試劑的組成和配制:
酸性提取液:液體50mL×1瓶,4℃保存;堿性提取液:液體50mL×1瓶,4℃保存;試劑一:液體10 mL×1瓶,4℃保存;試劑二:液體3 mL×1瓶,4℃保存;試劑三:粉劑×1瓶,-20 ℃保存,用時(shí)加入3mL蒸餾水,混勻,用不完的試劑4℃保存一周;試劑四:粉劑×1瓶,4 ℃保存,用時(shí)加入3mL蒸餾水,混勻,用不完的試劑4℃保存一周;試劑五:液體3.6mL×1瓶,4 ℃保存;試劑六:液體30mL×1瓶,4 ℃保存;試劑七:液體50mL×1瓶,4 ℃保存。
自備儀器和用品:
可見(jiàn)分光光度計(jì)、臺(tái)式離心機(jī)、移液器、1 ml玻璃比色皿、研缽、冰和蒸餾水。
商品介紹:
測(cè)定意義: GOD(EC 1.1.3.4)廣泛存在于動(dòng)物、和植物中,催化葡萄糖氧化生成葡萄糖酸,并產(chǎn)生H2O2,是生物體中產(chǎn)生活性氧的代謝途徑之一。 測(cè)定原理: GOD催化產(chǎn)生H2O2,過(guò)氧化物酶在有氧存在時(shí)催化H2O2分解產(chǎn)生的氧又將鄰聯(lián)茴香胺氧化生成有色物質(zhì),顏色深淺與葡萄糖氧化酶活性成線性關(guān)系。 需自備的儀器和用品: 可見(jiàn)分光光度計(jì)、水浴鍋、臺(tái)式離心機(jī)、可調(diào)式移液器、1 mL玻璃比色皿、研缽、冰、蒸餾水。 |
商品屬性:
NAD+和NADH的提?。?/span>
1、血清(漿)中NAD+和NADH的提取 NAD+的提?。喊凑昭澹{)體積(ml):酸性提取液體積(ml)為1:5~10的比例(建 議取約0.1ml血清(漿),加入1ml酸性提取液),95℃水浴5min(蓋緊,以防止水分散失); 冰浴中冷卻后,10000g 4 ℃離心10min;取500μl上清液,加入500μl堿性提取液使之中 和,混勻,10000g 4 ℃離心10min,取上清,置冰上待測(cè)。 NADH的提?。喊凑昭澹{)體積(ml):堿性提取液體積(ml)為1:5~10的比例(建 議取約0.1ml血清(漿),加入1ml堿性提取液),95℃水浴5min(蓋緊,以防止水分散失); 冰浴中冷卻后,10000g 4 ℃離心10min;取500μl上清液,加入500μl酸性提取液使之中 和,混勻,10000g 4 ℃離心10min,取上清,置冰上待測(cè)。 | 2、組織中NAD+和NADH的提取: NAD+的提?。喊凑战M織質(zhì)量(g):酸性提取液體積(ml)為1:5~10的比例(建議取約0.1g 組織,加入1ml酸性提取液),冰浴研磨,95℃水浴5min(蓋緊,以防止水分散失);冰浴 中冷卻后,10000g 4 ℃離心10min;取500μl上清液,加入500μl堿性提取液使之中和,混勻,10000g 4 ℃離心10min,取上清,置冰上待測(cè)。 NADH的提?。喊凑战M織質(zhì)量(g):堿性提取液體積(ml)為1:5~10的比例(建議取約0.1g 組織,加入1ml堿性提取液),冰浴研磨,95℃水浴5min(蓋緊,以防止水分散失);冰浴 中冷卻后,10000g 4 ℃離心10min;取500μl上清液,加入500μl酸性提取液使之中和, 混勻,10000g 4 ℃離心10min,取上清,置冰上待測(cè)。 | 3、細(xì)胞或細(xì)菌中NAD+和NADH的提?。?/span> NAD+的提取:先收集細(xì)胞或細(xì)菌到離心管內(nèi),棄上清,按照細(xì)菌或細(xì)胞數(shù)量(104個(gè)):酸性 提取液體積(ml)為500~1000:1的比例(建議500萬(wàn)細(xì)菌或細(xì)胞加入1ml酸性提取液), 超聲波破碎(冰浴,功率20%或200W,超聲3s,間隔10s,重復(fù)30次),95℃水浴5min (蓋緊,以防止水分散失);冰浴中冷卻后,10000g 4 ℃離心10min;取500μl上清液,加 入500μl堿性提取液使之中和,混勻,10000g 4 ℃離心10min,取上清,置冰上待測(cè)。 NADH的提?。合仁占?xì)胞或細(xì)菌到離心管內(nèi),棄上清,按照細(xì)菌或細(xì)胞數(shù)量(104個(gè)):堿 性提取液體積(ml)為500~1000:1的比例(建議500萬(wàn)細(xì)菌或細(xì)胞加入1ml堿性提取液), 超聲波破碎(冰浴,功率20%或200W,超聲3s,間隔10s,重復(fù)30次),95℃水浴5min (蓋緊,以防止水分散失);冰浴中冷卻后,10000g 4 ℃離心10min;取500μl上清液,加 入500μl酸性提取液使之中和,混勻,10000g 4 ℃離心10min,取上清,置冰上待測(cè)。 |
ADH測(cè)定操作:
1. 分光光度計(jì)預(yù)熱30 min,調(diào)節(jié)波長(zhǎng)到340 nm,蒸餾水調(diào)零。
2. 試劑二在25℃水浴中保溫30 min。
3. 空白管:在1mL石英比色皿中依次加入100μL蒸餾水、800μL試劑二和100μL試劑四,迅速混勻后于340nm測(cè)定吸光值變化,分別記錄15s和75s時(shí)吸光值,分別記為A1和A2?!鰽空白管=A1-A2。。
4. 測(cè)定管:在1mL石英比色皿中依次加入100μL上清液、800μL試劑二和100μL試劑四,迅速混勻后于340nm測(cè)定吸光值變化,分別記錄15s和75s時(shí)吸光值,分別記為A3和A4?!鰽測(cè)定管=A3-A4。
注意:空白管只需測(cè)定一次。
注意事項(xiàng):
①加入試劑的順序應(yīng)一致,以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時(shí)間一樣。
②使用干凈的塑料容器配置洗滌液。
③按照說(shuō)明書(shū)中標(biāo)明的時(shí)間、加液的量及順序進(jìn)行溫育操作。
④底物A應(yīng)揮發(fā),避免長(zhǎng)時(shí)間打開(kāi)蓋子。底物B對(duì)光敏感,避免長(zhǎng)時(shí)間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實(shí)驗(yàn)完成后應(yīng)立即讀取OD值。
⑤洗滌酶標(biāo)板時(shí)應(yīng)充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標(biāo)反應(yīng)孔中吸水。
⑥使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時(shí),避免使用帶金屬部分的加樣器 。
⑦實(shí)驗(yàn)中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質(zhì)。
⑧試劑應(yīng)按標(biāo)簽說(shuō)明書(shū)儲(chǔ)存,使用前恢復(fù)到室溫。稀稀過(guò)后的標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)丟棄,不可保存。
⑨不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號(hào)的試劑不要混用。
尿激型纖溶原激活因子受體(uPAR)英文名:uPAR ELISA Kit脫羧蛋白體36抗體包裝500mg
尿激型纖溶原激活因子(uPA)英文名:uPA ELISA Kit間隙連接蛋白40抗體包裝25g
鳥(niǎo)苷環(huán)化激活因子2A(GUCA2A)英文名:GUCA2A ELISA Kit間隙連接蛋白43抗體包裝5g
鳥(niǎo)脫羧(ODC)英文名:ODC ELISA Kit間隙連接蛋白45抗體包裝100g
黏膜地址細(xì)胞黏附分子(MAdCAM1)英文名:MAdCAM1 ELISA Kit表面趨化因子受體1抗體包裝25g
尼克酰胺腺二核苷磷氧化4(NOX4)英文名:NOX4 ELISA Kit色P450單氧化抗體包裝500g
尼克酰胺腺二核苷磷氧化1(NOX1)英文名:NOX1 ELISA Kit色C抗體包裝1g
尼克酰胺-N-基轉(zhuǎn)移(NNMT)英文名:NNMT ELISA Kit角蛋白1抗體包裝1g
內(nèi)脂(VF)英文名:VF ELISA Kit巨病PP65/CMV低基質(zhì)磷脂蛋白抗體包裝1g
內(nèi)臟脂肪特異性絲蛋白抑制因子(Vaspin)英文名:Vaspin ELISA Kit周期C抗體包裝5g
內(nèi)皮脂肪(LIPG)英文名:LIPG ELISA Kit周期B1抗體包裝1g
內(nèi)皮抑(ES)英文名:ES ELISA Kit球蛋白抗體包裝1g
內(nèi)皮型一氧化氮合(NOS3)英文名:NOS3 ELISA Kit周期D1抗體包裝1g
內(nèi)皮細(xì)胞TEK酪激(Tie2)英文名:Tie2 ELISA Kit周期D2抗體包裝5g
內(nèi)皮轉(zhuǎn)化1(ECE1)英文名:ECE1 ELISA Kit周期E抗體包裝25g
: A272資源名稱(chēng): 假諾氏菌 質(zhì)量規(guī)格:≥85%,BR腫瘤壞死因子β試劑盒紫云英苷;astragalin
短小盒菌Parvularcula│sp. 質(zhì)量規(guī)格:純度大于98%腫瘤壞死因子α轉(zhuǎn)化試劑盒知母皂苷A-Ⅲ;Timosaponin
芽孢桿菌屬Bacillus│sp. 質(zhì)量規(guī)格:純度> 99%腫瘤壞死因子α試劑盒樟腦;Camphor
葡萄糖氧化酶(GOD)測(cè)試盒50管/24樣大腸埃希氏 3′-苯乙酮乙脫氫Elisa
猴頭—50043 3-(1-萘基)烯酸乙脫氫Elisa
米羅布里格小單孢 4,5-二氟-2-乙脫氫2Elisa
米曲霉 二甲乙脫氫家族1-A3Elisa
蘇云金芽孢桿 2-甲?;夤鹚嵋阴oA羧化Elisa
大腸埃希 1-Boc-3-酮乙酰CoA羧化1Elisa
西西布哈加瓦氏 5--2,4-二氟乙酰Elisa
谷棒狀桿ATCC13032 N-1-Boc-2-哌甲酸甲酯乙酰受體抗體Elisa
米根霉 4-乙烯基-4'-戊基二環(huán)己烷乙酰酯Elisa
慢生根瘤 1-N-Boc-4-氧代-3-羧酸乙酯乙酰酯抗體Elisa
變異短波單胞 奈韋平乙酰羧化Elisa
多粘芽孢桿 5,6-二氟苯并[c][1,2,5]噻二唑乙酰乙?;D(zhuǎn)移2Elisa
澳型核果褐腐病 6-溴-4-羥基喹啉-3-甲酸乙酰肝Elisa
黑曲霉 鈉(含異)乙型肝炎E抗原Elisa
平菇 1,4-二氨基蒽醌乙型肝炎病X蛋白相互作用蛋白Elisa