產(chǎn)品分類:染色其他
儲(chǔ)存條件:室溫,12個(gè)月
用途:組織切片漂白
注意事項(xiàng):主要由草酸、去離子水組成。
公司產(chǎn)品僅用于科研具有質(zhì)量可靠、效果穩(wěn)定、靈敏度高、操作簡(jiǎn)單、易保存等特點(diǎn),咨詢并訂購(gòu)!
產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 貨號(hào) |
草酸水溶液 | 500ml | FS-R7174 |
配制與標(biāo)定的實(shí)驗(yàn)原理:
1、用EDTA二鈉鹽配制EDTA標(biāo)準(zhǔn)溶液的原因;
EDTA是四元酸,是一種白色晶體粉末,常用H4Y表示,溶解度很小,室溫溶解度為0.02g/100g H2O。
2、標(biāo)定EDTA標(biāo)準(zhǔn)溶液的工作基準(zhǔn)試劑,基準(zhǔn)試劑的預(yù)處理:稱量前一般應(yīng)先用稀鹽酸洗去氧化層,然后用水洗凈,烘干。
配制步驟:
1、取適量鋅片放在100mL燒杯中,用0.1mol·L-1 HCl溶液(自配)清洗1min,再用自來水、純水洗凈,烘干、冷卻。
2、用直接稱量法在干燥小燒杯中準(zhǔn)確稱取0.15~0.2g Zn,蓋好小表面皿。
3、用滴管從燒杯口加入5mL 1:1 鹽酸,待Zn溶解后吹洗表面皿、杯壁,小心地將溶液轉(zhuǎn)移至250mL容量瓶中,用純水稀釋至標(biāo)線,搖勻。
實(shí)驗(yàn)方法與判定:
1.對(duì)照品溶液的穩(wěn)定性
2.對(duì)照品溶液的配制:精密量取腦對(duì)照品適量,加無水乙醇制成每1ml含腦1mg的溶液,作為對(duì)照品溶液。
3.色譜條件:以交聯(lián)鍵合聚乙二醇為固定相的毛細(xì)管柱;柱溫120℃;進(jìn)樣口溫度250℃;檢測(cè)器溫度250℃;分流進(jìn)樣,分流比10:1。理論塔板數(shù)按腦計(jì)算應(yīng)不低于10000。
4.實(shí)驗(yàn)方法:配制的對(duì)照品溶液,一份置冷處保存,一份置室溫中保存,在第1、3、7、10、15天重新配制一份對(duì)照品溶液,三種儲(chǔ)備液同時(shí)稀釋制成每1ml中約含50ug的溶液。照氣相色譜法,并依據(jù)新對(duì)照品的峰面積計(jì)算原對(duì)照品溶液的含量。記錄下來,保證原對(duì)照品溶液含量在考察期相對(duì)平均偏差不超過2.0%,驗(yàn)證對(duì)照品溶液在使用期內(nèi)穩(wěn)定可靠。
使用方法:
1. 常用篩選濃度
注意:用來篩選穩(wěn)轉(zhuǎn)株的工作濃度需要根據(jù)細(xì)胞類型,培養(yǎng)基,生長(zhǎng)條件和細(xì)胞代謝率而變化,推薦使用濃度為50-1000μg/mL。對(duì)于第一次使用的實(shí)驗(yàn)體系建議通過建立殺滅曲線(kill curve),即劑量反應(yīng)性曲線,來確定最佳篩選濃度。
一般而言,哺乳動(dòng)物細(xì)胞50-500μg/mL;細(xì)菌/植物細(xì)胞20-200μg/mL;真菌300-1000μg/mL。
2. 殺滅曲線的建立
注意:為了篩選得到穩(wěn)定表達(dá)目的蛋白的細(xì)胞株,需要確定能夠殺死未轉(zhuǎn)染宿主細(xì)胞的抗生素濃度,可通過建立殺滅曲線(劑量反應(yīng)曲線)來實(shí)現(xiàn),至少選擇5個(gè)濃度。
1) 第一天:未轉(zhuǎn)化的細(xì)胞按照20-25%的細(xì)胞密度鋪在合適的培養(yǎng)板上,37℃,CO2培養(yǎng)過夜;注:對(duì)于需要更高密度來檢測(cè)活力的細(xì)胞,可增加接種量。
2) 根據(jù)細(xì)胞類型,設(shè)定合適范圍內(nèi)的濃度梯度。以哺乳動(dòng)物細(xì)胞為例,可設(shè)定50,100,250,500,750,1000μg/mL。先用去離子水或者PBS buffer按照1:10的比例將母液稀釋到5 mg/ml,然后按照下表稀釋到相應(yīng)濃度的工作液。
3) 第二天:替換舊的培養(yǎng)基,換用新鮮配制的含有相應(yīng)濃度藥物的培養(yǎng)基。每個(gè)濃度做三個(gè)平行孔。
4) 接下來每3-4天更換新的含藥物培養(yǎng)基。
5) 按照固定的周期(如每2天)進(jìn)行活細(xì)胞計(jì)數(shù)來確定阻止未轉(zhuǎn)染細(xì)胞生長(zhǎng)的恰當(dāng)濃度。選擇在理想的天數(shù)(通常是7-10天)內(nèi)能夠殺死絕大多數(shù)細(xì)胞的濃度為穩(wěn)定轉(zhuǎn)染細(xì)胞篩選用的工作濃度。
3. 穩(wěn)定轉(zhuǎn)染細(xì)胞的篩選
1) 轉(zhuǎn)染48h后,用含有適當(dāng)濃度的潮霉素B篩選培養(yǎng)基來傳代細(xì)胞(直接傳代或者稀釋后傳代)。
注意:細(xì)胞處于活躍分裂狀態(tài)時(shí)抗生素的殺傷。則當(dāng)細(xì)胞過于稠密,其效率會(huì)降低。為了得到較好的篩選效果,最好將細(xì)胞稀釋至豐度不超過25%
2) 每隔3-4天更換含有藥物的篩選培養(yǎng)液。
3) 篩選7天后觀察并評(píng)估細(xì)胞克?。洌┑男纬汕闆r。集落的形成可能還需要一周或者更多的時(shí)間,這取決于宿主細(xì)胞類型,轉(zhuǎn)染,以及篩選效果。
4) 挑取并轉(zhuǎn)移5-10個(gè)抗性克隆于35mm細(xì)胞培養(yǎng)板,繼續(xù)用含藥物的篩選培養(yǎng)液維持培養(yǎng)7天。
5) 之后更換正常培養(yǎng)基培養(yǎng)即可。
根瘤菌EB病核抗原1抗體Human GFOD1 (Glucose-fructose oxidoreductase domain-containing protein 1) ELISA KIT犬皮質(zhì)/腎上腺(CORT)免疫試劑盒
*冬蟲夏草磷化雌激受體β抗體Human GBGT1 (Globoside alpha-1,3-N-acetylgalactosaminyltransferase 1) ELISA KIT犬皮質(zhì)(Cortisol)免疫試劑盒
鐮刀菌屬磷化4E結(jié)合蛋白1抗體Human LGALSL (Galectin-related protein) ELISA KIT犬凝血抗凝血復(fù)合物(TAT)免疫試劑盒
釀酒酵母磷化4E結(jié)合蛋白1,2,3抗體Human GPR37L1 (Prosaposin receptor GPR37L1) ELISA KIT犬凝聚(CLU)免疫試劑盒
谷棒桿菌Epsin2B蛋白抗體Human GLMN (Glomulin) ELISA KIT犬腦鈉/腦鈉尿肽(BNP)免疫試劑盒
除烴海桿狀菌表皮生長(zhǎng)因子抗體Human GPR65 (Psychosine receptor) ELISA KIT犬內(nèi)皮型一氧化氮合成(eNOS)免疫試劑盒
孢小克銀漢霉輪生變種表皮生長(zhǎng)因子樣蛋白8抗體Human ARHGAP35 (Rho GTPase-activating protein 35) ELISA KIT犬內(nèi)皮1(ET-1)免疫試劑盒
叢毛紅曲E3泛連接抗體Human GFOD1 (Glucose-fructose oxidoreductase domain-containing protein 1) ELISA KIT犬內(nèi)皮生長(zhǎng)因子受體(EGFR)免疫試劑盒
石狀青霉小鼠抗表皮生長(zhǎng)因子抗體Human MRGPRX2 (Mas-related G-protein coupled receptor member X2) ELISA KIT犬內(nèi)(ET)免疫試劑盒
豬鏈球菌分型血清參考品 血清型 SS7抗表皮生長(zhǎng)因子抗體Human LGALSL (Galectin-related protein) ELISA KIT犬繆勒管抑制物質(zhì)/抗繆勒管激(MIS/AMH)免疫試劑盒
釀酒酵母內(nèi)皮受體蛋白酪激A2+A3+A4抗體Human GLCE (D-glucuronyl C5-epimerase) ELISA KIT犬免疫球蛋白M(IgM)免疫試劑盒
魯氏接合酵母磷化內(nèi)皮受體蛋白酪激A2+A3+A4抗體Human GLMN (Glomulin) ELISA KIT犬免疫球蛋白G(IgG)免疫試劑盒
米曲霉磷化內(nèi)皮受體蛋白酪激A3+A4+A5抗體Human GPR65 (Psychosine receptor) ELISA KIT犬免疫球蛋白E(IgE)免疫試劑盒
浸麻類芽孢桿菌轉(zhuǎn)錄因子Ets差異基因5抗體Human ARHGAP35 (Rho GTPase-activating protein 35) ELISA KIT犬免疫球蛋白A(IgA)免疫試劑盒
短波單胞菌E選擇抗體Human GFOD1 (Glucose-fructose oxidoreductase domain-containing protein 1) ELISA KIT犬硫雌(E1S)免疫試劑盒
Paenibacillus大腸桿菌耐熱性腸抗體Human MRGPRX2 (Mas-related G-protein coupled receptor member X2) ELISA KIT犬粒巨噬集落激因子(GM-CSF)免疫試劑盒
膠凍樣芽胞桿菌Bacillus│mucilaginosus 質(zhì)量規(guī)格:719(202)是高等級(jí)凝膠強(qiáng)堿Ⅱ型陰離子交換樹脂茜
青霉屬Penicillium│sp. 質(zhì)量規(guī)格:分析標(biāo)準(zhǔn)品,用于凱氏定氮法氮測(cè)定,≥99.5%β-蒎烯
球孢白僵菌Beauveria│bassiana (Bals.-Criv.) Vuill. 質(zhì)量規(guī)格:for HPLC,≥99.0%(T)α-蒎烯
草酸水溶液Human Beta-Thromboglobulin, Beta-TG ELISA Kit 人β血小板球蛋白/β血栓環(huán)蛋白規(guī)格: 48T
Human Platelet Factor 4,PF-4 ELISA Kit 人血小板因子4規(guī)格: 48T
Human lymphocyte function associated antigen 2,LFA-2 ELISA Kit 人淋巴細(xì)胞功能相關(guān)抗原2規(guī)格: 48T
Human leukotriene E4,LT-E4 ELISA Kit 人白三烯E4規(guī)格: 48T
Human D-Dimer,D2D ELISA Kit 人D二聚體規(guī)格: 48T