核酸預(yù)雜交液公司正在銷售的產(chǎn)品：Anti-RNF125 Antibody人抗膜DNA抗體
Anti-RNF130 Antibody小鼠神經(jīng)膠質(zhì)纖維酸性蛋白
Anti-RNF14 Antibody大鼠主要組織相容性復(fù)合體Ⅲ類
Anti-RNF144A Antibody大鼠主要組織相容性復(fù)合體Ⅱ類
Anti-RNF138 Antibody小鼠抗中性粒核周抗體
Anti-RNF144A Antibody

產(chǎn)品分類：核酸雜交

儲(chǔ)存條件：—20℃,避光,6個(gè)月

用途：核酸雜交

注意事項(xiàng)：主要由去離子甲酰胺、SSC、SDS、變性鮭魚精DNA、DEPC水等組成,使用前避免污染。

公司產(chǎn)品僅用于科研具有質(zhì)量可靠、效果穩(wěn)定、靈敏度高、操作簡單、易保存等特點(diǎn)，咨詢并訂購！

 

 

 

配制與標(biāo)定的實(shí)驗(yàn)原理：

1、用EDTA二鈉鹽配制EDTA標(biāo)準(zhǔn)溶液的原因；

EDTA是四元酸，是一種白色晶體粉末，常用H4Y表示，溶解度很小，室溫溶解度為0.02g/100g H2O。

2、標(biāo)定EDTA標(biāo)準(zhǔn)溶液的工作基準(zhǔn)試劑，基準(zhǔn)試劑的預(yù)處理：稱量前一般應(yīng)先用稀鹽酸洗去氧化層，然后用水洗凈，烘干。

配制步驟：

1、取適量鋅片放在100mL燒杯中，用0.1mol·L-1 HCl溶液（自配）清洗1min，再用自來水、純水洗凈，烘干、冷卻。

2、用直接稱量法在干燥小燒杯中準(zhǔn)確稱取0.15～0.2g Zn，蓋好小表面皿。

3、用滴管從燒杯口加入5mL 1:1 鹽酸，待Zn溶解后吹洗表面皿、杯壁，小心地將溶液轉(zhuǎn)移至250mL容量瓶中，用純水稀釋至標(biāo)線，搖勻。

 

 

實(shí)驗(yàn)方法與判定：

1.對照品溶液的穩(wěn)定性

2.對照品溶液的配制：精密量取腦對照品適量，加無水乙醇制成每1ml含腦1mg的溶液，作為對照品溶液。

3.色譜條件：以交聯(lián)鍵合聚乙二醇為固定相的毛細(xì)管柱；柱溫120℃；進(jìn)樣口溫度250℃；檢測器溫度250℃；分流進(jìn)樣，分流比10:1。理論塔板數(shù)按腦計(jì)算應(yīng)不低于10000。

4.實(shí)驗(yàn)方法：配制的對照品溶液，一份置冷處保存，一份置室溫中保存，在第1、3、7、10、15天重新配制一份對照品溶液，三種儲(chǔ)備液同時(shí)稀釋制成每1ml中約含50ug的溶液。照氣相色譜法，并依據(jù)新對照品的峰面積計(jì)算原對照品溶液的含量。記錄下來，保證原對照品溶液含量在考察期相對平均偏差不超過2.0%，驗(yàn)證對照品溶液在使用期內(nèi)穩(wěn)定可靠。

使用方法：

1.  常用篩選濃度

注意：用來篩選穩(wěn)轉(zhuǎn)株的工作濃度需要根據(jù)細(xì)胞類型，培養(yǎng)基，生長條件和細(xì)胞代謝率而變化，推薦使用濃度為50-1000μg/mL。對于第一次使用的實(shí)驗(yàn)體系建議通過建立殺滅曲線（kill curve），即劑量反應(yīng)性曲線，來確定最佳篩選濃度。

一般而言，哺乳動(dòng)物細(xì)胞50-500μg/mL；細(xì)菌/植物細(xì)胞20-200μg/mL；真菌300-1000μg/mL。

2. 殺滅曲線的建立

注意：為了篩選得到穩(wěn)定表達(dá)目的蛋白的細(xì)胞株，需要確定能夠殺死未轉(zhuǎn)染宿主細(xì)胞的抗生素濃度，可通過建立殺滅曲線（劑量反應(yīng)曲線）來實(shí)現(xiàn)，至少選擇5個(gè)濃度。

1）  第一天：未轉(zhuǎn)化的細(xì)胞按照20-25%的細(xì)胞密度鋪在合適的培養(yǎng)板上，37℃，CO2培養(yǎng)過夜；注：對于需要更高密度來檢測活力的細(xì)胞，可增加接種量。

2）  根據(jù)細(xì)胞類型，設(shè)定合適范圍內(nèi)的濃度梯度。以哺乳動(dòng)物細(xì)胞為例，可設(shè)定50，100，250，500，750，1000μg/mL。先用去離子水或者PBS buffer按照1:10的比例將母液稀釋到5 mg/ml，然后按照下表稀釋到相應(yīng)濃度的工作液。

3）  第二天：替換舊的培養(yǎng)基，換用新鮮配制的含有相應(yīng)濃度藥物的培養(yǎng)基。每個(gè)濃度做三個(gè)平行孔。

4）  接下來每3-4天更換新的含藥物培養(yǎng)基。

5）  按照固定的周期（如每2天）進(jìn)行活細(xì)胞計(jì)數(shù)來確定阻止未轉(zhuǎn)染細(xì)胞生長的恰當(dāng)濃度。選擇在理想的天數(shù)（通常是7-10天）內(nèi)能夠殺死絕大多數(shù)細(xì)胞的濃度為穩(wěn)定轉(zhuǎn)染細(xì)胞篩選用的工作濃度。

3.   穩(wěn)定轉(zhuǎn)染細(xì)胞的篩選

1）  轉(zhuǎn)染48h后，用含有適當(dāng)濃度的潮霉素B篩選培養(yǎng)基來傳代細(xì)胞（直接傳代或者稀釋后傳代）。

注意：細(xì)胞處于活躍分裂狀態(tài)時(shí)抗生素的殺傷。則當(dāng)細(xì)胞過于稠密，其效率會(huì)降低。為了得到較好的篩選效果，最好將細(xì)胞稀釋至豐度不超過25%

2）  每隔3-4天更換含有藥物的篩選培養(yǎng)液。

3）  篩選7天后觀察并評估細(xì)胞克?。洌┑男纬汕闆r。集落的形成可能還需要一周或者更多的時(shí)間，這取決于宿主細(xì)胞類型，轉(zhuǎn)染，以及篩選效果。

4）   挑取并轉(zhuǎn)移5-10個(gè)抗性克隆于35mm細(xì)胞培養(yǎng)板，繼續(xù)用含藥物的篩選培養(yǎng)液維持培養(yǎng)7天。

5）   之后更換正常培養(yǎng)基培養(yǎng)即可。

白布勒擔(dān)孢酵母有絲分裂驅(qū)動(dòng)蛋白樣2抗體Human SOX18(Transcription factor SOX-18) ELISA Kit可溶性轉(zhuǎn)鐵蛋白受體(sTfR)

芽胞桿菌屬微原纖維膠原相關(guān)蛋白1抗體Human HEPH(Hephaestin) ELISA Kit可溶性腫瘤壞死因子樣凋亡弱誘導(dǎo)因(sTweak)

嗜乳桿菌減數(shù)分裂核分裂蛋白1抗體Human SPON2(Spondin-2) ELISA Kit可溶性腫瘤壞死因子相關(guān)凋亡誘導(dǎo)配體(sTRAIL)

彩色豆馬勃肌原調(diào)節(jié)抑制蛋白抗體Human C1QC(Complement C1q subcomponent subunit C) ELISA Kit可溶性腫瘤壞死因子受體2(sTNF-R2)

游動(dòng)球菌雙微體2癌基因結(jié)合蛋白抗體Human SIRT4(NAD-dependent ADP-ribosyltransferase sirtuin-4) ELISA Kit可溶性腫瘤壞死因子α受體(sTNFαR)

小粒凱斯特亞菌基質(zhì)金屬蛋白20Human GDF11(Growth/differentiation factor 11) ELISA Kit可溶性粘附分子(Sam)

Patulibacter americanus多藥耐藥相關(guān)蛋白8抗體Human FABP5(Fatty acid-binding protein, epidermal) ELISA Kit可溶性血小板內(nèi)皮粘附分子1(sPECAM-1/sCD31)

大肥菇多藥耐藥相關(guān)蛋白7抗體Human PFN2(Profilin-2) ELISA Kit可溶性血纖蛋白單體復(fù)合物(SFMC)

卷枝毛霉卷枝變型磷化波西氏肉瘤皰疹病潛伏核抗原相互作用蛋白1抗體Human NCOR1(Nuclear receptor corepressor 1) ELISA Kit可溶性血管內(nèi)皮粘附分子1(sVCAM-1)

解淀粉芽孢桿菌酪蛋白激分裂抗體Human NDN(Necdin) ELISA Kit可溶性血管內(nèi)皮蛋白C受體(sEPCR)

大豆慢生根瘤菌波西氏肉瘤皰疹病潛伏核抗原相互作用蛋白1抗體Human IL31RA(Interleukin-31 receptor subunit alpha) ELISA Kit可溶性血管內(nèi)皮生長因子受體2(VEGFR-2/sFLK-1)

黏連環(huán)紋炭團(tuán)菌黑色瘤抗原F蛋白家族1抗體Human S1PR5(Sphingosine 1-phosphate receptor 5) ELISA Kit可溶性血管內(nèi)皮生長因子受體1(sVEGF R1)

香菇糖蛋白GNTVA抗體Human HNRNPK(Heterogeneous nuclear ribonucleoprotein K) ELISA Kit可溶性胸苷激1(TK1)

球形賴芽孢桿菌IGFBP2結(jié)合蛋白/遷移和侵潤抑制蛋白抗體Human ANXA3(Annexin A3) ELISA Kit可溶性腺苷環(huán)化(sAC)

豬丹絲菌微管相關(guān)蛋白1B抗體Human ANXA1(Annexin A1) ELISA Kit可溶性因子受體(sCKR)

多主枝孢錯(cuò)配修復(fù)蛋白3抗體Human NCOR2(Nuclear receptor corepressor 2) ELISA Kit可溶性間粘附分子1(sICAM-1)

肺炎克雷伯氏菌Klebsiella│pneumoniae 質(zhì)量規(guī)格：活1:2500,BR元

芽孢桿菌Bacillus│sp. 質(zhì)量規(guī)格：活1:4500,BR秋仙堿

: AS2.247資源名稱: 粟酒裂殖酵母 質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR金雀花堿
核酸預(yù)雜交液AQP-2(Mouse Aquaporin 2) ELISA Kit  小鼠水通道蛋白2規(guī)格： 48T

TG(Mouse Thyroglobulin) ELISA Kit  小鼠jia狀腺球蛋白規(guī)格： 48T

INH-A(Mouse Inhibin) ELISA Kit  小鼠抑制suA規(guī)格： 48T

Beta-CG(Mouse Chorionic Gonadotrophin Beta) ELISA Kit  小鼠絨毛膜促性腺激suβ規(guī)格： 48T

SHBG(Mouse sex hormone-binding globulin) ELISA Kit  小鼠性激su結(jié)合球蛋白規(guī)格： 48T