商品介紹:
測(cè)定意義: 直鏈淀粉是D-葡萄糖基以a-(1,4)糖苷鍵連接的多糖鏈,其含量測(cè)定對(duì)于評(píng)價(jià)食品營(yíng)養(yǎng)價(jià)值和調(diào)查植物體內(nèi)糖代謝都有重要意義。 測(cè)定原理: 利用80%乙醇可以把樣品中可溶性糖與淀粉分開(kāi),直鏈淀粉與碘形成的絡(luò)合物在620nm下有吸收峰。 需自備的儀器和用品: 可見(jiàn)分光光度計(jì)、水浴鍋、可調(diào)式移液器、1mL玻璃比色皿、研缽、冰和蒸餾水。 |
商品屬性:
試劑的組成和配制:
酸性提取液:液體50mL×1瓶,4℃保存;堿性提取液:液體50mL×1瓶,4℃保存;試劑一:液體10 mL×1瓶,4℃保存;試劑二:液體3 mL×1瓶,4℃保存;試劑三:粉劑×1瓶,-20 ℃保存,用時(shí)加入3mL蒸餾水,混勻,用不完的試劑4℃保存一周;試劑四:粉劑×1瓶,4 ℃保存,用時(shí)加入3mL蒸餾水,混勻,用不完的試劑4℃保存一周;試劑五:液體3.6mL×1瓶,4 ℃保存;試劑六:液體30mL×1瓶,4 ℃保存;試劑七:液體50mL×1瓶,4 ℃保存。
自備儀器和用品:
可見(jiàn)分光光度計(jì)、臺(tái)式離心機(jī)、移液器、1 ml玻璃比色皿、研缽、冰和蒸餾水。
NAD+和NADH的提取:
1、血清(漿)中NAD+和NADH的提取 NAD+的提?。喊凑昭澹{)體積(ml):酸性提取液體積(ml)為1:5~10的比例(建 議取約0.1ml血清(漿),加入1ml酸性提取液),95℃水浴5min(蓋緊,以防止水分散失); 冰浴中冷卻后,10000g 4 ℃離心10min;取500μl上清液,加入500μl堿性提取液使之中 和,混勻,10000g 4 ℃離心10min,取上清,置冰上待測(cè)。 NADH的提?。喊凑昭澹{)體積(ml):堿性提取液體積(ml)為1:5~10的比例(建 議取約0.1ml血清(漿),加入1ml堿性提取液),95℃水浴5min(蓋緊,以防止水分散失); 冰浴中冷卻后,10000g 4 ℃離心10min;取500μl上清液,加入500μl酸性提取液使之中 和,混勻,10000g 4 ℃離心10min,取上清,置冰上待測(cè)。 | 2、組織中NAD+和NADH的提?。?/span> NAD+的提取:按照組織質(zhì)量(g):酸性提取液體積(ml)為1:5~10的比例(建議取約0.1g 組織,加入1ml酸性提取液),冰浴研磨,95℃水浴5min(蓋緊,以防止水分散失);冰浴 中冷卻后,10000g 4 ℃離心10min;取500μl上清液,加入500μl堿性提取液使之中和,混勻,10000g 4 ℃離心10min,取上清,置冰上待測(cè)。 NADH的提?。喊凑战M織質(zhì)量(g):堿性提取液體積(ml)為1:5~10的比例(建議取約0.1g 組織,加入1ml堿性提取液),冰浴研磨,95℃水浴5min(蓋緊,以防止水分散失);冰浴 中冷卻后,10000g 4 ℃離心10min;取500μl上清液,加入500μl酸性提取液使之中和, 混勻,10000g 4 ℃離心10min,取上清,置冰上待測(cè)。 | 3、細(xì)胞或細(xì)菌中NAD+和NADH的提?。?/span> NAD+的提?。合仁占?xì)胞或細(xì)菌到離心管內(nèi),棄上清,按照細(xì)菌或細(xì)胞數(shù)量(104個(gè)):酸性 提取液體積(ml)為500~1000:1的比例(建議500萬(wàn)細(xì)菌或細(xì)胞加入1ml酸性提取液), 超聲波破碎(冰浴,功率20%或200W,超聲3s,間隔10s,重復(fù)30次),95℃水浴5min (蓋緊,以防止水分散失);冰浴中冷卻后,10000g 4 ℃離心10min;取500μl上清液,加 入500μl堿性提取液使之中和,混勻,10000g 4 ℃離心10min,取上清,置冰上待測(cè)。 NADH的提取:先收集細(xì)胞或細(xì)菌到離心管內(nèi),棄上清,按照細(xì)菌或細(xì)胞數(shù)量(104個(gè)):堿 性提取液體積(ml)為500~1000:1的比例(建議500萬(wàn)細(xì)菌或細(xì)胞加入1ml堿性提取液), 超聲波破碎(冰浴,功率20%或200W,超聲3s,間隔10s,重復(fù)30次),95℃水浴5min (蓋緊,以防止水分散失);冰浴中冷卻后,10000g 4 ℃離心10min;取500μl上清液,加 入500μl酸性提取液使之中和,混勻,10000g 4 ℃離心10min,取上清,置冰上待測(cè)。 |
ADH測(cè)定操作:
1. 分光光度計(jì)預(yù)熱30 min,調(diào)節(jié)波長(zhǎng)到340 nm,蒸餾水調(diào)零。
2. 試劑二在25℃水浴中保溫30 min。
3. 空白管:在1mL石英比色皿中依次加入100μL蒸餾水、800μL試劑二和100μL試劑四,迅速混勻后于340nm測(cè)定吸光值變化,分別記錄15s和75s時(shí)吸光值,分別記為A1和A2。△A空白管=A1-A2。。
4. 測(cè)定管:在1mL石英比色皿中依次加入100μL上清液、800μL試劑二和100μL試劑四,迅速混勻后于340nm測(cè)定吸光值變化,分別記錄15s和75s時(shí)吸光值,分別記為A3和A4。△A測(cè)定管=A3-A4。
注意:空白管只需測(cè)定一次。
益母草(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名: Ac-Trp-Oet磷化熱休克蛋白70抗體包裝1g
益智(益智仁)(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名: N-Acetyl-DL-tryptophanE3泛蛋白連接HACE1抗體包裝5g
益智(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名: Nalpha-Formyl-DL-tryptophan結(jié)節(jié)性硬化癥蛋白1抗體包裝250mg
薏苡仁(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名: L-Tyrosine tert-butyl ester 肝核因子4α抗體包裝1g
薏苡仁油(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名: O-Benzyl-L-tyrosine磷化肝核因子4α抗體包裝100g
茵陳(濱蒿)(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名: O-Benzyl-L-tyrosine benzyl ester hydrochloride淋巴特異性解旋抗體包裝25g
茵陳(茵陳蒿)(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名: O-Benzyl-L-tyrosine methyl ester hydrochlorideHRAS樣抑制因子2抗體包裝5g
茵芋苷英文名: L-Valine t-butyl ester hydrochloride熱休克蛋白家族40抗體包裝1g
羊藿(羊藿)(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名: 4-Nitro-L-phenylalanine monohydrate糖蛋白P43抗體包裝5MG
羊藿次苷F2英文名: N-Acetyl-DL-Alanine滋養(yǎng)層抗原3β7抗體包裝5g
羊藿次苷I(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名: Ac-DL-Glu-OH熱休克蛋白-22抗體包裝25ml
羊藿苷(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名: DL-a-Aminoadipic acid組織H4受體抗體包裝5ml
羊藿(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名: DL-Cysteine·HCl·H2O羥基類固脫氫11β2抗體包裝100g
羊藿新苷A;羊藿屬苷A英文名: DL-Cysteine hydrochloride組織H3受體抗體包裝25g
銀椴苷;椴樹(shù)苷(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名: DL-Cystine磷化組蛋白H1抗體包裝1g
米曲霉Aspergillus│oryzae 質(zhì)量規(guī)格:效價(jià)測(cè)定硫角質(zhì)試劑盒基麥冬黃烷B;Methylophio
24164=BCRC80272資源名稱: 中國(guó)臺(tái)灣鞘單胞菌 質(zhì)量規(guī)格:>98%,MAO-B selective inhibitor硫雌試劑盒基麥冬黃烷A;Methylophio
枯草芽孢桿菌Bacillus│subtilis 質(zhì)量規(guī)格:>98%硫S-基轉(zhuǎn)換試劑盒7-氧基;7-Methoxyco
直鏈淀粉含量測(cè)試盒50管/48樣肉色迷孔(可訂) 4--2,5-二氟苯甲精(束縛態(tài))Elisa
大腸埃希 2,3,4,5,6-五溴甲苯亞精(束縛態(tài))Elisa
長(zhǎng)鏈霉 3,5-二氟-4-腐(束縛態(tài))Elisa
木醋桿 2,3-二氟-4-苯精(結(jié)合態(tài))Elisa
巴斯德畢赤酵母 2-溴-4,5-二氟甲酯亞精(結(jié)合態(tài))Elisa
釀酒酵母 2-溴-4,5-二氟甲酯腐(結(jié)合態(tài))Elisa
紫色孢囊桿 甲磺酸鹽一水合物軟脂酸Elisa
無(wú) 1-丁基-3-甲基咪唑乳酸鹽油酸Elisa
釀酒酵母 3-氟-4-甲酸甲酯超氧陰離子自由基Elisa
膠凍樣芽胞桿 三聚酸酯氧化Elisa
枯草芽孢桿 (2S,6S)-2,6-二叔丁基-2,3,5,6-四氫-1H-咪唑并[1,2-a]咪唑硫酸鹽Elisa
平田頭菇6-2 4-甲磺?;诫蔓}酸鹽半胱蛋白Elisa
藤黃毛殼 2,6-二甲基喹啉抗Elisa
焦曲霉 6-溴-2-甲基喹啉白介1αElisa
釀酒酵母 4-(4-溴吡唑-1-基)-1-甲酸叔丁酯疏基轉(zhuǎn)移Elisa
注意事項(xiàng):
①加入試劑的順序應(yīng)一致,以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時(shí)間一樣。
②使用干凈的塑料容器配置洗滌液。
③按照說(shuō)明書(shū)中標(biāo)明的時(shí)間、加液的量及順序進(jìn)行溫育操作。
④底物A應(yīng)揮發(fā),避免長(zhǎng)時(shí)間打開(kāi)蓋子。底物B對(duì)光敏感,避免長(zhǎng)時(shí)間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實(shí)驗(yàn)完成后應(yīng)立即讀取OD值。
⑤洗滌酶標(biāo)板時(shí)應(yīng)充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標(biāo)反應(yīng)孔中吸水。
⑥使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時(shí),避免使用帶金屬部分的加樣器 。
⑦實(shí)驗(yàn)中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質(zhì)。
⑧試劑應(yīng)按標(biāo)簽說(shuō)明書(shū)儲(chǔ)存,使用前恢復(fù)到室溫。稀稀過(guò)后的標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)丟棄,不可保存。
⑨不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號(hào)的試劑不要混用。