亮綠PA染色液公司正在銷售的產(chǎn)品：綿羊β甘露糖苷酶(β Manase)試劑盒 Anti-GPR176 Antibody腸道病71型/手足口病病抗原
綿羊甲狀旁腺樣蛋白(PLP)試劑盒Anti-GPR180 Antibody重組人表皮生長因子
綿羊補(bǔ)體成分3(C3)試劑盒 Anti-GPR174 Antibody表皮生長因子多肽
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產(chǎn)品分類：染色其他

儲存條件：室溫,避光,12個月

用途：膠原纖維染色

注意事項：又稱堿性亮綠、鹽基金沙綠,CAS號：633-03-4,分子量482.63。

 

 

配制與標(biāo)定的實(shí)驗(yàn)原理：

1、用EDTA二鈉鹽配制EDTA標(biāo)準(zhǔn)溶液的原因；

EDTA是四元酸，是一種白色晶體粉末，常用H4Y表示，溶解度很小，室溫溶解度為0.02g/100g H2O。

2、標(biāo)定EDTA標(biāo)準(zhǔn)溶液的工作基準(zhǔn)試劑，基準(zhǔn)試劑的預(yù)處理：稱量前一般應(yīng)先用稀鹽酸洗去氧化層，然后用水洗凈，烘干。

配制步驟：

1、取適量鋅片放在100mL燒杯中，用0.1mol·L-1 HCl溶液（自配）清洗1min，再用自來水、純水洗凈，烘干、冷卻。

2、用直接稱量法在干燥小燒杯中準(zhǔn)確稱取0.15～0.2g Zn，蓋好小表面皿。

3、用滴管從燒杯口加入5mL 1:1 鹽酸，待Zn溶解后吹洗表面皿、杯壁，小心地將溶液轉(zhuǎn)移至250mL容量瓶中，用純水稀釋至標(biāo)線，搖勻。

 

 

實(shí)驗(yàn)方法與判定：

1.對照品溶液的穩(wěn)定性

2.對照品溶液的配制：精密量取腦對照品適量，加無水乙醇制成每1ml含腦1mg的溶液，作為對照品溶液。

3.色譜條件：以交聯(lián)鍵合聚乙二醇為固定相的毛細(xì)管柱；柱溫120℃；進(jìn)樣口溫度250℃；檢測器溫度250℃；分流進(jìn)樣，分流比10:1。理論塔板數(shù)按腦計算應(yīng)不低于10000。

4.實(shí)驗(yàn)方法：配制的對照品溶液，一份置冷處保存，一份置室溫中保存，在第1、3、7、10、15天重新配制一份對照品溶液，三種儲備液同時稀釋制成每1ml中約含50ug的溶液。照氣相色譜法，并依據(jù)新對照品的峰面積計算原對照品溶液的含量。記錄下來，保證原對照品溶液含量在考察期相對平均偏差不超過2.0%，驗(yàn)證對照品溶液在使用期內(nèi)穩(wěn)定可靠。

綠孢環(huán)柄菇雙PHD-D4鋅指蛋白2抗體Human LARP7(La-related protein 7) ELISA Kit人補(bǔ)體7(C7)免疫試劑盒

耐久腸球菌雙特異性磷22抗體Human COL10A1(Collagen alpha-1(X) chain) ELISA Kit人補(bǔ)體3裂解產(chǎn)物(C3SP)免疫試劑盒

擬青霉Erdj5/DNAJC10蛋白抗體Human COL7A1(Collagen alpha-1(VII) chain) ELISA Kit人補(bǔ)體1抑制物抗體-IgM(C1INH-IgM)免疫試劑盒

潮濕乳菇腫瘤調(diào)亡/腫瘤壞死因子受體死亡受體6抗體Human DDX42(ATP-dependent RNA helicase DDX42) ELISA Kit人補(bǔ)體1抑制物抗體-IgG(C1INH-IgG)免疫試劑盒

樟疫霉跨膜TMIGD1蛋白抗體Human BDG(beta-D-glucan) ELISA Kit人補(bǔ)體1q(C1q)免疫試劑盒

黑曲霉軸絲中鏈動力蛋白抗體Human TAT (Tyrosine aminotransferase) ELISA KIT人玻連蛋白(VTN)免疫試劑盒

禾谷鐮孢*軸絲動力蛋白7抗體Human SKI (Ski oncogene) ELISA KIT人波形蛋白(VIM)免疫試劑盒

大豆慢生根瘤菌環(huán)指蛋白19抗體Human HMGA2(High mobility group protein HMGI-C) ELISA Kit人并殖吸蟲抗體(IgM)免疫試劑盒

枯草芽孢桿菌δ-連環(huán)蛋白抗體Human WDTC1 (WD and tetratricopeptide repeats protein 1) ELISA KIT人并殖吸蟲抗體(IgG)免疫試劑盒

黃桿菌屬防御β2抗體Human CHIT1(Chitotriosidase-1) ELISA Kit人型肝炎病(HCV)核心抗原(HCV core Ag)免疫試劑盒

青霉磷化信號轉(zhuǎn)導(dǎo)功能磷蛋白DAB2抗體Human UXS1 (UDP-glucuronic acid decarboxylase 1) ELISA KIT人型肝炎IgM(HCV-IgM)免疫試劑盒

枯草芽孢桿菌雙氧化1/甲狀腺氧化1抗體Human UFL1 (E3 UFM1-protein ligase 1) ELISA KIT人型肝炎IgG(HCV-IgG)免疫試劑盒

綠僵菌雙氧化2/甲狀腺氧化2抗體Human WDSUB1 (WD repeat, SAM and U-box domain-containing protein 1) ELISA KIT人酰羧化β多肽(PCCB)免疫試劑盒

熱帶假絲酵母雙氧化成熟因子抗體Human TAT (Tyrosine aminotransferase) ELISA KIT人烯(ACR)免疫試劑盒

爪哇毛霉胞質(zhì)分裂專一蛋白7抗體Human WRAP73 (WD repeat-containing protein WRAP73) ELISA KIT人脫氫E1(PDH E1)免疫試劑盒

嗜腐爛居真菌細(xì)菌DNA損傷誘導(dǎo)轉(zhuǎn)錄樣蛋白4抗體Human URGCP (Up-regulator of cell proliferation) ELISA KIT人激R型同工(R-PK)免疫試劑盒

日本根霉Rhizopus│japonicus 質(zhì)量規(guī)格：分析標(biāo)準(zhǔn)品大豆皂苷Ba

: M1資源名稱: 傷菌 質(zhì)量規(guī)格：分析標(biāo)準(zhǔn)品(for titrimetry),≥99.5%(HPLC)賽門苷I

泡囊短波單胞菌Brevundimonas│vesicularis 質(zhì)量規(guī)格：分析標(biāo)準(zhǔn)品,≥99%甜茶苷
亮綠PA染色液PYD(Human Pyridinoline) ELISA Kit  人吡啶規(guī)格： 48T

5-HIAA(Human 5-hydroxyindolacetic acid) ELISA Kit  人5羥基乙suan規(guī)格： 48T

12-HETE(Human 20-hydroxyeicosatetraenoic acid) ELISA Kit  人12羥二十烷四烯suan規(guī)格： 48T

Hyp(Human hydroxyproline) ELISA Kit  人羥脯氨suan規(guī)格： 48T

NO(Human nitric oxide) ELISA Kit  人一氧化氮規(guī)格： 48T

使用方法：

1.  常用篩選濃度

注意：用來篩選穩(wěn)轉(zhuǎn)株的工作濃度需要根據(jù)細(xì)胞類型，培養(yǎng)基，生長條件和細(xì)胞代謝率而變化，推薦使用濃度為50-1000μg/mL。對于第一次使用的實(shí)驗(yàn)體系建議通過建立殺滅曲線（kill curve），即劑量反應(yīng)性曲線，來確定最佳篩選濃度。

一般而言，哺乳動物細(xì)胞50-500μg/mL；細(xì)菌/植物細(xì)胞20-200μg/mL；真菌300-1000μg/mL。

2. 殺滅曲線的建立

注意：為了篩選得到穩(wěn)定表達(dá)目的蛋白的細(xì)胞株，需要確定能夠殺死未轉(zhuǎn)染宿主細(xì)胞的抗生素濃度，可通過建立殺滅曲線（劑量反應(yīng)曲線）來實(shí)現(xiàn)，至少選擇5個濃度。

1）  第一天：未轉(zhuǎn)化的細(xì)胞按照20-25%的細(xì)胞密度鋪在合適的培養(yǎng)板上，37℃，CO2培養(yǎng)過夜；注：對于需要更高密度來檢測活力的細(xì)胞，可增加接種量。

2）  根據(jù)細(xì)胞類型，設(shè)定合適范圍內(nèi)的濃度梯度。以哺乳動物細(xì)胞為例，可設(shè)定50，100，250，500，750，1000μg/mL。先用去離子水或者PBS buffer按照1:10的比例將母液稀釋到5 mg/ml，然后按照下表稀釋到相應(yīng)濃度的工作液。

3）  第二天：替換舊的培養(yǎng)基，換用新鮮配制的含有相應(yīng)濃度藥物的培養(yǎng)基。每個濃度做三個平行孔。

4）  接下來每3-4天更換新的含藥物培養(yǎng)基。

5）  按照固定的周期（如每2天）進(jìn)行活細(xì)胞計數(shù)來確定阻止未轉(zhuǎn)染細(xì)胞生長的恰當(dāng)濃度。選擇在理想的天數(shù)（通常是7-10天）內(nèi)能夠殺死絕大多數(shù)細(xì)胞的濃度為穩(wěn)定轉(zhuǎn)染細(xì)胞篩選用的工作濃度。

3.   穩(wěn)定轉(zhuǎn)染細(xì)胞的篩選

1）  轉(zhuǎn)染48h后，用含有適當(dāng)濃度的潮霉素B篩選培養(yǎng)基來傳代細(xì)胞（直接傳代或者稀釋后傳代）。

注意：細(xì)胞處于活躍分裂狀態(tài)時抗生素的殺傷。則當(dāng)細(xì)胞過于稠密，其效率會降低。為了得到較好的篩選效果，最好將細(xì)胞稀釋至豐度不超過25%

2）  每隔3-4天更換含有藥物的篩選培養(yǎng)液。

3）  篩選7天后觀察并評估細(xì)胞克隆（集落）的形成情況。集落的形成可能還需要一周或者更多的時間，這取決于宿主細(xì)胞類型，轉(zhuǎn)染，以及篩選效果。

4）   挑取并轉(zhuǎn)移5-10個抗性克隆于35mm細(xì)胞培養(yǎng)板，繼續(xù)用含藥物的篩選培養(yǎng)液維持培養(yǎng)7天。

5）   之后更換正常培養(yǎng)基培養(yǎng)即可。