能催化亞硝酸鹽還原的酶，廣泛存在于微生物及植物體內(nèi)，是自然界氮循環(huán)過程中的關(guān)鍵酶，可以將亞硝酸鹽降解為NO或NH3，從而減少環(huán)境中亞硝態(tài)氮的積累，降低因亞硝酸鹽累積而造成的對生物體的毒害作用。 測定原理 亞硝酸還原酶可將NO2—還原為NO，使樣品中參與重氮化反應(yīng)生成紫紅色化合物的NO2—減少，即540nm處吸光值的變化可反應(yīng)亞硝酸還原酶的活性。 需自備的儀器和用品 天平、研缽、可見分光光度計、水浴鍋、低溫離心機、1mL玻璃比色皿。 |
試劑的組成和配制：
酸性提取液：液體50mL×1瓶，4℃保存；堿性提取液：液體50mL×1瓶，4℃保存；試劑一：液體10 mL×1瓶，4℃保存；試劑二：液體3 mL×1瓶，4℃保存；試劑三：粉劑×1瓶，-20 ℃保存，用時加入3mL蒸餾水，混勻，用不完的試劑4℃保存一周；試劑四：粉劑×1瓶，4 ℃保存，用時加入3mL蒸餾水，混勻，用不完的試劑4℃保存一周；試劑五：液體3.6mL×1瓶，4 ℃保存；試劑六：液體30mL×1瓶，4 ℃保存；試劑七：液體50mL×1瓶，4 ℃保存。
自備儀器和用品：
可見分光光度計、臺式離心機、移液器、1 ml玻璃比色皿、研缽、冰和蒸餾水。
NAD+和NADH的提?。?/span>
1、血清（漿）中NAD+和NADH的提取 NAD+的提?。喊凑昭澹{）體積（ml）：酸性提取液體積（ml）為1：5~10的比例（建 議取約0.1ml血清（漿），加入1ml酸性提取液），95℃水浴5min（蓋緊，以防止水分散失）； 冰浴中冷卻后，10000g 4 ℃離心10min；取500μl上清液，加入500μl堿性提取液使之中 和，混勻，10000g 4 ℃離心10min，取上清，置冰上待測。 NADH的提?。喊凑昭澹{）體積（ml）：堿性提取液體積（ml）為1：5~10的比例（建 議取約0.1ml血清（漿），加入1ml堿性提取液），95℃水浴5min（蓋緊，以防止水分散失）； 冰浴中冷卻后，10000g 4 ℃離心10min；取500μl上清液，加入500μl酸性提取液使之中 和，混勻，10000g 4 ℃離心10min，取上清，置冰上待測。 | 2、組織中NAD+和NADH的提?。?/span> NAD+的提?。喊凑战M織質(zhì)量（g）：酸性提取液體積（ml）為1：5~10的比例（建議取約0.1g 組織，加入1ml酸性提取液），冰浴研磨，95℃水浴5min（蓋緊，以防止水分散失）；冰浴 中冷卻后，10000g 4 ℃離心10min；取500μl上清液，加入500μl堿性提取液使之中和，混勻，10000g 4 ℃離心10min，取上清，置冰上待測。 NADH的提?。喊凑战M織質(zhì)量（g）：堿性提取液體積（ml）為1：5~10的比例（建議取約0.1g 組織，加入1ml堿性提取液），冰浴研磨，95℃水浴5min（蓋緊，以防止水分散失）；冰浴 中冷卻后，10000g 4 ℃離心10min；取500μl上清液，加入500μl酸性提取液使之中和， 混勻，10000g 4 ℃離心10min，取上清，置冰上待測。 | 3、細胞或細菌中NAD+和NADH的提?。?/span> NAD+的提取：先收集細胞或細菌到離心管內(nèi)，棄上清，按照細菌或細胞數(shù)量（104個）：酸性 提取液體積（ml）為500~1000：1的比例（建議500萬細菌或細胞加入1ml酸性提取液）， 超聲波破碎（冰浴，功率20％或200W，超聲3s，間隔10s，重復(fù)30次），95℃水浴5min （蓋緊，以防止水分散失）；冰浴中冷卻后，10000g 4 ℃離心10min；取500μl上清液，加 入500μl堿性提取液使之中和，混勻，10000g 4 ℃離心10min，取上清，置冰上待測。 NADH的提?。合仁占毎蚣毦诫x心管內(nèi)，棄上清，按照細菌或細胞數(shù)量（104個）：堿 性提取液體積（ml）為500~1000：1的比例（建議500萬細菌或細胞加入1ml堿性提取液）， 超聲波破碎（冰浴，功率20％或200W，超聲3s，間隔10s，重復(fù)30次），95℃水浴5min （蓋緊，以防止水分散失）；冰浴中冷卻后，10000g 4 ℃離心10min；取500μl上清液，加 入500μl酸性提取液使之中和，混勻，10000g 4 ℃離心10min，取上清，置冰上待測。 |
ADH測定操作：
1. 分光光度計預(yù)熱30 min，調(diào)節(jié)波長到340 nm，蒸餾水調(diào)零。
2. 試劑二在25℃水浴中保溫30 min。
3. 空白管：在1mL石英比色皿中依次加入100μL蒸餾水、800μL試劑二和100μL試劑四，迅速混勻后于340nm測定吸光值變化，分別記錄15s和75s時吸光值，分別記為A1和A2?！鰽空白管=A1-A2。。
4. 測定管：在1mL石英比色皿中依次加入100μL上清液、800μL試劑二和100μL試劑四，迅速混勻后于340nm測定吸光值變化，分別記錄15s和75s時吸光值，分別記為A3和A4?！鰽測定管=A3-A4。
注意：空白管只需測定一次。
注意事項：
①加入試劑的順序應(yīng)一致，以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時間一樣。
②使用干凈的塑料容器配置洗滌液。
③按照說明書中標明的時間、加液的量及順序進行溫育操作。
④底物A應(yīng)揮發(fā)，避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感，避免長時間暴露于光下。避免用手接觸，有毒。實驗完成后應(yīng)立即讀取OD值。
⑤洗滌酶標板時應(yīng)充分拍干，不要將吸水紙直接放入酶標反應(yīng)孔中吸水。
⑥使用一次性的吸頭以免交叉污染，吸取終止液和底物A、B液時，避免使用帶金屬部分的加樣器 。
⑦實驗中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中，密封保存，以免變質(zhì)。
⑧試劑應(yīng)按標簽說明書儲存，使用前恢復(fù)到室溫。稀稀過后的標準品應(yīng)丟棄，不可保存。
⑨不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。
17b-hydroxyandrost-4-ene-3-...英文名： OxaliplatinCD163蛋白樣1抗體包裝1mg
17α-Methyltestosterone（標準品）英文名： Oxiconazole Nitrate周期依賴性激5調(diào)節(jié)蛋白1樣蛋白1抗體包裝1g
1，3-（標準品）英文名： Oxytetracycline HCl22號染色體開放閱讀框31抗體包裝250mg
1，6-二氫-2-基-6-氧代-（3，4’-二吡啶）...英文名： Oxytetracycline HCl分裂周期37樣蛋白1抗體包裝1g
2,3,4-三氧基（標準品）英文名： Oxytocin Acetate羧肽X(M14家族1)抗體包裝250mg
2,3,4-三氧基（標準品）英文名： Paclitaxel卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白135抗體包裝100g
2,3,4-三氧基（標準品）英文名： Paclitaxel跨膜結(jié)構(gòu)域邊緣蛋白CEE抗體包裝25g
2,3-丁二(標準品,≥99.0%(GC))英文名： Palonosetron HCl分子伴侶CESK1蛋白抗體包裝500g
2,3-二氫-6-基咪唑【2,1-b】噻唑鹽鹽（鹽...英文名： Paromomycin Sulfate卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白124抗體包裝5g
2,6-二（標準品）英文名： Paromomycin SulfateCDK5激活結(jié)合蛋白1抗體包裝100g
2,6-二基（標準品）英文名： Pazufloxacin Mesilate磷化表面趨化因子受體4相關(guān)蛋白2抗體包裝25g
2-（4-異丁酰基）（標準品）英文名： Pazufloxacin Mesilate腫瘤/抗原1B/1A包裝25g
2-基-4-（標準品）英文名： Pefloxacin mesylate dihydrate磷化分裂周期蛋白25B抗體包裝5g
2-乙酰（標準品）英文名： Pefloxacin mesylate dihydrate跨膜蛋白12抗體包裝1g
2-單硝異山梨酯（標準品）英文名： Pemetrexed Disodium免疫球蛋白超家族成員16抗體包裝250mg
紅曲霉（斜面）Monascus anka 質(zhì)量規(guī)格：>95%血小板相關(guān)免疫球蛋白試劑盒亞麻木;Secoisolaricir
白鮑魚菇Pleurotus│sp. 質(zhì)量規(guī)格：≥595 µg/mg,BR血小板相關(guān)抗體IgM試劑盒氧化苦參堿;Ammothamnine
亮葉耳環(huán)根瘤菌Rhizobium│sp. 質(zhì)量規(guī)格：含量測定血小板生成自身抗體試劑盒野黃芩苷;Scularin
亞硝酸還原酶(NiR)測試盒50管/24樣扭曲毛殼 2-氨基-3-甲酸甲酯同型半胱酸Elisa
*蛹蟲草 (R)-(+)-1-(4-甲氧基苯)乙3-羧基-4-甲基-5-基-2酸Elisa
米曲霉 N,N-二(4-基)苯ESRI 抗體Elisa
釀酒酵母 3,5-二叔丁基苯致癌物質(zhì)Elisa
釀酒酵母 還原桃紅R致癌物質(zhì)Elisa
泡盛曲霉 2--5-甲基噻吩蛋白磷酸脂Elisa
赭黃裸傘 3-氧代環(huán)丁烷基羧酸天門冬酰Elisa
沙漠奇異球 三乙?；?β-環(huán)糊精血管緊張轉(zhuǎn)化抑制劑Elisa
大腸埃希 3,4-(亞甲二氧)肉桂酸階段特異性胚胎表面抗原4Elisa
乳桿屬 1,2-二溴-4-氟苯表皮生長因子受體-T790MElisa
枯草芽孢桿 6-吡-2-羧酸血管內(nèi)皮生長因子165Elisa
旋柄腐霉 2-氟苯肼V LeidenElisa
枯草芽孢桿 8-氨基異喹啉凝血原20210AElisa
巴氏醋桿 6-氨基異喹啉弓蛔蟲Elisa
熱帶頭梗霉 屈西多巴神經(jīng)調(diào)節(jié)－1Elisa
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