隱孢子蟲卵囊染色液公司正在銷售的產(chǎn)品：犬纖維蛋白原(Fbg) 酶聯(lián)試劑盒Anti-IRF4 Antibody熒光素Cy3標(biāo)記人血白蛋白
犬脂聯(lián)素(ADP/Acrp30)試劑盒Anti-IQGAP3 Antibody熒光素Cy3標(biāo)記胰糜蛋白酶
犬補(bǔ)體因子3(C3)酶聯(lián)試劑盒Anti-IRS1 AntibodyAlexa Fluor 555標(biāo)記羊IgG(流式同型對(duì)照)
犬轉(zhuǎn)鐵蛋白(TRF)試劑盒Ant

公司產(chǎn)品僅用于科研具有質(zhì)量可靠、效果穩(wěn)定、靈敏度高、操作簡(jiǎn)單、易保存等特點(diǎn)，咨詢并訂購(gòu)！

產(chǎn)品分類：染色其他

儲(chǔ)存條件：室溫,避光,12個(gè)月

用途：用于糞便中隱孢子蟲卵囊的染色檢查，又稱金胺-酚染色液

注意事項(xiàng)：需要用熒光顯微鏡觀察染色結(jié)果。

 

 

配制與標(biāo)定的實(shí)驗(yàn)原理：

1、用EDTA二鈉鹽配制EDTA標(biāo)準(zhǔn)溶液的原因；

EDTA是四元酸，是一種白色晶體粉末，常用H4Y表示，溶解度很小，室溫溶解度為0.02g/100g H2O。

2、標(biāo)定EDTA標(biāo)準(zhǔn)溶液的工作基準(zhǔn)試劑，基準(zhǔn)試劑的預(yù)處理：稱量前一般應(yīng)先用稀鹽酸洗去氧化層，然后用水洗凈，烘干。

配制步驟：

1、取適量鋅片放在100mL燒杯中，用0.1mol·L-1 HCl溶液（自配）清洗1min，再用自來(lái)水、純水洗凈，烘干、冷卻。

2、用直接稱量法在干燥小燒杯中準(zhǔn)確稱取0.15～0.2g Zn，蓋好小表面皿。

3、用滴管從燒杯口加入5mL 1:1 鹽酸，待Zn溶解后吹洗表面皿、杯壁，小心地將溶液轉(zhuǎn)移至250mL容量瓶中，用純水稀釋至標(biāo)線，搖勻。

 

 

實(shí)驗(yàn)方法與判定：

1.對(duì)照品溶液的穩(wěn)定性

2.對(duì)照品溶液的配制：精密量取腦對(duì)照品適量，加無(wú)水乙醇制成每1ml含腦1mg的溶液，作為對(duì)照品溶液。

3.色譜條件：以交聯(lián)鍵合聚乙二醇為固定相的毛細(xì)管柱；柱溫120℃；進(jìn)樣口溫度250℃；檢測(cè)器溫度250℃；分流進(jìn)樣，分流比10:1。理論塔板數(shù)按腦計(jì)算應(yīng)不低于10000。

4.實(shí)驗(yàn)方法：配制的對(duì)照品溶液，一份置冷處保存，一份置室溫中保存，在第1、3、7、10、15天重新配制一份對(duì)照品溶液，三種儲(chǔ)備液同時(shí)稀釋制成每1ml中約含50ug的溶液。照氣相色譜法，并依據(jù)新對(duì)照品的峰面積計(jì)算原對(duì)照品溶液的含量。記錄下來(lái)，保證原對(duì)照品溶液含量在考察期相對(duì)平均偏差不超過2.0%，驗(yàn)證對(duì)照品溶液在使用期內(nèi)穩(wěn)定可靠。

桔青霉磷化雌激受體α抗體Human FCHSD2 (F-BAR and double SH3 domains protein 2) ELISA KIT犬白介1β(IL-1β)免疫試劑盒

喜寒犁頭霉磷化真核翻譯起始因子4B抗體Human SLC30A3(Zinc transporter 3) ELISA Kit犬白介1α(IL1A)免疫試劑盒

胡椒枯萎病真核翻譯起始因子4B抗體Human EWSR1 (RNA-binding protein EWS) ELISA KIT犬白介18(IL-18)免疫試劑盒

短小芽孢桿菌磷化轉(zhuǎn)錄接頭蛋白EP300抗體Human EXO5 (Exonuclease V) ELISA KIT犬白介15(IL15)免疫試劑盒

筆狀地霉磷化上皮癌轉(zhuǎn)化蛋白2抗體Human FCHO1 (F-BAR domain only protein 1) ELISA KIT犬白介11(IL-11)免疫試劑盒

大腸埃希菌磷化真核翻譯起始因子4G抗體Human FCHO2 (F-BAR domain only protein 2) ELISA KIT犬白介10(IL-10)免疫試劑盒

鏈霉菌表皮生長(zhǎng)因子受體5抗體Human EXTL1 (Exostosin-like 1) ELISA KIT犬白介1(IL-1)免疫試劑盒

大腸埃希氏菌電子轉(zhuǎn)移黃蛋白β肽/黃蛋白抗體Human FERMT1 (Fermitin family homolog 1) ELISA KIT犬癌胚抗原(CEA)免疫試劑盒

黃芪葉桿菌鈉通道蛋白α ENaCHuman FLAD1 (FAD synthase) ELISA KIT犬γ干擾(IFN-γ)免疫試劑盒

紅緣擬層孔菌轉(zhuǎn)錄因子E2F8抗體Human ESPL1 (Separin) ELISA KIT犬γ基丁(GABA)免疫試劑盒

運(yùn)動(dòng)張樹政氏菌內(nèi)皮單核激活肽2抗體Human FTO(Alpha-ketoglutaRate-dependent dioxygenase FTO) ELISA Kit犬β內(nèi)啡肽(β-EP)免疫試劑盒

奇異變形桿菌49005外基質(zhì)蛋白2抗體Human FASTK (Fas-activated serine/threonine kinase) ELISA KIT犬β2微球蛋白(BMG/β2-MG)免疫試劑盒

麥芽糖假絲酵母上皮膜蛋白3抗體Human EPS15 (Epidermal growth factor receptor substrate 15) ELISA KIT犬α-3干擾(IFN-α3)免疫試劑盒

新月彎孢膜蛋白EVC2抗體Human EPHB4 (Ephrin type-B receptor 4) ELISA KIT犬α1微球蛋白(α1-MG)免疫試劑盒

黃孢平革菌哺乳動(dòng)物室管膜相關(guān)蛋白1抗體Human TUFM (Elongation factor Tu, mitochondrial) ELISA KIT犬α-1/2干擾(IFN-α1/2)免疫試劑盒

污黑腐皮殼內(nèi)皮粘附分子抗體Human EEF2 (Elongation factor 2) ELISA KIT犬S100鈣結(jié)合蛋白A12/鈣粒蛋白C(S100A12)免疫試劑盒

: No.28資源名稱: 產(chǎn)氣莢膜梭菌 質(zhì)量規(guī)格：100μg/ml,u=4%茶黃-3-沒食子酯

環(huán)狀芽胞桿菌Bacillus│circulans 質(zhì)量規(guī)格：10μg/ml,u=7%茶黃

細(xì)疣青霉Penicillium│verruculosun 質(zhì)量規(guī)格：分析標(biāo)準(zhǔn)品補(bǔ)骨脂寧
隱孢子蟲卵囊染色液Human Thymopentin,TP-5 ELISA Kit  人規(guī)格： 48T

Human Thymosin ELISA Kit  人規(guī)格： 48T

Human Non-Phosphorylated Insulin-like growth factor binding protein 1 ELISA Kit  人未磷suan化類胰島su生長(zhǎng)因子結(jié)合蛋白-1規(guī)格： 48T

Human parathyroid hormone-like protein,PLP ELISA Kit  人jia狀旁腺激su樣蛋白規(guī)格： 48T

Human visfatin ELISA Kit   人內(nèi)脂su/內(nèi)臟脂肪su規(guī)格： 48T

使用方法：

1.  常用篩選濃度

注意：用來(lái)篩選穩(wěn)轉(zhuǎn)株的工作濃度需要根據(jù)細(xì)胞類型，培養(yǎng)基，生長(zhǎng)條件和細(xì)胞代謝率而變化，推薦使用濃度為50-1000μg/mL。對(duì)于第一次使用的實(shí)驗(yàn)體系建議通過建立殺滅曲線（kill curve），即劑量反應(yīng)性曲線，來(lái)確定最佳篩選濃度。

一般而言，哺乳動(dòng)物細(xì)胞50-500μg/mL；細(xì)菌/植物細(xì)胞20-200μg/mL；真菌300-1000μg/mL。

2. 殺滅曲線的建立

注意：為了篩選得到穩(wěn)定表達(dá)目的蛋白的細(xì)胞株，需要確定能夠殺死未轉(zhuǎn)染宿主細(xì)胞的抗生素濃度，可通過建立殺滅曲線（劑量反應(yīng)曲線）來(lái)實(shí)現(xiàn)，至少選擇5個(gè)濃度。

1）  第一天：未轉(zhuǎn)化的細(xì)胞按照20-25%的細(xì)胞密度鋪在合適的培養(yǎng)板上，37℃，CO2培養(yǎng)過夜；注：對(duì)于需要更高密度來(lái)檢測(cè)活力的細(xì)胞，可增加接種量。

2）  根據(jù)細(xì)胞類型，設(shè)定合適范圍內(nèi)的濃度梯度。以哺乳動(dòng)物細(xì)胞為例，可設(shè)定50，100，250，500，750，1000μg/mL。先用去離子水或者PBS buffer按照1:10的比例將母液稀釋到5 mg/ml，然后按照下表稀釋到相應(yīng)濃度的工作液。

3）  第二天：替換舊的培養(yǎng)基，換用新鮮配制的含有相應(yīng)濃度藥物的培養(yǎng)基。每個(gè)濃度做三個(gè)平行孔。

4）  接下來(lái)每3-4天更換新的含藥物培養(yǎng)基。

5）  按照固定的周期（如每2天）進(jìn)行活細(xì)胞計(jì)數(shù)來(lái)確定阻止未轉(zhuǎn)染細(xì)胞生長(zhǎng)的恰當(dāng)濃度。選擇在理想的天數(shù)（通常是7-10天）內(nèi)能夠殺死絕大多數(shù)細(xì)胞的濃度為穩(wěn)定轉(zhuǎn)染細(xì)胞篩選用的工作濃度。

3.   穩(wěn)定轉(zhuǎn)染細(xì)胞的篩選

1）  轉(zhuǎn)染48h后，用含有適當(dāng)濃度的潮霉素B篩選培養(yǎng)基來(lái)傳代細(xì)胞（直接傳代或者稀釋后傳代）。

注意：細(xì)胞處于活躍分裂狀態(tài)時(shí)抗生素的殺傷。則當(dāng)細(xì)胞過于稠密，其效率會(huì)降低。為了得到較好的篩選效果，最好將細(xì)胞稀釋至豐度不超過25%

2）  每隔3-4天更換含有藥物的篩選培養(yǎng)液。

3）  篩選7天后觀察并評(píng)估細(xì)胞克?。洌┑男纬汕闆r。集落的形成可能還需要一周或者更多的時(shí)間，這取決于宿主細(xì)胞類型，轉(zhuǎn)染，以及篩選效果。

4）   挑取并轉(zhuǎn)移5-10個(gè)抗性克隆于35mm細(xì)胞培養(yǎng)板，繼續(xù)用含藥物的篩選培養(yǎng)液維持培養(yǎng)7天。

5）   之后更換正常培養(yǎng)基培養(yǎng)即可。