詳細介紹
公司產(chǎn)品僅用于科研具有質(zhì)量可靠、效果穩(wěn)定、靈敏度高、操作簡單、易保存等特點,咨詢并訂購!
產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 貨號 |
甲基藍水溶液 | 100ml | FS-R7139 |
產(chǎn)品分類:染色其他
儲存條件:室溫,避光,12個月
用途:原生動物、細菌、神經(jīng)細胞染色,偶爾作為抑菌劑。
注意事項:去離子水配制
配制與標定的實驗原理:
1、用EDTA二鈉鹽配制EDTA標準溶液的原因;
EDTA是四元酸,是一種白色晶體粉末,常用H4Y表示,溶解度很小,室溫溶解度為0.02g/100g H2O。
2、標定EDTA標準溶液的工作基準試劑,基準試劑的預處理:稱量前一般應先用稀鹽酸洗去氧化層,然后用水洗凈,烘干。
配制步驟:
1、取適量鋅片放在100mL燒杯中,用0.1mol·L-1 HCl溶液(自配)清洗1min,再用自來水、純水洗凈,烘干、冷卻。
2、用直接稱量法在干燥小燒杯中準確稱取0.15~0.2g Zn,蓋好小表面皿。
3、用滴管從燒杯口加入5mL 1:1 鹽酸,待Zn溶解后吹洗表面皿、杯壁,小心地將溶液轉(zhuǎn)移至250mL容量瓶中,用純水稀釋至標線,搖勻。
實驗方法與判定:
1.對照品溶液的穩(wěn)定性
2.對照品溶液的配制:精密量取腦對照品適量,加無水乙醇制成每1ml含腦1mg的溶液,作為對照品溶液。
3.色譜條件:以交聯(lián)鍵合聚乙二醇為固定相的毛細管柱;柱溫120℃;進樣口溫度250℃;檢測器溫度250℃;分流進樣,分流比10:1。理論塔板數(shù)按腦計算應不低于10000。
4.實驗方法:配制的對照品溶液,一份置冷處保存,一份置室溫中保存,在第1、3、7、10、15天重新配制一份對照品溶液,三種儲備液同時稀釋制成每1ml中約含50ug的溶液。照氣相色譜法,并依據(jù)新對照品的峰面積計算原對照品溶液的含量。記錄下來,保證原對照品溶液含量在考察期相對平均偏差不超過2.0%,驗證對照品溶液在使用期內(nèi)穩(wěn)定可靠。
硫磺菌雙特異性蛋白磷10抗體Human STARD13 (StAR-related lipid transfer protein 13) ELISA KIT人白介8(IL-8/CXCL8)自身抗體免疫試劑盒
根瘤菌雙特異性蛋白磷5抗體Human STATH (Statherin) ELISA KIT人白介8(IL-8/CXCL8)免疫試劑盒
Leminorella richardii磷化動力蛋白1抗體Human CERK(Ceramide kinase) ELISA Kit人白介7(IL-7)免疫試劑盒
硝孢鏈霉菌動力蛋白1抗體Human SYNRG (Synergin gamma) ELISA KIT人白介6受體(IL-6R)免疫試劑盒
色串孢屬磷化動力蛋白1抗體Human SRD5A2 (3-oxo-5-alpha-steroid 4-dehydrogenase 2) ELISA KIT人白介6(IL-6)免疫試劑盒
噬古丁節(jié)桿菌腦啡肽A抗體Human SLBP (Histone RNA hairpin-binding protein) ELISA KIT人白介5受體alpha(IL5RA)免疫試劑盒
直立枝孢強直性肌營養(yǎng)不良相關蛋白9抗體Human SGPP2 (Sphingosine-1-phosphate phosphatase 2) ELISA KIT人白介5(IL-5)免疫試劑盒
釀酒酵母DYX1C1蛋白抗體Human SUCNR1 (Succinate receptor 1) ELISA KIT人白介4受體(IL4R/CD124)免疫試劑盒
柴油食烷菌E3泛蛋白連接dzip3抗體Human SRSF7 (Serine/arginine-rich splicing factor 7) ELISA KIT人白介4(IL-4)免疫試劑盒
蕈狀芽孢桿菌三磷腺苷依賴解旋DDX23抗體Human FCGRT(IgG receptor FcRn large subunit p51) ELISA Kit人白介37(IL-37)免疫試劑盒
茫崖諾氏菌多能發(fā)育相關基因5抗體Human SI (Sucrase-isomaltase, intestinal) ELISA KIT人白介35(IL-35)免疫試劑盒
泡盛曲霉三磷腺苷依賴解旋DDX3抗體Human SREK1 (Splicing regulatory glutamine/lysine-rich protein 1) ELISA KIT人白介33(IL-33)免疫試劑盒
假芽胞桿菌屬磷化三磷腺苷依賴解旋DDX3抗體Human GGT1(Gamma-glutamyltranspeptidase 1) ELISA Kit人白介32(IL-32)免疫試劑盒
廣島鏈霉菌迪格弗-梅爾基爾-克勞森綜合征相關蛋白抗體Human SULF1(Extracellular sulfatase Sulf-1) ELISA Kit人白介31(IL-31)免疫試劑盒
天目山類芽孢桿菌雙氧化激活因子2抗體Human SHFM1 (26S proteasome complex subunit DSS1) ELISA KIT人白介3(IL-3)免疫試劑盒
邊緣假單胞菌RNA結合泛連接DZIP3抗體Human SVIL (Supervillin) ELISA KIT人白介2誘導的T激(ITK)免疫試劑盒
鐮孢屬Fusarium│sp. 質(zhì)量規(guī)格:500mg/L,溶劑:1%鹽山楂
蠟狀芽孢桿菌Bacillus│cereus 質(zhì)量規(guī)格:100(20℃)µg/mL,基體: 1%HNO3棕矢車菊
球孢白僵菌Beauveria│bassiana 質(zhì)量規(guī)格:1000μg/ml異芒果苷
甲基藍水溶液SE(Human staphylococcus aureus enterotoxins) ELISA Kit 人金葡jun腸毒su規(guī)格: 48T
CNX(Human calnexin) ELISA Kit 人鈣聯(lián)蛋白規(guī)格: 48T
MIS/AMH(Human Mullerian Inhibiting Substance/Mullerian hormone) ELISA Kit 人繆勒管抑制物質(zhì)/抗繆勒管激su規(guī)格: 48T
BTC(Human beta cellulin) ELISA Kit 人β細胞su規(guī)格: 48T
FETU-A(Human Fetuin A) ELISA Kit 人胎球蛋白A規(guī)格: 48T
使用方法:
1. 常用篩選濃度
注意:用來篩選穩(wěn)轉(zhuǎn)株的工作濃度需要根據(jù)細胞類型,培養(yǎng)基,生長條件和細胞代謝率而變化,推薦使用濃度為50-1000μg/mL。對于第一次使用的實驗體系建議通過建立殺滅曲線(kill curve),即劑量反應性曲線,來確定最佳篩選濃度。
一般而言,哺乳動物細胞50-500μg/mL;細菌/植物細胞20-200μg/mL;真菌300-1000μg/mL。
2. 殺滅曲線的建立
注意:為了篩選得到穩(wěn)定表達目的蛋白的細胞株,需要確定能夠殺死未轉(zhuǎn)染宿主細胞的抗生素濃度,可通過建立殺滅曲線(劑量反應曲線)來實現(xiàn),至少選擇5個濃度。
1) 第一天:未轉(zhuǎn)化的細胞按照20-25%的細胞密度鋪在合適的培養(yǎng)板上,37℃,CO2培養(yǎng)過夜;注:對于需要更高密度來檢測活力的細胞,可增加接種量。
2) 根據(jù)細胞類型,設定合適范圍內(nèi)的濃度梯度。以哺乳動物細胞為例,可設定50,100,250,500,750,1000μg/mL。先用去離子水或者PBS buffer按照1:10的比例將母液稀釋到5 mg/ml,然后按照下表稀釋到相應濃度的工作液。
3) 第二天:替換舊的培養(yǎng)基,換用新鮮配制的含有相應濃度藥物的培養(yǎng)基。每個濃度做三個平行孔。
4) 接下來每3-4天更換新的含藥物培養(yǎng)基。
5) 按照固定的周期(如每2天)進行活細胞計數(shù)來確定阻止未轉(zhuǎn)染細胞生長的恰當濃度。選擇在理想的天數(shù)(通常是7-10天)內(nèi)能夠殺死絕大多數(shù)細胞的濃度為穩(wěn)定轉(zhuǎn)染細胞篩選用的工作濃度。
3. 穩(wěn)定轉(zhuǎn)染細胞的篩選
1) 轉(zhuǎn)染48h后,用含有適當濃度的潮霉素B篩選培養(yǎng)基來傳代細胞(直接傳代或者稀釋后傳代)。
注意:細胞處于活躍分裂狀態(tài)時抗生素的殺傷。則當細胞過于稠密,其效率會降低。為了得到較好的篩選效果,最好將細胞稀釋至豐度不超過25%
2) 每隔3-4天更換含有藥物的篩選培養(yǎng)液。
3) 篩選7天后觀察并評估細胞克隆(集落)的形成情況。集落的形成可能還需要一周或者更多的時間,這取決于宿主細胞類型,轉(zhuǎn)染,以及篩選效果。
4) 挑取并轉(zhuǎn)移5-10個抗性克隆于35mm細胞培養(yǎng)板,繼續(xù)用含藥物的篩選培養(yǎng)液維持培養(yǎng)7天。
5) 之后更換正常培養(yǎng)基培養(yǎng)即可。