黑色標(biāo)本保色液公司正在銷(xiāo)售的產(chǎn)品：綿羊神經(jīng)鈣黏蛋白(NCAD)試劑盒 Anti-GK3P AntibodyCD90
綿羊抗甲狀腺過(guò)氧化物酶抗體(TPO-Ab)試劑盒 Anti-GK2 Antibody硫酯包含蛋白-1(抗原)
綿羊游離睪酮(F-TESTO)試劑盒 Anti-GK3P AntibodyP53誘導(dǎo)糖酵解和凋亡調(diào)節(jié)因子蛋白（抗原）
綿羊胎盤(pán)蛋白13 (PP13)試劑盒Anti-GLB1

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產(chǎn)品分類(lèi)：植物染色

儲(chǔ)存條件：室溫,12個(gè)月

用途：用于植物標(biāo)本的保色。

注意事項(xiàng)：有硫酸銅、乙醇等組成。如出現(xiàn)沉淀，可過(guò)濾后再使用。在制作保色浸制標(biāo)本后，瓶口要用石蠟或者凡士林密封嚴(yán)實(shí)，并避免陽(yáng)光直射。

 

 

配制與標(biāo)定的實(shí)驗(yàn)原理：

1、用EDTA二鈉鹽配制EDTA標(biāo)準(zhǔn)溶液的原因；

EDTA是四元酸，是一種白色晶體粉末，常用H4Y表示，溶解度很小，室溫溶解度為0.02g/100g H2O。

2、標(biāo)定EDTA標(biāo)準(zhǔn)溶液的工作基準(zhǔn)試劑，基準(zhǔn)試劑的預(yù)處理：稱(chēng)量前一般應(yīng)先用稀鹽酸洗去氧化層，然后用水洗凈，烘干。

配制步驟：

1、取適量鋅片放在100mL燒杯中，用0.1mol·L-1 HCl溶液（自配）清洗1min，再用自來(lái)水、純水洗凈，烘干、冷卻。

2、用直接稱(chēng)量法在干燥小燒杯中準(zhǔn)確稱(chēng)取0.15～0.2g Zn，蓋好小表面皿。

3、用滴管從燒杯口加入5mL 1:1 鹽酸，待Zn溶解后吹洗表面皿、杯壁，小心地將溶液轉(zhuǎn)移至250mL容量瓶中，用純水稀釋至標(biāo)線，搖勻。

 

 

實(shí)驗(yàn)方法與判定：

1.對(duì)照品溶液的穩(wěn)定性

2.對(duì)照品溶液的配制：精密量取腦對(duì)照品適量，加無(wú)水乙醇制成每1ml含腦1mg的溶液，作為對(duì)照品溶液。

3.色譜條件：以交聯(lián)鍵合聚乙二醇為固定相的毛細(xì)管柱；柱溫120℃；進(jìn)樣口溫度250℃；檢測(cè)器溫度250℃；分流進(jìn)樣，分流比10:1。理論塔板數(shù)按腦計(jì)算應(yīng)不低于10000。

4.實(shí)驗(yàn)方法：配制的對(duì)照品溶液，一份置冷處保存，一份置室溫中保存，在第1、3、7、10、15天重新配制一份對(duì)照品溶液，三種儲(chǔ)備液同時(shí)稀釋制成每1ml中約含50ug的溶液。照氣相色譜法，并依據(jù)新對(duì)照品的峰面積計(jì)算原對(duì)照品溶液的含量。記錄下來(lái)，保證原對(duì)照品溶液含量在考察期相對(duì)平均偏差不超過(guò)2.0%，驗(yàn)證對(duì)照品溶液在使用期內(nèi)穩(wěn)定可靠。

小橢圓接合酵母嗜中性?？乖?/span>CD177抗體Human NFATC1(Nuclear factor of activated T-cells, cytoplasmic 1) ELISA Kit人多萜長(zhǎng)二磷寡糖蛋白環(huán)糊精糖基轉(zhuǎn)移(DDOST/OST-48)免疫試劑盒

歧皺青霉鈣整合結(jié)合蛋白1抗體Human NEO1(Neogenin) ELISA Kit人多肽YY(Peptide-YY)免疫試劑盒

葉球鞘單胞菌21號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框7抗體Human MADCAM1(Mucosal addressin cell adhesion molecule 1) ELISA Kit人多免疫球蛋白受體(poly-IgR)免疫試劑盒

谷棒桿菌磷化巨噬集落激因子受體抗體Human PACRG(Parkin coregulated gene protein) ELISA Kit人多聚腺苷二磷核糖聚合(PARP)免疫試劑盒

干酪乳桿菌磷化巨噬集落激因子受體抗體Human CX3CR1(CX3C chemokine receptor 1) ELISA Kit人多功能蛋白聚糖(versican)免疫試劑盒

假單胞菌屬磷化巨噬集落激因子受體抗體Human SNX1(Sorting nexin-1) ELISA Kit人多巴脫羧(DDC)免疫試劑盒

微球菌磷化巨噬集落激因子受體抗體Human NAIP(Baculoviral IAP repeat-containing protein 1) ELISA Kit人多巴-β羥化(DBH)免疫試劑盒

蘇云金芽孢桿菌松蠋亞種磷化巨噬集落激因子受體抗體Human JUP(Junction plakoglobin) ELISA Kit人多巴D1受體(D1R)免疫試劑盒

飼料  鉛磷化巨噬集落激因子受體抗體Human CFL1(Cofilin-1) ELISA Kit人多巴(DA)免疫試劑盒

南方散斑殼微管結(jié)合蛋白CYLD抗體Human LGALS3BP(Galectin-3-binding protein) ELISA Kit人對(duì)氧磷-3(PON3)免疫試劑盒

枯草芽孢桿菌磷化微管結(jié)合蛋白CYLD抗體Human CFLAR(CASP8 and FADD-like apoptosis regulator) ELISA Kit人對(duì)氧磷(PON)免疫試劑盒

異常漢遜酵母異常變種磷化CBX5抗體Human ADCYAP1R1(Pituitary adenylate cyclase-activating polypeptide type I receptor) ELISA Kit人對(duì)稱(chēng)二甲基精(SMDA)免疫試劑盒

突散囊菌霉抗體Human PPA1(Inorganic pyrophosphatase) ELISA Kit人對(duì)基甲(PABA)免疫試劑盒

大腸埃希氏菌磷化受體酪激c-Abl抗體Human RET(Proto-oncogene tyrosine-protein kinase receptor Ret) ELISA Kit人端粒重復(fù)序列結(jié)合因子2(TERF2)免疫試劑盒

赤曲霉磷化質(zhì)膜微囊蛋白-1抗體Human CASR(Extracellular calcium-sensing receptor) ELISA Kit人端粒重復(fù)序列結(jié)合因子1(TERF1)免疫試劑盒

橢圓孫秀芹氏菌磷化周期依賴激2抗體Human VIPR2(Vasoactive intestinal polypeptide receptor 2) ELISA Kit人端粒逆轉(zhuǎn)錄(TERT)免疫試劑盒

巨大芽孢桿菌 ABacillus│megaterium A de Bary 質(zhì)量規(guī)格：分析標(biāo)準(zhǔn)品湖貝;YY90410梭砂貝母堿

傳染性法氏囊病病毒Avibirnavirus│Infectious bursal disease virus 質(zhì)量規(guī)格：AR白花前胡乙

巨大芽孢桿菌Bacillus│megaterium de Bary 質(zhì)量規(guī)格：分析標(biāo)準(zhǔn)品,≥99.5%(GC)小豆蔻明
黑色標(biāo)本保色液2,3-DPG(Human 2,3-Disphosphoglycerate,2) ELISA Kit  人2,3-二磷suan甘油suan規(guī)格： 48T

LUM(Human lumican) ELISA Kit  人基膜聚糖/內(nèi)腔蛋白規(guī)格： 48T

NHE3(Human Na+/H+ exchanger 3) ELISA Kit  人Na+/H+交換體3規(guī)格： 48T

OFQ/N(Human orphanin FQ/nociceptin) ELISA Kit  人孤腓肽規(guī)格： 48T

ST1(Human Stromelysin-1) ELISA Kit  人基質(zhì)裂解su規(guī)格： 48T

使用方法：

1.  常用篩選濃度

注意：用來(lái)篩選穩(wěn)轉(zhuǎn)株的工作濃度需要根據(jù)細(xì)胞類(lèi)型，培養(yǎng)基，生長(zhǎng)條件和細(xì)胞代謝率而變化，推薦使用濃度為50-1000μg/mL。對(duì)于第一次使用的實(shí)驗(yàn)體系建議通過(guò)建立殺滅曲線（kill curve），即劑量反應(yīng)性曲線，來(lái)確定最佳篩選濃度。

一般而言，哺乳動(dòng)物細(xì)胞50-500μg/mL；細(xì)菌/植物細(xì)胞20-200μg/mL；真菌300-1000μg/mL。

2. 殺滅曲線的建立

注意：為了篩選得到穩(wěn)定表達(dá)目的蛋白的細(xì)胞株，需要確定能夠殺死未轉(zhuǎn)染宿主細(xì)胞的抗生素濃度，可通過(guò)建立殺滅曲線（劑量反應(yīng)曲線）來(lái)實(shí)現(xiàn)，至少選擇5個(gè)濃度。

1）  第一天：未轉(zhuǎn)化的細(xì)胞按照20-25%的細(xì)胞密度鋪在合適的培養(yǎng)板上，37℃，CO2培養(yǎng)過(guò)夜；注：對(duì)于需要更高密度來(lái)檢測(cè)活力的細(xì)胞，可增加接種量。

2）  根據(jù)細(xì)胞類(lèi)型，設(shè)定合適范圍內(nèi)的濃度梯度。以哺乳動(dòng)物細(xì)胞為例，可設(shè)定50，100，250，500，750，1000μg/mL。先用去離子水或者PBS buffer按照1:10的比例將母液稀釋到5 mg/ml，然后按照下表稀釋到相應(yīng)濃度的工作液。

3）  第二天：替換舊的培養(yǎng)基，換用新鮮配制的含有相應(yīng)濃度藥物的培養(yǎng)基。每個(gè)濃度做三個(gè)平行孔。

4）  接下來(lái)每3-4天更換新的含藥物培養(yǎng)基。

5）  按照固定的周期（如每2天）進(jìn)行活細(xì)胞計(jì)數(shù)來(lái)確定阻止未轉(zhuǎn)染細(xì)胞生長(zhǎng)的恰當(dāng)濃度。選擇在理想的天數(shù)（通常是7-10天）內(nèi)能夠殺死絕大多數(shù)細(xì)胞的濃度為穩(wěn)定轉(zhuǎn)染細(xì)胞篩選用的工作濃度。

3.   穩(wěn)定轉(zhuǎn)染細(xì)胞的篩選

1）  轉(zhuǎn)染48h后，用含有適當(dāng)濃度的潮霉素B篩選培養(yǎng)基來(lái)傳代細(xì)胞（直接傳代或者稀釋后傳代）。

注意：細(xì)胞處于活躍分裂狀態(tài)時(shí)抗生素的殺傷。則當(dāng)細(xì)胞過(guò)于稠密，其效率會(huì)降低。為了得到較好的篩選效果，最好將細(xì)胞稀釋至豐度不超過(guò)25%

2）  每隔3-4天更換含有藥物的篩選培養(yǎng)液。

3）  篩選7天后觀察并評(píng)估細(xì)胞克?。洌┑男纬汕闆r。集落的形成可能還需要一周或者更多的時(shí)間，這取決于宿主細(xì)胞類(lèi)型，轉(zhuǎn)染，以及篩選效果。

4）   挑取并轉(zhuǎn)移5-10個(gè)抗性克隆于35mm細(xì)胞培養(yǎng)板，繼續(xù)用含藥物的篩選培養(yǎng)液維持培養(yǎng)7天。

5）   之后更換正常培養(yǎng)基培養(yǎng)即可。