人工結(jié)腸液公司正在銷售的產(chǎn)品：豚鼠GTP酶活化蛋白(GAP)試劑盒 Anti-IVL Antibody血小板源性生長因子A相關(guān)蛋白2抗體
豚鼠精酶(Arg)試劑盒 Anti-JAK1 Antibody跨膜蛋白106B抗體
豚鼠表皮脂肪酸結(jié)合蛋白5(FABP5)試劑盒Anti-JAK3 Antibody微管相關(guān)蛋白Tau421抗體
豚鼠載脂蛋白B100(ApoB100)試劑盒 Anti-ITPR3

公司產(chǎn)品僅用于科研具有質(zhì)量可靠、效果穩(wěn)定、靈敏度高、操作簡單、易保存等特點(diǎn)，咨詢并訂購！

產(chǎn)品分類：細(xì)胞其他

儲(chǔ)存條件：4℃,12個(gè)月

用途：又稱結(jié)腸模擬液，可用于藥物崩解時(shí)限的檢查。

注意事項(xiàng)：可模擬人體的結(jié)腸環(huán)境。

 

 

配制與標(biāo)定的實(shí)驗(yàn)原理：

1、用EDTA二鈉鹽配制EDTA標(biāo)準(zhǔn)溶液的原因；

EDTA是四元酸，是一種白色晶體粉末，常用H4Y表示，溶解度很小，室溫溶解度為0.02g/100g H2O。

2、標(biāo)定EDTA標(biāo)準(zhǔn)溶液的工作基準(zhǔn)試劑，基準(zhǔn)試劑的預(yù)處理：稱量前一般應(yīng)先用稀鹽酸洗去氧化層，然后用水洗凈，烘干。

配制步驟：

1、取適量鋅片放在100mL燒杯中，用0.1mol·L-1 HCl溶液（自配）清洗1min，再用自來水、純水洗凈，烘干、冷卻。

2、用直接稱量法在干燥小燒杯中準(zhǔn)確稱取0.15～0.2g Zn，蓋好小表面皿。

3、用滴管從燒杯口加入5mL 1:1 鹽酸，待Zn溶解后吹洗表面皿、杯壁，小心地將溶液轉(zhuǎn)移至250mL容量瓶中，用純水稀釋至標(biāo)線，搖勻。

 

 

實(shí)驗(yàn)方法與判定：

1.對(duì)照品溶液的穩(wěn)定性

2.對(duì)照品溶液的配制：精密量取腦對(duì)照品適量，加無水乙醇制成每1ml含腦1mg的溶液，作為對(duì)照品溶液。

3.色譜條件：以交聯(lián)鍵合聚乙二醇為固定相的毛細(xì)管柱；柱溫120℃；進(jìn)樣口溫度250℃；檢測(cè)器溫度250℃；分流進(jìn)樣，分流比10:1。理論塔板數(shù)按腦計(jì)算應(yīng)不低于10000。

4.實(shí)驗(yàn)方法：配制的對(duì)照品溶液，一份置冷處保存，一份置室溫中保存，在第1、3、7、10、15天重新配制一份對(duì)照品溶液，三種儲(chǔ)備液同時(shí)稀釋制成每1ml中約含50ug的溶液。照氣相色譜法，并依據(jù)新對(duì)照品的峰面積計(jì)算原對(duì)照品溶液的含量。記錄下來，保證原對(duì)照品溶液含量在考察期相對(duì)平均偏差不超過2.0%，驗(yàn)證對(duì)照品溶液在使用期內(nèi)穩(wěn)定可靠。

蟾靈;蟾酥靈（標(biāo)準(zhǔn)品) 1,3-DihydroxynaphthaleneFMS樣酪激3配體抗體包裝250mg

長春里寧 1,4-3,6-Dianhydro-D-mannitol堿性成纖維生長因子9抗體包裝25g

長春新堿（標(biāo)準(zhǔn)品） 1,4-Cyclohexanedione原癌基因酪蛋白激FES抗體包裝100g

常春藤苷C(標(biāo)準(zhǔn)品) 1,4-Diaminoanthraquinone成纖維生長因子16抗體包裝25g

常春藤苷D 1,4-Dihydroxyanthraquinone成纖維激活蛋白α抗體包裝5g

常春藤苷H;灰氈毛忍冬次皂苷 1,5-DiaminonaphthaleneFas相關(guān)磷1抗體包裝1g

常春藤皂苷元(標(biāo)準(zhǔn)品) 1,5-Dihydroxynaphthalene葉受體4抗體包裝25g

常春藤皂苷元-28-O-β-D-葡萄糖酯苷 1,6-DihydroxynaphthaleneWnt信號(hào)受體蛋白抗體包裝5g

常山（標(biāo)準(zhǔn)品） 1,8-Octanediol磷化載脂蛋白A1抗體包裝1g

巢脾（標(biāo)準(zhǔn)品） 1-Acetonaphthone磷化載脂蛋白A1抗體包裝25g

朝藿定A(標(biāo)準(zhǔn)品） 1-Adamantanol磷化堿性成纖維生長因子受體1抗體包裝5g

朝藿定A1(標(biāo)準(zhǔn)品) 1-Bromonaphthalene脂肪酰解1抗體包裝100g

朝藿定C（標(biāo)準(zhǔn)品） 1-Bromooctane外基質(zhì)蛋白FRAS1抗體包裝25g

車前草（標(biāo)準(zhǔn)品） 1-Methylimidazole富馬合抗體包裝500g

車前草（車前）（標(biāo)準(zhǔn)品） 1-Ethylimidazole成纖維生長因子21抗體包裝5g

: IFO14900FRIBP2535ATCC33849資源名稱: 大腸埃希氏菌 質(zhì)量規(guī)格：>98%生長分化因子-9試劑盒七葉樹皂苷B;Aesculuside B

膠孢Glomerella│cingulata (Stoneman) Spauld. & H. Schrenk 質(zhì)量規(guī)格：HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品生長分化因子3試劑盒8-去乙酰基滇烏堿;8-deacetyl

小單孢菌屬Micromonospora│sp. 質(zhì)量規(guī)格：>99%生長分化因子2試劑盒羥基吳茱萸堿;Hydroxyevodia
人工結(jié)腸液TM/FITC  熒光標(biāo)記血栓調(diào)節(jié)蛋白IgG

TM/Biotin  生物化血栓調(diào)節(jié)蛋白IgG

TNF- Alpha /Gold  膠體金離子標(biāo)記腫瘤壞死因子

A/H1N1-M2 Human /Biotin  生物標(biāo)記兔抗人A型人流感病H1N1-M2IgG

OVA/HRP  辣根過氧化物標(biāo)記兔抗雞卵白蛋白IgG

FAS(Apo-a1/CD95)/Biotin  生物標(biāo)記兔抗人、大鼠、小鼠載脂蛋白A1IgG

Tn-C/FITC  熒光標(biāo)記腱糖蛋白-CIgG

TNF- Alpha /FITC  熒光標(biāo)記腫瘤壞死因子-αIgG

使用方法：

1.  常用篩選濃度

注意：用來篩選穩(wěn)轉(zhuǎn)株的工作濃度需要根據(jù)細(xì)胞類型，培養(yǎng)基，生長條件和細(xì)胞代謝率而變化，推薦使用濃度為50-1000μg/mL。對(duì)于第一次使用的實(shí)驗(yàn)體系建議通過建立殺滅曲線（kill curve），即劑量反應(yīng)性曲線，來確定最佳篩選濃度。

一般而言，哺乳動(dòng)物細(xì)胞50-500μg/mL；細(xì)菌/植物細(xì)胞20-200μg/mL；真菌300-1000μg/mL。

2. 殺滅曲線的建立

注意：為了篩選得到穩(wěn)定表達(dá)目的蛋白的細(xì)胞株，需要確定能夠殺死未轉(zhuǎn)染宿主細(xì)胞的抗生素濃度，可通過建立殺滅曲線（劑量反應(yīng)曲線）來實(shí)現(xiàn)，至少選擇5個(gè)濃度。

1）  第一天：未轉(zhuǎn)化的細(xì)胞按照20-25%的細(xì)胞密度鋪在合適的培養(yǎng)板上，37℃，CO2培養(yǎng)過夜；注：對(duì)于需要更高密度來檢測(cè)活力的細(xì)胞，可增加接種量。

2）  根據(jù)細(xì)胞類型，設(shè)定合適范圍內(nèi)的濃度梯度。以哺乳動(dòng)物細(xì)胞為例，可設(shè)定50，100，250，500，750，1000μg/mL。先用去離子水或者PBS buffer按照1:10的比例將母液稀釋到5 mg/ml，然后按照下表稀釋到相應(yīng)濃度的工作液。

3）  第二天：替換舊的培養(yǎng)基，換用新鮮配制的含有相應(yīng)濃度藥物的培養(yǎng)基。每個(gè)濃度做三個(gè)平行孔。

4）  接下來每3-4天更換新的含藥物培養(yǎng)基。

5）  按照固定的周期（如每2天）進(jìn)行活細(xì)胞計(jì)數(shù)來確定阻止未轉(zhuǎn)染細(xì)胞生長的恰當(dāng)濃度。選擇在理想的天數(shù)（通常是7-10天）內(nèi)能夠殺死絕大多數(shù)細(xì)胞的濃度為穩(wěn)定轉(zhuǎn)染細(xì)胞篩選用的工作濃度。

3.   穩(wěn)定轉(zhuǎn)染細(xì)胞的篩選

1）  轉(zhuǎn)染48h后，用含有適當(dāng)濃度的潮霉素B篩選培養(yǎng)基來傳代細(xì)胞（直接傳代或者稀釋后傳代）。

注意：細(xì)胞處于活躍分裂狀態(tài)時(shí)抗生素的殺傷。則當(dāng)細(xì)胞過于稠密，其效率會(huì)降低。為了得到較好的篩選效果，最好將細(xì)胞稀釋至豐度不超過25%

2）  每隔3-4天更換含有藥物的篩選培養(yǎng)液。

3）  篩選7天后觀察并評(píng)估細(xì)胞克?。洌┑男纬汕闆r。集落的形成可能還需要一周或者更多的時(shí)間，這取決于宿主細(xì)胞類型，轉(zhuǎn)染，以及篩選效果。

4）   挑取并轉(zhuǎn)移5-10個(gè)抗性克隆于35mm細(xì)胞培養(yǎng)板，繼續(xù)用含藥物的篩選培養(yǎng)液維持培養(yǎng)7天。

5）   之后更換正常培養(yǎng)基培養(yǎng)即可。