詳細介紹
參數(shù)規(guī)格:
產(chǎn)品名稱:DiD三氟甲磺酸鹽
貨號:FSP184
產(chǎn)品規(guī)格:10 mg
分類:熒光核酸試劑
儲存條件:-20℃避光保存,避免反復凍融。
運輸:低溫、避光,快遞免費送貨上門。
產(chǎn)品特點:
產(chǎn)品僅用于科研本產(chǎn)品就是根據(jù)保守區(qū)設計引物而開發(fā)的高靈敏 PCR檢測試劑盒 。
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儲存條件:
14℃或-20℃樣品收集、處理及保存方法
1. 血清:使用不含熱原和內毒素的試管,操作過程中避免任何細胞刺激,收集血液后,3000 轉離心10 分鐘將血清和紅細胞迅速小心地分離。
2. 血漿:EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000 轉離心30 分鐘取上清。
3. 細胞上清液:3000 轉離心10 分鐘去除顆粒和聚合物。
4. 組織勻漿:將組織加入適量生理鹽水搗碎。3000 轉離心10 分鐘取上清。
5. 保存:如果樣本收集后不及時檢測,請按一次用量分裝,凍存于-20℃,避免反復凍融,在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
探針法:
aqMan 探針是一種寡核苷酸探針,它的熒光與目的序列的擴增相關。它與目標序列上游引物和下游引物之間的序列配對。熒光基團連接在探針的5’ 末端,而淬滅劑則在3’ 末端。當完整的探針與目標序列配對時,熒光基團發(fā)射的熒光因與3’ 端的淬滅劑接近而被淬滅。但在進行延伸反應時,聚合酶的5’ 外切酶活性將探針進行酶切,使得熒光基團與淬滅劑分離。隨著擴增循環(huán)數(shù)的增加,釋放出來的熒光基團不斷積累。因此熒光強度與擴增產(chǎn)物的數(shù)量呈正比關系。相對于染料法,Taqman探針法具有更高的特異性和準確性。
PCR實驗方法步驟:
方法
1:在冰浴中,按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2:調整好反應程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴增。一般:在93℃預變性3-5min,進入循環(huán)擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保7min。
3:伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結束反應,PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4:PCR的電泳檢測:如在反應管中加有石蠟油,需用100μl進行抽提反應混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
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DiD三氟甲磺酸鹽Pleurotus│eryngii分離基物: 腐朽木斜面培養(yǎng)物安全等級: 1模式菌株: no應用領域: 食用菌培養(yǎng)基: 17生長條件: 20℃存儲條件: 定期移植法
Sporobolomyces│beijingensis分離基物: Athyrium kusnezoffii凍干物安全等級: 1模式菌株: no培養(yǎng)基: 0013生長條件: 17℃存儲條件: 液氮超低溫凍結法;真空冷凍干燥法
Saccharomyces│cerevisiae凍干物安全等級: 1模式菌株: no應用領域: 肥料培養(yǎng)基: 0013生長條件: 26℃存儲條件: 液氮超低溫凍結法;真空冷凍干燥法
解淀粉類芽孢桿菌種屬: Paenibacillus│amylolyticus分離基物: 土壤凍干物安全等級: 1模式菌株: yes應用領域: 模式菌株培養(yǎng)基: 0002生長條件: 30℃存儲條件: 液氮超低溫凍結法;真空冷凍干燥法
Pseudomonas│aeruginosa凍干物安全等級: 2模式菌株: no培養(yǎng)基: CM0002生長條件: 37℃存儲條件: -80℃冰箱凍結法;真空冷凍干燥法
季也蒙畢赤酵母種屬: Pichia│guilliermondii凍干物安全等級: 1模式菌株: no培養(yǎng)基: 0013生長條件: 25-28℃存儲條件: 液氮超低溫凍結法;真空冷凍干燥法
Rhodosporidium│sphaerocarpum分離基物: 水樣/海水斜面培養(yǎng)物安全等級: 1模式菌株: no應用領域: 近海酵母培養(yǎng)基: 513生長條件: 28℃存儲條件: 液氮超低溫凍結法;-80℃冰箱凍結法
谷氨酸棒桿菌種屬: Corynebacterium│glutamicum凍干物安全等級: 1模式菌株: no應用領域: 產(chǎn)L-色氨酸。培養(yǎng)基: CM0002生長條件: 28℃存儲條件: 真空冷凍干燥法
Sulfolobus│islandicus凍干物安全等級: 1模式菌株: no應用領域: 在古菌內表達GST-PCNA3培養(yǎng)基: 453生長條件: 80℃存儲條件: 真空冷凍干燥法;定期移植法
操作程序:
產(chǎn)品僅用于科研由您提供該實驗中目的基因的相關資料(如:基因名稱、序列等信息),我們共同探討服務的可能性和技術路線;
商定服務收費、付款方式、服務期限等,并簽定技術服務合同。
有您提供實驗所需的足夠量的實驗樣本(100mg組織或107個細胞),本公司不接受您提供的RNA樣本PCR所需引物/探針(如果用探針法),可以由您自己提供,也可以委托本公司設計合成(費用另計)。如果由您自己提供,必須是PAGE純化的高質量的干粉,本公司不接受已溶解的引物/探針。
我們進行RNA抽提、RNA定量、反轉錄、Real-time PCR擴增、數(shù)據(jù)分析。
提供實驗報告,包括實驗過程、所用儀器試劑、擴增曲線、標準曲線和相關分析數(shù)據(jù)等。