產(chǎn)品分類:染色其他
儲(chǔ)存條件:室溫,6個(gè)月
用途:組織切片漂白
注意事項(xiàng):主要由亞硫酸、去離子水組成。
公司產(chǎn)品僅用于科研具有質(zhì)量可靠、效果穩(wěn)定、靈敏度高、操作簡(jiǎn)單、易保存等特點(diǎn),咨詢并訂購(gòu)!
產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 貨號(hào) |
亞硫酸漂白劑 | 500ml | FS-R7175 |
配制與標(biāo)定的實(shí)驗(yàn)原理:
1、用EDTA二鈉鹽配制EDTA標(biāo)準(zhǔn)溶液的原因;
EDTA是四元酸,是一種白色晶體粉末,常用H4Y表示,溶解度很小,室溫溶解度為0.02g/100g H2O。
2、標(biāo)定EDTA標(biāo)準(zhǔn)溶液的工作基準(zhǔn)試劑,基準(zhǔn)試劑的預(yù)處理:稱量前一般應(yīng)先用稀鹽酸洗去氧化層,然后用水洗凈,烘干。
配制步驟:
1、取適量鋅片放在100mL燒杯中,用0.1mol·L-1 HCl溶液(自配)清洗1min,再用自來水、純水洗凈,烘干、冷卻。
2、用直接稱量法在干燥小燒杯中準(zhǔn)確稱取0.15~0.2g Zn,蓋好小表面皿。
3、用滴管從燒杯口加入5mL 1:1 鹽酸,待Zn溶解后吹洗表面皿、杯壁,小心地將溶液轉(zhuǎn)移至250mL容量瓶中,用純水稀釋至標(biāo)線,搖勻。
實(shí)驗(yàn)方法與判定:
1.對(duì)照品溶液的穩(wěn)定性
2.對(duì)照品溶液的配制:精密量取腦對(duì)照品適量,加無水乙醇制成每1ml含腦1mg的溶液,作為對(duì)照品溶液。
3.色譜條件:以交聯(lián)鍵合聚乙二醇為固定相的毛細(xì)管柱;柱溫120℃;進(jìn)樣口溫度250℃;檢測(cè)器溫度250℃;分流進(jìn)樣,分流比10:1。理論塔板數(shù)按腦計(jì)算應(yīng)不低于10000。
4.實(shí)驗(yàn)方法:配制的對(duì)照品溶液,一份置冷處保存,一份置室溫中保存,在第1、3、7、10、15天重新配制一份對(duì)照品溶液,三種儲(chǔ)備液同時(shí)稀釋制成每1ml中約含50ug的溶液。照氣相色譜法,并依據(jù)新對(duì)照品的峰面積計(jì)算原對(duì)照品溶液的含量。記錄下來,保證原對(duì)照品溶液含量在考察期相對(duì)平均偏差不超過2.0%,驗(yàn)證對(duì)照品溶液在使用期內(nèi)穩(wěn)定可靠。
使用方法:
1. 常用篩選濃度
注意:用來篩選穩(wěn)轉(zhuǎn)株的工作濃度需要根據(jù)細(xì)胞類型,培養(yǎng)基,生長(zhǎng)條件和細(xì)胞代謝率而變化,推薦使用濃度為50-1000μg/mL。對(duì)于第一次使用的實(shí)驗(yàn)體系建議通過建立殺滅曲線(kill curve),即劑量反應(yīng)性曲線,來確定最佳篩選濃度。
一般而言,哺乳動(dòng)物細(xì)胞50-500μg/mL;細(xì)菌/植物細(xì)胞20-200μg/mL;真菌300-1000μg/mL。
2. 殺滅曲線的建立
注意:為了篩選得到穩(wěn)定表達(dá)目的蛋白的細(xì)胞株,需要確定能夠殺死未轉(zhuǎn)染宿主細(xì)胞的抗生素濃度,可通過建立殺滅曲線(劑量反應(yīng)曲線)來實(shí)現(xiàn),至少選擇5個(gè)濃度。
1) 第一天:未轉(zhuǎn)化的細(xì)胞按照20-25%的細(xì)胞密度鋪在合適的培養(yǎng)板上,37℃,CO2培養(yǎng)過夜;注:對(duì)于需要更高密度來檢測(cè)活力的細(xì)胞,可增加接種量。
2) 根據(jù)細(xì)胞類型,設(shè)定合適范圍內(nèi)的濃度梯度。以哺乳動(dòng)物細(xì)胞為例,可設(shè)定50,100,250,500,750,1000μg/mL。先用去離子水或者PBS buffer按照1:10的比例將母液稀釋到5 mg/ml,然后按照下表稀釋到相應(yīng)濃度的工作液。
3) 第二天:替換舊的培養(yǎng)基,換用新鮮配制的含有相應(yīng)濃度藥物的培養(yǎng)基。每個(gè)濃度做三個(gè)平行孔。
4) 接下來每3-4天更換新的含藥物培養(yǎng)基。
5) 按照固定的周期(如每2天)進(jìn)行活細(xì)胞計(jì)數(shù)來確定阻止未轉(zhuǎn)染細(xì)胞生長(zhǎng)的恰當(dāng)濃度。選擇在理想的天數(shù)(通常是7-10天)內(nèi)能夠殺死絕大多數(shù)細(xì)胞的濃度為穩(wěn)定轉(zhuǎn)染細(xì)胞篩選用的工作濃度。
3. 穩(wěn)定轉(zhuǎn)染細(xì)胞的篩選
1) 轉(zhuǎn)染48h后,用含有適當(dāng)濃度的潮霉素B篩選培養(yǎng)基來傳代細(xì)胞(直接傳代或者稀釋后傳代)。
注意:細(xì)胞處于活躍分裂狀態(tài)時(shí)抗生素的殺傷。則當(dāng)細(xì)胞過于稠密,其效率會(huì)降低。為了得到較好的篩選效果,最好將細(xì)胞稀釋至豐度不超過25%
2) 每隔3-4天更換含有藥物的篩選培養(yǎng)液。
3) 篩選7天后觀察并評(píng)估細(xì)胞克?。洌┑男纬汕闆r。集落的形成可能還需要一周或者更多的時(shí)間,這取決于宿主細(xì)胞類型,轉(zhuǎn)染,以及篩選效果。
4) 挑取并轉(zhuǎn)移5-10個(gè)抗性克隆于35mm細(xì)胞培養(yǎng)板,繼續(xù)用含藥物的篩選培養(yǎng)液維持培養(yǎng)7天。
5) 之后更換正常培養(yǎng)基培養(yǎng)即可。
漢遜德巴酵母泛激活E1抗體Human TREM2(Triggering receptor expressed on myeloid cells 2) ELISA Kit犬類免疫試劑盒
梅花狀青霉表皮生長(zhǎng)因子受體抗體Human FNBP1 (Formin-binding protein 1) ELISA KIT犬類風(fēng)濕因子(RF)免疫試劑盒
黃硬皮馬勃Ets轉(zhuǎn)錄因子家族e(cuò)ts1抗體Human FKRP (Fukutin-related protein) ELISA KIT犬抗尿激/血管加壓/精加壓(AVP)免疫試劑盒
阿維菌鏈霉菌早期B淋巴因子1抗體Human FUOM (Fucose mutarotase) ELISA KIT犬抗狂犬病(RV)抗體免疫試劑盒
枯草芽孢桿菌內(nèi)皮受體A抗體Human FNBP1L (Formin-binding protein 1-like) ELISA KIT犬巨噬來源的趨化因子(MDC/CCL22)免疫試劑盒
絳紅產(chǎn)色小單胞菌表皮生長(zhǎng)因子受體抗體Human GPRC6A (G-protein coupled receptor family C group 6 member A) ELISA KIT犬結(jié)締組織生長(zhǎng)因子(CTGF)免疫試劑盒
紅冬孢酵母屬表皮生長(zhǎng)因子受體抗體Human GPBAR1 (G-protein coupled bile acid receptor 1) ELISA KIT犬結(jié)蛋白(Des)免疫試劑盒
白靈側(cè)耳早期生長(zhǎng)應(yīng)答蛋白1抗體Human FOSL1 (Fos-related antigen 1) ELISA KIT犬窖蛋白Caveolin-1(CAV1)免疫試劑盒
Hyalodendriella betulae Crous 表皮膜蛋白1抗體Human FFAR1 (Free fatty acid receptor 1) ELISA KIT犬降鈣原(PCT)免疫試劑盒
貪噬菌內(nèi)皮受體蛋白酪激A抗體(腫瘤壞死因子α誘導(dǎo)蛋白4)Human FRAS1 (Extracellular matrix protein FRAS1) ELISA KIT犬降鈣(CALCA)免疫試劑盒
香菇酪蛋白激A4抗體Human FRAT1 (Proto-oncogene FRAT1) ELISA KIT犬堿性磷(ALP)免疫試劑盒
不吸水鏈霉菌前列腺E受體3抗體Human TREM2(Triggering receptor expressed on myeloid cells 2) ELISA Kit犬甲狀腺(T4)免疫試劑盒
孟氏假單胞菌雌激受體α抗體Human FRAT2 (GSK-3-binding protein FRAT2) ELISA KIT犬甲狀旁腺激(PTH)免疫試劑盒
枯草芽孢桿菌ENPP3抗體IgGHuman FUOM (Fucose mutarotase) ELISA KIT犬基質(zhì)金屬蛋白9/明膠B(MMP-9/Gelatinase B)免疫試劑盒
相思根瘤菌絲裂原活化蛋白激1/2抗體Human FNBP1 (Formin-binding protein 1) ELISA KIT犬基質(zhì)金屬蛋白3(MMP-3)免疫試劑盒
植物乳桿菌胚胎干RAS蛋白抗體Human GPRC6A (G-protein coupled receptor family C group 6 member A) ELISA KIT犬基質(zhì)金屬蛋白2/明膠A(MMP-2/Gelatinase A)免疫試劑盒
Idriella lunataIdriella│lunata 質(zhì)量規(guī)格:Mesh 20-60尿囊
ATCC21819資源名稱: 橄欖星孢小單孢菌 質(zhì)量規(guī)格:粒徑0.49 - 0.69 mm1,2,3,4,6-O-沒食子酰葡萄糖
: ACCC11001資源名稱: 嗜根考克氏菌(藤黃八疊球菌) 質(zhì)量規(guī)格:分析標(biāo)準(zhǔn)品,用于萜烯分析,≥99.5% (GC)雷內(nèi)酯
亞硫酸漂白劑human Immunoglobulin E,IgE ELISA Kit E規(guī)格: 48T
Human Triggering Receptor Expresses on Myeloid Cells-1,TREM-1 ELISA Kit 人髓系細(xì)胞觸發(fā)受體-1規(guī)格: 48T
Human leukoregulin,LR ELISA Kit 人白細(xì)胞調(diào)節(jié)su規(guī)格: 48T
Human Thrombopoietin,TPO ELISA kit 人血小板生成su規(guī)格: 48T
Human Leukemia inhibitory factor,LIF ELISA kit 人白血病抑制因子規(guī)格: 48T