公司產(chǎn)品僅供科研使用:
商品介紹:
商品介紹 測(cè)定意義: C4H又稱(chēng)反式肉桂酸-4-單氧化酶,多存在于高等植物、酵母、菌類(lèi)中,該酶催化肉桂酸羥化作用產(chǎn)生4-香豆酸鹽,是苯丙烷途徑中繼L-苯丙an酸解氨酶之后的第二個(gè)關(guān)鍵酶。 測(cè)定原理: C4H催化肉桂酸和NADP生成4-香豆酸鹽和NADPH,在340nm下測(cè)定NADPH生成速率,即可反映C4H活性。 需自備的儀器和用品: 紫外分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、臺(tái)式離心機(jī)、可調(diào)式移液器、微量石英比色皿/96孔板、研缽、冰和蒸餾水。 |
常見(jiàn)樣本處理方法:
1、血清(漿)樣品:直接檢測(cè)。
2、細(xì)菌、細(xì)胞或組織樣品的制備: 細(xì)菌或培養(yǎng)細(xì)胞:先收集細(xì)菌或細(xì)胞到離心管內(nèi),離心后棄上清;按照細(xì)菌或細(xì)胞數(shù)量(104個(gè)):提取液體積(mL)為500~1000:1的比例(建議500萬(wàn)細(xì)菌或細(xì)胞加入1mL提取液) ,超聲波破碎細(xì)菌或細(xì)胞(冰浴,功率20%或200W,超聲3s,間隔10s,重復(fù)30次)8000g 4℃離心10min,取上清,置冰上待測(cè)。組織:按照組織質(zhì)量(g) :提取液體積(mL)為1:5~10的比例(建議稱(chēng)取約0.1g組織,加入1mL提取液),進(jìn)行冰浴勻漿。8000g 4℃離心10min,取上清,置冰上待測(cè)。
產(chǎn)品優(yōu)點(diǎn)如下:
1、快速簡(jiǎn)便:雙試劑,直接操作,快速、簡(jiǎn)便。
2、取樣量微:需要的樣本量是羥胺法的1/10。
3、靈敏度高:檢測(cè)線0.5U/ml,是羥胺法5倍,鄰苯三酚法的200倍
4、穩(wěn)定性好:批內(nèi)CV=5.50%,批間CV=3.32%,試劑盒2~8℃存放3個(gè)月有效。
5、再現(xiàn)性好:變異系數(shù)CV=1.2%。6、回收試驗(yàn): X =102.3%。7、受外界影響因素小:干擾因素少,重復(fù)性強(qiáng)。且特異性強(qiáng),不受類(lèi)SOD物質(zhì)的干擾8、測(cè)試面廣:可測(cè)動(dòng)物血液、組織、各種體液、灌流液等、各種培養(yǎng)細(xì)胞、細(xì)菌、植物組織、各種水產(chǎn)以及化妝品、保健品等,效果均佳。
測(cè)定步驟:
1.加樣
1. 除包被外都需45度加樣
2.加樣體積要準(zhǔn)確
3.管底加樣,不能加在管壁上
4.加樣時(shí)不能產(chǎn)生氣泡
2.溫浴
1.加標(biāo)本后和加結(jié)合物后,應(yīng)立即放入按規(guī)定的反應(yīng)溫 度的水浴箱。
2.各ELISA板不應(yīng)疊在一起。
3.為避免蒸發(fā),板上應(yīng)加蓋,或?qū)迤椒旁诘撞繅|有濕 紗布的金屬濕盒中。
4.加入底物后,反應(yīng)的時(shí)間和溫度通常不做嚴(yán)格要求。 如室溫高于20℃,ELISA板可避光放在實(shí)驗(yàn)臺(tái)上,以便 不時(shí)觀察,待對(duì)照管顯色適當(dāng)時(shí),即可終止酶反應(yīng)。
3.洗滌
1.洗滌在ELISA過(guò)程中不是反應(yīng)步驟,但卻 是決定實(shí)驗(yàn)成敗的關(guān)鍵。
2.目的是洗去反應(yīng)液中沒(méi)有與固相抗原或 抗體結(jié)合的物質(zhì)以及在反應(yīng)過(guò)程中非特 異性吸附于固相載體的干擾物質(zhì)。
4.讀板
1.陰性對(duì)照顏色極淺,在定性測(cè)定中一般 可采用目視比色。
2.如用酶標(biāo)儀測(cè)定結(jié)果,準(zhǔn)確性決定于 ELISA板底的平整與透明度、酶標(biāo)儀的質(zhì) 量和軟件的算法。
銹赤蠟黃鏈霉菌12號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框54抗體Human MFN2(Mitofusin-2) ELISA Kit人維蛋白原降解產(chǎn)物(FDP)免疫試劑盒
慢生根瘤菌磷化鈣調(diào)節(jié)抗體Human ILDR2(Immunoglobulin-like domain-containing receptor 2) ELISA K白原α鏈(FGA)免疫試劑盒
釀酒酵母分裂相關(guān)蛋白CSTF64抗體Human NPY(Neuropeptide Y) ELISA Kit人維蛋白原(Fb)免疫試劑盒
泡盛曲霉磷化分裂相關(guān)蛋白CSTF64抗體Human VDAC1(Voltage-dependent anion-selective channel protein 1) ELISA Kit人纖溶抑制因子/凝血激活的纖溶抑制物(TAFI)免疫試劑盒
馬沙門(mén)氏菌磷化分裂相關(guān)蛋白CSTF64抗體Human TP53 antibody(p53 antibody) ELISA Kit人纖溶原(Plg)免疫試劑盒
白黃馬賽菌CD3抗體Human Galactose-Deficient IgA1(Galactose-Deficient IgA1) ELISA Kit人纖溶抗纖溶復(fù)合物(PAP)免疫試劑盒
黃曲霉CD4抗體Human ENK(Enkephalin) ELISA Kit人纖溶/纖維蛋白溶(PL/Fbn)免疫試劑盒
芽孢桿菌白共同抗原抗體Human β-actin(Beta actin) ELISA Kit人纖連蛋白(FN)自身抗體免疫試劑盒
布魯塞爾德克酵母白共同抗原抗體Human AA(Arachidonic Acid) ELISA Kit人纖連蛋白(FN)免疫試劑盒
食有機(jī)物深海芽孢桿菌白共同抗原抗體Human MBP(myelin basic protein) ELISA Kit人纖調(diào)蛋白(FMOD)免疫試劑盒
門(mén)柏青霉間隙連接蛋白36抗體Human ACP(Acid phosphatase) ELISA Kit人細(xì)小病B19(B19V)抗體(IgM)免疫試劑盒
Methylibium12號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框61抗體Human SOCS4(Suppressor Of Cytokine Signaling 4) ELISA Kit人周期A2(Cyclin-A2)免疫試劑盒
釀酒酵母12號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框63抗體Human CHAT(Choline O-acetyltransferase) ELISA Kit人周期蛋白依賴(lài)性激2(CDK2)免疫試劑盒
毛栓孔菌12號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框68抗體Human HbsAg(hepatitis B virus Surface Antigen) ELISA Kit人周期蛋白A1(CCNA1)免疫試劑盒
類(lèi)芽孢桿菌屬角蛋白15抗體Human IMPDH2(Inosine 5′-Monophosphate Dehydrogenase 2) ELISA Kit人因子信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)抑制因子3(SOCS-3)免疫試劑盒
氧化節(jié)桿菌1號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框103抗體Human TPAb(Treponema pallidum antibody) ELISA Kit人因子信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)抑制因子1(SOCS-1)免疫試劑盒
木防已盤(pán)多毛孢Pestalotia│cocculi 質(zhì)量規(guī)格:BSD二聚體試劑盒光翠雀堿
菌核青霉Penicillium│sclerotiorum 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BCDNA拓?fù)洚悩?gòu)1試劑盒枸櫞
稀褶黑菇Russula│nigricans (Bull.) Fr. 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BRDNA損傷誘導(dǎo)轉(zhuǎn)錄因子4樣蛋白試劑盒狗牙花堿D乙
肉桂酸4羥化酶(C4H)測(cè)試盒100管/96樣蠟樣芽孢桿 2--4-羥基游離蛋白SElisa
棱柱散尾中華變型 6-氧化游離睪酮Elisa
植物乳桿 2-溴甲基喹啉游離甲狀腺Elisa
*味牛肝 鉻酸銫游離狀腺原Elisa
枯草芽孢桿 雙環(huán)己烷-4,4'-二酮單乙二縮酮游離血紅蛋白Elisa
產(chǎn)朊假絲酵母 苯并噻唑-2-乙游離原卟啉Elisa
水棲黃桿 4-松油游離脂肪酸Elisa
直絲紫鏈霉 酐有死亡區(qū)的腫瘤壞死因子受體1相關(guān)蛋白Elisa
脂肪桿 四基硫酸氫誘導(dǎo)型NO合Elisa
季也蒙假絲酵母果生變種 肌叔丁酯鹽酸鹽鳶尾Elisa
西弗冠孢酵母 3-溴-2-三氟甲苯原鈣黏1Elisa
德氏乳桿 4-氟-2-孕酮Elisa
小單孢 離子霉載脂蛋白AElisa
鼠李糖乳桿 2-氨基-6-載脂蛋白A1Elisa
嗜乙酰乙酸棒桿 對(duì)羥基苯酸甲酯載脂蛋白A2Elisa
實(shí)驗(yàn)方法學(xué):
一、肝素的配制:
市售肝素凍干粉140單位/mg,1克瓶裝,每瓶140,000單位,稱(chēng)取0.1克肝素凍干粉,加生理鹽水5ml,配成2800單位/ml。取50~100μl濕潤(rùn)管壁,可抗凝人血3~5ml,血液不會(huì)凝固。老鼠血易凝固,所以最好更濃一些??梢匀?.1克肝素凍干粉,加3ml生理鹽水溶解后,取50~100μl,可抗凝鼠血2~4ml。
肝素抗凝管的制備:取0.1克肝素凍干粉,加2.5ml生理鹽水。取100μl~150μl滴入塑料或玻璃管中,濕潤(rùn)管壁,低于80℃小烤箱中(可以用烤面包的小烤箱),橫向轉(zhuǎn)動(dòng),每隔5~10分鐘轉(zhuǎn)動(dòng)一次,直至干燥后放入4℃保存,可使2~5ml血液不凝固。
二、血液樣本的收集:
全血根據(jù)收集的條件,分成不抗凝和抗凝兩種。同時(shí),不抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱(chēng)之為血清;抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱(chēng)之為血漿。
1、不抗凝收集血清:將收集好的全血,靜置1~2小時(shí),直接低速離心分離出血清待用或保存。
2、抗凝收集血漿: 收集抗凝全血,輕輕顛倒充分抗凝后,可直接低速離心分離血漿(也可靜置半小時(shí)左右再低速離心分離血漿)待用或保存。根據(jù)不同抗凝劑的性能特征,選擇合適的抗凝劑。實(shí)驗(yàn)室常用的抗凝劑有肝素的各種鹽、EDTA
選擇抗凝的注意點(diǎn):
①、每一份樣本所加的抗凝劑的量要一致,同時(shí)所取的全血的量也要盡量一致;
②、收集抗凝全血后一定要輕輕顛倒,充分抗凝,防止部分血液未接觸到抗凝劑而導(dǎo)致凝固;
③、抗凝全血收集的血漿相對(duì)較多(1ml抗凝全血能分離出0.4~0.5ml血漿);
④、抗凝收集的血漿冷凍保存后,解凍時(shí)可能會(huì)出現(xiàn)絮狀渾濁,如有則需要離心去掉渾濁后
用于測(cè)定。