詳細介紹
公司產(chǎn)品僅用于科研具有質(zhì)量可靠、效果穩(wěn)定、靈敏度高、操作簡單、易保存等特點,咨詢并訂購!
產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 貨號 |
乙酸銨溶液 | 100ml | FS-R7352 |
產(chǎn)品分類:核酸提取
儲存條件:4℃,12個月
用途:分析試劑、防腐劑、緩沖劑、提供乙酸根,水溶液顯中性
注意事項:無菌溶液。主要由乙酸銨/醋酸銨、去離子水組成,溶液pH在7左右,顯中性,經(jīng)過濾除菌。
配制與標定的實驗原理:
1、用EDTA二鈉鹽配制EDTA標準溶液的原因;
EDTA是四元酸,是一種白色晶體粉末,常用H4Y表示,溶解度很小,室溫溶解度為0.02g/100g H2O。
2、標定EDTA標準溶液的工作基準試劑,基準試劑的預(yù)處理:稱量前一般應(yīng)先用稀鹽酸洗去氧化層,然后用水洗凈,烘干。
配制步驟:
1、取適量鋅片放在100mL燒杯中,用0.1mol·L-1 HCl溶液(自配)清洗1min,再用自來水、純水洗凈,烘干、冷卻。
2、用直接稱量法在干燥小燒杯中準確稱取0.15~0.2g Zn,蓋好小表面皿。
3、用滴管從燒杯口加入5mL 1:1 鹽酸,待Zn溶解后吹洗表面皿、杯壁,小心地將溶液轉(zhuǎn)移至250mL容量瓶中,用純水稀釋至標線,搖勻。
實驗方法與判定:
1.對照品溶液的穩(wěn)定性
2.對照品溶液的配制:精密量取腦對照品適量,加無水乙醇制成每1ml含腦1mg的溶液,作為對照品溶液。
3.色譜條件:以交聯(lián)鍵合聚乙二醇為固定相的毛細管柱;柱溫120℃;進樣口溫度250℃;檢測器溫度250℃;分流進樣,分流比10:1。理論塔板數(shù)按腦計算應(yīng)不低于10000。
4.實驗方法:配制的對照品溶液,一份置冷處保存,一份置室溫中保存,在第1、3、7、10、15天重新配制一份對照品溶液,三種儲備液同時稀釋制成每1ml中約含50ug的溶液。照氣相色譜法,并依據(jù)新對照品的峰面積計算原對照品溶液的含量。記錄下來,保證原對照品溶液含量在考察期相對平均偏差不超過2.0%,驗證對照品溶液在使用期內(nèi)穩(wěn)定可靠。
瘦受體抗體Human PIK3C2B ELISA Kit角蛋白20(CK-20)
枯草芽孢桿菌項韌帶彈性蛋白抗體Human PIK3IP1 ELISA Kit角蛋白20(CK20)
粘鞭霉氧化低密度脂蛋白抗體Human IL20RA(Interleukin-20 receptor subunit alpha) ELISA Kit角蛋白19(CK-19)
香菇轉(zhuǎn)化生長因子β結(jié)合蛋白4抗體Human PIK3C2B ELISA Kit角蛋白18-M65(CK 18-M65)
香菇G蛋白偶聯(lián)受體69BHuman PIK3IP1 ELISA Kit角蛋白18-M30(CK 18-M30)
草青霉李斯特菌菌體蛋白抗體Human PIK3C2G ELISA Kit角蛋白18(CK-18)
假單胞菌屬Rho的鳥核苷交換因子12抗體Human PILRA ELISA Kit角蛋白17(CK17)
果生鏈核盤菌白血病相關(guān)蛋白5抗體Human PIGB ELISA Kit角蛋白13(CK-13)
三棱孢小囊菌富含亮重復(fù)蛋白62抗體Human PIM2(Serine/threonine-protein kinase pim-2) ELISA Kit間粘附分子3(ICAM-3/CD50)
米氏假單胞菌淋巴磷蛋白磷相關(guān)蛋白抗體Human PI3K p55(gamma) ELISA Kit間粘附分子2(ICAM-2/CD102)
解淀粉周培瑾氏菌含亮神經(jīng)膠質(zhì)瘤失活蛋白4抗體Human KLB(Beta-klotho) ELISA Kit間粘附分子1(ICAM-1/CD54)
皺曲毛殼淋巴性白血病相關(guān)序列1抗體Human PIF1 ELISA Kit間粘附分子1(ICAM-1)
鼠乳桿菌L-瓜抗體Human PICK1 ELISA Kit性T淋巴相關(guān)抗原4(CTLA-4/CD152)
釀酒酵母半胱蛋白抗體Human PIGK ELISA Kit相關(guān)蛋白A(CagA)
釀酒酵母乳脫氫D抗體Human PIG3 ELISA Kit(CTX)
福氏志賀氏菌蛋白激LYK5抗體Human PIGA ELISA Kit凋亡抑制因子(IAP)
傳染性法氏囊病病毒Avibirnavirus│Infectious bursal disease virus 質(zhì)量規(guī)格:>97.0%(HPLC)(N)松脂二葡萄糖苷
彎孢單頂孢Monacrosporium│gampsosporum 質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(HPLC)(N)吳茱萸次堿
小單孢菌Micropolyspora│sp. 質(zhì)量規(guī)格:>90.0%(HPLC)吳茱萸堿
乙酸銨溶液MIP-1 Delta(Mouse Macrophage Inflammatory Protein 1 Delta) ELISA kit 小鼠巨噬細胞炎性蛋白1δ規(guī)格: 48T
PARC(Mouse pulmonary activation regulated chemokine) ELISA Kit 小鼠肺部活化調(diào)節(jié)趨化因子規(guī)格: 48T
LZM(Mouse Lysozyme) ELISA Kit 小鼠溶junmei規(guī)格: 48T
sCD30(Mouse soluble cluster of differentiation 30) Elisa Kit 小鼠可溶性CD30規(guī)格: 48T
sMHC-2(Mouse soluble myosin heavy chain 2) ELISA Kit 小鼠可溶性肌球蛋白重鏈規(guī)格: 48T
使用方法:
1. 常用篩選濃度
注意:用來篩選穩(wěn)轉(zhuǎn)株的工作濃度需要根據(jù)細胞類型,培養(yǎng)基,生長條件和細胞代謝率而變化,推薦使用濃度為50-1000μg/mL。對于第一次使用的實驗體系建議通過建立殺滅曲線(kill curve),即劑量反應(yīng)性曲線,來確定最佳篩選濃度。
一般而言,哺乳動物細胞50-500μg/mL;細菌/植物細胞20-200μg/mL;真菌300-1000μg/mL。
2. 殺滅曲線的建立
注意:為了篩選得到穩(wěn)定表達目的蛋白的細胞株,需要確定能夠殺死未轉(zhuǎn)染宿主細胞的抗生素濃度,可通過建立殺滅曲線(劑量反應(yīng)曲線)來實現(xiàn),至少選擇5個濃度。
1) 第一天:未轉(zhuǎn)化的細胞按照20-25%的細胞密度鋪在合適的培養(yǎng)板上,37℃,CO2培養(yǎng)過夜;注:對于需要更高密度來檢測活力的細胞,可增加接種量。
2) 根據(jù)細胞類型,設(shè)定合適范圍內(nèi)的濃度梯度。以哺乳動物細胞為例,可設(shè)定50,100,250,500,750,1000μg/mL。先用去離子水或者PBS buffer按照1:10的比例將母液稀釋到5 mg/ml,然后按照下表稀釋到相應(yīng)濃度的工作液。
3) 第二天:替換舊的培養(yǎng)基,換用新鮮配制的含有相應(yīng)濃度藥物的培養(yǎng)基。每個濃度做三個平行孔。
4) 接下來每3-4天更換新的含藥物培養(yǎng)基。
5) 按照固定的周期(如每2天)進行活細胞計數(shù)來確定阻止未轉(zhuǎn)染細胞生長的恰當(dāng)濃度。選擇在理想的天數(shù)(通常是7-10天)內(nèi)能夠殺死絕大多數(shù)細胞的濃度為穩(wěn)定轉(zhuǎn)染細胞篩選用的工作濃度。
3. 穩(wěn)定轉(zhuǎn)染細胞的篩選
1) 轉(zhuǎn)染48h后,用含有適當(dāng)濃度的潮霉素B篩選培養(yǎng)基來傳代細胞(直接傳代或者稀釋后傳代)。
注意:細胞處于活躍分裂狀態(tài)時抗生素的殺傷。則當(dāng)細胞過于稠密,其效率會降低。為了得到較好的篩選效果,最好將細胞稀釋至豐度不超過25%
2) 每隔3-4天更換含有藥物的篩選培養(yǎng)液。
3) 篩選7天后觀察并評估細胞克隆(集落)的形成情況。集落的形成可能還需要一周或者更多的時間,這取決于宿主細胞類型,轉(zhuǎn)染,以及篩選效果。
4) 挑取并轉(zhuǎn)移5-10個抗性克隆于35mm細胞培養(yǎng)板,繼續(xù)用含藥物的篩選培養(yǎng)液維持培養(yǎng)7天。
5) 之后更換正常培養(yǎng)基培養(yǎng)即可。