藻類保色液Ⅰ公司正在銷售的產(chǎn)品：綿羊組織蛋白酶L(CTSL)試劑盒 Anti-FGF18 Antibody成纖維生長因子受體2抗原
綿羊雌受體β(ERβ)試劑盒 Anti-FGF18 Antibody成纖維生長因子-8/纖維母生長因子-8 (抗原)
綿羊脫氫表雄酮硫酸酯(DHEA-S)試劑盒 Anti-FGFP2 Antibody谷脫羧酶-65(C端多肽)
綿羊粘蛋白4(MUC4)試劑盒Anti

公司產(chǎn)品僅用于科研具有質(zhì)量可靠、效果穩(wěn)定、靈敏度高、操作簡單、易保存等特點(diǎn)，咨詢并訂購！

產(chǎn)品分類：植物染色

儲(chǔ)存條件：室溫,12個(gè)月

用途：用于除綠藻外的其他藻類的保色保存。

注意事項(xiàng)：主要由明礬、甘油等組成。

 

 

配制與標(biāo)定的實(shí)驗(yàn)原理：

1、用EDTA二鈉鹽配制EDTA標(biāo)準(zhǔn)溶液的原因；

EDTA是四元酸，是一種白色晶體粉末，常用H4Y表示，溶解度很小，室溫溶解度為0.02g/100g H2O。

2、標(biāo)定EDTA標(biāo)準(zhǔn)溶液的工作基準(zhǔn)試劑，基準(zhǔn)試劑的預(yù)處理：稱量前一般應(yīng)先用稀鹽酸洗去氧化層，然后用水洗凈，烘干。

配制步驟：

1、取適量鋅片放在100mL燒杯中，用0.1mol·L-1 HCl溶液（自配）清洗1min，再用自來水、純水洗凈，烘干、冷卻。

2、用直接稱量法在干燥小燒杯中準(zhǔn)確稱取0.15～0.2g Zn，蓋好小表面皿。

3、用滴管從燒杯口加入5mL 1:1 鹽酸，待Zn溶解后吹洗表面皿、杯壁，小心地將溶液轉(zhuǎn)移至250mL容量瓶中，用純水稀釋至標(biāo)線，搖勻。

 

 

實(shí)驗(yàn)方法與判定：

1.對照品溶液的穩(wěn)定性

2.對照品溶液的配制：精密量取腦對照品適量，加無水乙醇制成每1ml含腦1mg的溶液，作為對照品溶液。

3.色譜條件：以交聯(lián)鍵合聚乙二醇為固定相的毛細(xì)管柱；柱溫120℃；進(jìn)樣口溫度250℃；檢測器溫度250℃；分流進(jìn)樣，分流比10:1。理論塔板數(shù)按腦計(jì)算應(yīng)不低于10000。

4.實(shí)驗(yàn)方法：配制的對照品溶液，一份置冷處保存，一份置室溫中保存，在第1、3、7、10、15天重新配制一份對照品溶液，三種儲(chǔ)備液同時(shí)稀釋制成每1ml中約含50ug的溶液。照氣相色譜法，并依據(jù)新對照品的峰面積計(jì)算原對照品溶液的含量。記錄下來，保證原對照品溶液含量在考察期相對平均偏差不超過2.0%，驗(yàn)證對照品溶液在使用期內(nèi)穩(wěn)定可靠。

白淺灰鏈霉菌分裂周期蛋白16抗體Human UCP1(Mitochondrial brown fat uncoupling protein 1) ELISA Kit人肌酐(Cr)免疫試劑盒

花園芽孢桿菌有絲分裂著絲粒蛋白F抗體Human COQ10B(Coenzyme Q-binding protein COQ10 homolog B, mitochondrial) ELISA Kit人饑餓激(GHRL)免疫試劑盒

蘇云金芽胞桿菌松蠋亞種9號染色體開放閱讀框115抗體Human QPCTL(Glutaminyl-peptide cyclotransferase-like protein) ELISA Kit人活性氧(ROS)免疫試劑盒

產(chǎn)黃青霉CTDSPL蛋白抗體Human UNC13C(Protein unc-13 homolog C) ELISA Kit人活化受體樣激1(ALK1)免疫試劑盒

草木樨中華根瘤菌CTDSPL2蛋白抗體Human CFB(Complement factor B) ELISA Kit人活化A(ACV-A)免疫試劑盒

黑曲霉乙酰酯相關(guān)蛋白抗體Human ZBED3(Zinc finger BED domain-containing protein 3) ELISA Kit人活化X(FXa)免疫試劑盒

淡紫擬青霉卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白83抗體Human NR1H3(Oxysterols receptor LXR-alpha) ELISA Kit人活化Ⅻ(FⅫa)免疫試劑盒

大腸埃希菌二氫嘧啶相關(guān)蛋白5抗體Human ZBED3(Zinc finger BED domain-containing protein 3) ELISA Kit人活化蛋白C(APC)免疫試劑盒

細(xì)鏈格孢磷化二氫嘧啶樣2抗體Human APOD(Apolipoprotein D) ELISA Kit人混合系列蛋白激樣結(jié)構(gòu)域(MLKL)免疫試劑盒

虎皮粘蓋牛肝菌腦衰蛋白反應(yīng)調(diào)節(jié)蛋白4抗體Human CXCR4(C-X-C chemokine receptor type 4) ELISA Kit人混合淋巴反應(yīng)封閉因子(MLR-Bf)免疫試劑盒

枯草芽孢桿菌卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白87抗體Human AMY2(Amylase Alpha 2, Pancreatic) ELISA Kit人蛔蟲抗體(IgM)免疫試劑盒

松針散斑殼卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白92抗體Human DNMT1(DNA(cytosine-5)-methyltransferase 1) ELISA Kit人黃體生成(LH)免疫試劑盒

枯草芽孢桿菌卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白CHCHD8抗體Human GREM1(Gremlin-1) ELISA Kit人氧化(XOD)免疫試劑盒

大腸埃希氏菌大腦亮鏈結(jié)構(gòu)域蛋白抗體Human TERT(omerase reverse transcriptase) ELISA Kit人(cAMP)免疫試劑盒

嚙蝕艾肯氏菌卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白93抗體Human IL17B(Interleukin-17B) ELISA Kit人環(huán)磷鳥苷(cGMP)免疫試劑盒

星孢鏈霉菌卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白96抗體Human TLN1(Talin-1) ELISA Kit人環(huán)加氧2(COX-2)免疫試劑盒

型副傷寒沙門菌Salmonella│paratyphi A 質(zhì)量規(guī)格：指示劑級紫萁

假交替單胞菌Pseudoalteromonas│sp. 質(zhì)量規(guī)格：分析標(biāo)準(zhǔn)品,99.96%漿苦味L

: HBUM73202資源名稱: 鏈霉菌 質(zhì)量規(guī)格：IND相思子堿
藻類保色液Ⅰhs-CRP(Human high sensitivity C-Reactive Protein) ELISA Kit  人超敏C反應(yīng)蛋白規(guī)格： 48T

Tn- I (Human Troponin I ) ELISA Kit  人肌鈣蛋白Ⅰ規(guī)格： 48T

SAA(Human Serum amyloid A) ELISA Kit  人血清淀粉樣蛋白A規(guī)格： 48T

Hsp-60(Human Heat Shock Protein 60) ELISA Kit  人熱休克蛋白60規(guī)格： 48T

HSP gp96(Human Heat Shock Protein glycoprotein 96) ELISA Kit  人熱休克蛋白糖蛋白96規(guī)格： 48T

使用方法：

1.  常用篩選濃度

注意：用來篩選穩(wěn)轉(zhuǎn)株的工作濃度需要根據(jù)細(xì)胞類型，培養(yǎng)基，生長條件和細(xì)胞代謝率而變化，推薦使用濃度為50-1000μg/mL。對于第一次使用的實(shí)驗(yàn)體系建議通過建立殺滅曲線（kill curve），即劑量反應(yīng)性曲線，來確定最佳篩選濃度。

一般而言，哺乳動(dòng)物細(xì)胞50-500μg/mL；細(xì)菌/植物細(xì)胞20-200μg/mL；真菌300-1000μg/mL。

2. 殺滅曲線的建立

注意：為了篩選得到穩(wěn)定表達(dá)目的蛋白的細(xì)胞株，需要確定能夠殺死未轉(zhuǎn)染宿主細(xì)胞的抗生素濃度，可通過建立殺滅曲線（劑量反應(yīng)曲線）來實(shí)現(xiàn)，至少選擇5個(gè)濃度。

1）  第一天：未轉(zhuǎn)化的細(xì)胞按照20-25%的細(xì)胞密度鋪在合適的培養(yǎng)板上，37℃，CO2培養(yǎng)過夜；注：對于需要更高密度來檢測活力的細(xì)胞，可增加接種量。

2）  根據(jù)細(xì)胞類型，設(shè)定合適范圍內(nèi)的濃度梯度。以哺乳動(dòng)物細(xì)胞為例，可設(shè)定50，100，250，500，750，1000μg/mL。先用去離子水或者PBS buffer按照1:10的比例將母液稀釋到5 mg/ml，然后按照下表稀釋到相應(yīng)濃度的工作液。

3）  第二天：替換舊的培養(yǎng)基，換用新鮮配制的含有相應(yīng)濃度藥物的培養(yǎng)基。每個(gè)濃度做三個(gè)平行孔。

4）  接下來每3-4天更換新的含藥物培養(yǎng)基。

5）  按照固定的周期（如每2天）進(jìn)行活細(xì)胞計(jì)數(shù)來確定阻止未轉(zhuǎn)染細(xì)胞生長的恰當(dāng)濃度。選擇在理想的天數(shù)（通常是7-10天）內(nèi)能夠殺死絕大多數(shù)細(xì)胞的濃度為穩(wěn)定轉(zhuǎn)染細(xì)胞篩選用的工作濃度。

3.   穩(wěn)定轉(zhuǎn)染細(xì)胞的篩選

1）  轉(zhuǎn)染48h后，用含有適當(dāng)濃度的潮霉素B篩選培養(yǎng)基來傳代細(xì)胞（直接傳代或者稀釋后傳代）。

注意：細(xì)胞處于活躍分裂狀態(tài)時(shí)抗生素的殺傷。則當(dāng)細(xì)胞過于稠密，其效率會(huì)降低。為了得到較好的篩選效果，最好將細(xì)胞稀釋至豐度不超過25%

2）  每隔3-4天更換含有藥物的篩選培養(yǎng)液。

3）  篩選7天后觀察并評估細(xì)胞克隆（集落）的形成情況。集落的形成可能還需要一周或者更多的時(shí)間，這取決于宿主細(xì)胞類型，轉(zhuǎn)染，以及篩選效果。

4）   挑取并轉(zhuǎn)移5-10個(gè)抗性克隆于35mm細(xì)胞培養(yǎng)板，繼續(xù)用含藥物的篩選培養(yǎng)液維持培養(yǎng)7天。

5）   之后更換正常培養(yǎng)基培養(yǎng)即可。