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微量BCA蛋白定量試劑盒

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更新時間:2022-08-30 12:17:57瀏覽次數(shù):482

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產(chǎn)品簡介

供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 250T
貨號 FS-R7545 應用領域 化工
主要用途 僅供科研 貨號 FS-R7545
微量BCA蛋白定量試劑盒公司正在銷售的產(chǎn)品:Bacillus flexus人激肽釋放酶6
Bacillus fusiformis人果糖1,6二磷酸縮酶
Bacillus globigii人組織蛋白酶D
Bacillus gibsonii人敏感性脂肪酶
Bacillus fusiformis人胰激肽原酶
Bacillus globigii人烏頭酸酶2
Bacillus globigii人26S蛋白酶

詳細介紹

產(chǎn)品分類:蛋白檢測

儲存條件:室溫,避光,12個月

用途:總蛋白定量的二喹啉甲酸/BCA微量分析

注意事項:主用用于微量蛋白質(zhì)的檢測,主要由BCA溶液BSA標準品組成,在562nm處測吸光值,檢測范圍在2.5-200ug/ml。

公司產(chǎn)品僅用于科研具有質(zhì)量可靠、效果穩(wěn)定、靈敏度高、操作簡單、易保存等特點,咨詢并訂購!

產(chǎn)品名稱

規(guī)格

貨號

微量BCA蛋白定量試劑盒

250T

FS-R7545

 

63.jpg 

 

配制與標定的實驗原理:

1、用EDTA二鈉鹽配制EDTA標準溶液的原因;

EDTA是四元酸,是一種白色晶體粉末,常用H4Y表示,溶解度很小,室溫溶解度為0.02g/100g H2O。

2、標定EDTA標準溶液的工作基準試劑,基準試劑的預處理:稱量前一般應先用稀鹽酸洗去氧化層,然后用水洗凈,烘干。

配制步驟:

1、取適量鋅片放在100mL燒杯中,用0.1mol·L-1 HCl溶液(自配)清洗1min,再用自來水、純水洗凈,烘干、冷卻。

2、用直接稱量法在干燥小燒杯中準確稱取0.15~0.2g Zn,蓋好小表面皿。

3、用滴管從燒杯口加入5mL 1:1 鹽酸,待Zn溶解后吹洗表面皿、杯壁,小心地將溶液轉移至250mL容量瓶中,用純水稀釋至標線,搖勻。

13.jpg 

 

實驗方法與判定:

1.對照品溶液的穩(wěn)定性

2.對照品溶液的配制:精密量取腦對照品適量,加無水乙醇制成每1ml含腦1mg的溶液,作為對照品溶液。

3.色譜條件:以交聯(lián)鍵合聚乙二醇為固定相的毛細管柱;柱溫120℃;進樣口溫度250℃;檢測器溫度250℃;分流進樣,分流比10:1。理論塔板數(shù)按腦計算應不低于10000。

4.實驗方法:配制的對照品溶液,一份置冷處保存,一份置室溫中保存,在第1、3、7、10、15天重新配制一份對照品溶液,三種儲備液同時稀釋制成每1ml中約含50ug的溶液。照氣相色譜法,并依據(jù)新對照品的峰面積計算原對照品溶液的含量。記錄下來,保證原對照品溶液含量在考察期相對平均偏差不超過2.0%,驗證對照品溶液在使用期內(nèi)穩(wěn)定可靠。

使用方法:

1.  常用篩選濃度

注意:用來篩選穩(wěn)轉株的工作濃度需要根據(jù)細胞類型,培養(yǎng)基,生長條件和細胞代謝率而變化,推薦使用濃度為50-1000μg/mL。對于第一次使用的實驗體系建議通過建立殺滅曲線(kill curve),即劑量反應性曲線,來確定最佳篩選濃度。

一般而言,哺乳動物細胞50-500μg/mL;細菌/植物細胞20-200μg/mL;真菌300-1000μg/mL。

2. 殺滅曲線的建立

注意:為了篩選得到穩(wěn)定表達目的蛋白的細胞株,需要確定能夠殺死未轉染宿主細胞的抗生素濃度,可通過建立殺滅曲線(劑量反應曲線)來實現(xiàn),至少選擇5個濃度。

1)  第一天:未轉化的細胞按照20-25%的細胞密度鋪在合適的培養(yǎng)板上,37℃,CO2培養(yǎng)過夜;注:對于需要更高密度來檢測活力的細胞,可增加接種量。

2)  根據(jù)細胞類型,設定合適范圍內(nèi)的濃度梯度。以哺乳動物細胞為例,可設定50,100,250,500,750,1000μg/mL。先用去離子水或者PBS buffer按照1:10的比例將母液稀釋到5 mg/ml,然后按照下表稀釋到相應濃度的工作液。

3)  第二天:替換舊的培養(yǎng)基,換用新鮮配制的含有相應濃度藥物的培養(yǎng)基。每個濃度做三個平行孔。

4)  接下來每3-4天更換新的含藥物培養(yǎng)基。

5)  按照固定的周期(如每2天)進行活細胞計數(shù)來確定阻止未轉染細胞生長的恰當濃度。選擇在理想的天數(shù)(通常是7-10天)內(nèi)能夠殺死絕大多數(shù)細胞的濃度為穩(wěn)定轉染細胞篩選用的工作濃度。

3.   穩(wěn)定轉染細胞的篩選

1)  轉染48h后,用含有適當濃度的潮霉素B篩選培養(yǎng)基來傳代細胞(直接傳代或者稀釋后傳代)。

注意:細胞處于活躍分裂狀態(tài)時抗生素的殺傷。則當細胞過于稠密,其效率會降低。為了得到較好的篩選效果,最好將細胞稀釋至豐度不超過25%

2)  每隔3-4天更換含有藥物的篩選培養(yǎng)液。

3)  篩選7天后觀察并評估細胞克?。洌┑男纬汕闆r。集落的形成可能還需要一周或者更多的時間,這取決于宿主細胞類型,轉染,以及篩選效果。

4)   挑取并轉移5-10個抗性克隆于35mm細胞培養(yǎng)板,繼續(xù)用含藥物的篩選培養(yǎng)液維持培養(yǎng)7天。

5)   之后更換正常培養(yǎng)基培養(yǎng)即可。

Acinetobacter soli Kim et al. 鋅指轉錄蛋白Sall1抗體Anti-GH1 Antibody腺苷A2b受體(ADORA2b)

擬枝孢鐮孢鋅指轉錄蛋白Sall4抗體Anti-GFRA1 Antibody腺苷A2a受體(ADORA2a)

魯考弗奇酵母轉錄因子SOX17抗體Anti-GH1 Antibody線粒體轉錄因子A(TFAM)

蜥蜴纖細芽孢桿菌溴化太林相關蛋白2抗體Anti-GH1 Antibody線粒體乙脫氫(ALDM)

濕鏈霉菌S100鈣結合蛋白A8抗體Anti-GHR Antibody線粒體外膜轉位70A(TOMM70A)

黃曲霉唾液結合性免疫球蛋白樣凝集抗體Anti-GILT/IFI30 Antibody線粒體鐵蛋白(MFRN)

冷溫木克酵母唾液結合性免疫球蛋白樣凝集1抗體Anti-GHR Antibody線粒體鐵蛋白(FTMT)

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香菇轉錄因子SP6抗體Anti-GIP Antibody線粒體融合1(MFN1)

PaenibacillusSPOP蛋白抗體Anti-GIP Antibody線粒體解偶聯(lián)蛋白2(UCP2)

污黑腐皮殼鈉離子/?;悄懝厕D運蛋白抗體Anti-GJA1 Antibody線粒體解偶聯(lián)蛋白1(UCP1)

糖化酵母生長抑14抗體Anti-GJA4 Antibody線粒體肌激1B(CKMT1B)

根白蟻傘碳氫鈉協(xié)同轉運蛋白4-A4抗體Anti-GJA3 Antibody線粒體肌激1A(CKMT1A)

匍枝根霉原變種肺表面活性蛋白D抗體Anti-GJA1 Antibody線粒體甘油-3-磷?;D移(GPAM)

斷裂諾氏菌血影蛋白A鏈紅型抗體Anti-GJB1 Antibody線粒體超氧化物歧化(SOD2)

蕈狀芽孢桿菌分選連接蛋白5抗體Anti-GJA5 Antibody線粒體GTP1(MTG1)

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鯊烯環(huán)氧抗體休哈塔假絲酵母休哈塔亞種人直腸平滑肌細胞

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同源轉錄調(diào)節(jié)蛋白Sin3A抗體長枝木霉人結腸平滑肌細胞
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