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產(chǎn)品分類：染色其他

儲(chǔ)存條件：室溫,避光,12個(gè)月

用途：用于變性珠蛋白小體染色,又稱血紅蛋白包涵體染色,對(duì)G6PD(葡萄糖-6-磷酸脫氫酶和不穩(wěn)定的血紅蛋白病的診斷有一定價(jià)值

注意事項(xiàng)：被染成紫色或藍(lán)黑色小點(diǎn)。

 

 

配制與標(biāo)定的實(shí)驗(yàn)原理：

1、用EDTA二鈉鹽配制EDTA標(biāo)準(zhǔn)溶液的原因；

EDTA是四元酸，是一種白色晶體粉末，常用H4Y表示，溶解度很小，室溫溶解度為0.02g/100g H2O。

2、標(biāo)定EDTA標(biāo)準(zhǔn)溶液的工作基準(zhǔn)試劑，基準(zhǔn)試劑的預(yù)處理：稱量前一般應(yīng)先用稀鹽酸洗去氧化層，然后用水洗凈，烘干。

配制步驟：

1、取適量鋅片放在100mL燒杯中，用0.1mol·L-1 HCl溶液（自配）清洗1min，再用自來(lái)水、純水洗凈，烘干、冷卻。

2、用直接稱量法在干燥小燒杯中準(zhǔn)確稱取0.15～0.2g Zn，蓋好小表面皿。

3、用滴管從燒杯口加入5mL 1:1 鹽酸，待Zn溶解后吹洗表面皿、杯壁，小心地將溶液轉(zhuǎn)移至250mL容量瓶中，用純水稀釋至標(biāo)線，搖勻。

 

 

實(shí)驗(yàn)方法與判定：

1.對(duì)照品溶液的穩(wěn)定性

2.對(duì)照品溶液的配制：精密量取腦對(duì)照品適量，加無(wú)水乙醇制成每1ml含腦1mg的溶液，作為對(duì)照品溶液。

3.色譜條件：以交聯(lián)鍵合聚乙二醇為固定相的毛細(xì)管柱；柱溫120℃；進(jìn)樣口溫度250℃；檢測(cè)器溫度250℃；分流進(jìn)樣，分流比10:1。理論塔板數(shù)按腦計(jì)算應(yīng)不低于10000。

4.實(shí)驗(yàn)方法：配制的對(duì)照品溶液，一份置冷處保存，一份置室溫中保存，在第1、3、7、10、15天重新配制一份對(duì)照品溶液，三種儲(chǔ)備液同時(shí)稀釋制成每1ml中約含50ug的溶液。照氣相色譜法，并依據(jù)新對(duì)照品的峰面積計(jì)算原對(duì)照品溶液的含量。記錄下來(lái)，保證原對(duì)照品溶液含量在考察期相對(duì)平均偏差不超過(guò)2.0%，驗(yàn)證對(duì)照品溶液在使用期內(nèi)穩(wěn)定可靠。

弗雷德里克斯堡假單胞菌上皮有絲分裂蛋白抗體Human EPS8L1 (Epidermal growth factor receptor kinase substrate 8-like protein 1) ELISA KIT犬S100B蛋白(S100B)免疫試劑盒

不吸水鏈霉菌Emerin蛋白抗體Human ELSPBP1 (Epididymal sperm-binding protein 1) ELISA KIT犬P選擇(SELP)免疫試劑盒

寄生孢外信號(hào)調(diào)節(jié)激5抗體Human ERN2 (Serine/threonine-protein kinase/endoribonuclease IRE2) ELISA KIT犬P物質(zhì)受體(TACR1)免疫試劑盒

巨大曲霉磷/磷二酯家族成員5抗體Human EPS8L3 (Epidermal growth factor receptor kinase substrate 8-like protein 3) ELISA KIT犬N-乙酰-β-D-基葡萄糖苷(NAG)免疫試劑盒

禾粘座孢霉（或禾漆斑菌）早期生長(zhǎng)反應(yīng)蛋白2抗體Human EPC1 (Enhancer of polycomb homolog 1) ELISA KIT犬N端前心鈉肽(NT-ProANP)免疫試劑盒

鹽水鹽土生古菌磷化雌激受體β抗體Human ERAS (GTPase ERas) ELISA KIT犬N端前腦鈉(NT-proBNP)免疫試劑盒

豬丹絲菌乙激β抗體Human ECHDC1 (Ethylmalonyl-CoA decarboxylase) ELISA KIT犬KI-67抗原(MKI67)免疫試劑盒

栗疫菌微管相關(guān)末端結(jié)合蛋白2抗體Human ERRFI1(ERBB receptor feedback inhibitor 1) ELISA Kit犬I 型膠原蛋白免疫試劑盒

波恩佩島蒼黃色桿菌減數(shù)分裂內(nèi)切EME1抗體Human EVPL (Envoplakin) ELISA KIT犬E選擇(SELE)免疫試劑盒

木霉延伸突觸蛋白2抗體Human ENOSF1 (Mitochondrial enolase superfamily member 1) ELISA KIT犬C肽(C-Peptide)免疫試劑盒

膠孢延伸突觸蛋白1抗體Human ERAS (GTPase ERas) ELISA KIT犬C反應(yīng)蛋白(CRP)免疫試劑盒

紅根須腹菌紅膜蛋白4.2抗體Human TYROBP(TYRO protein tyrosine kinase-binding protein) ELISA Kit犬CD8分子(CD8)免疫試劑盒

南類芽孢桿菌轉(zhuǎn)錄因子ELYS蛋白抗體Human ENOSF1 (Mitochondrial enolase superfamily member 1) ELISA KIT犬CD6分子(CD6)免疫試劑盒

芽孢桿菌內(nèi)皮粘蛋白EMCN抗體Human ERRFI1(ERBB receptor feedback inhibitor 1) ELISA Kit犬CD4分子(CD4)免疫試劑盒

米串珠鐮孢調(diào)節(jié)鳥核苷交換因子1抗體Human DSCAM (Down syndrome cell adhesion molecule homolog) ELISA KIT犬CD31分子(CD31)免疫試劑盒

灰平鏈霉菌磷化轉(zhuǎn)錄因子E2F1抗體Human EDARADD (Ectodysplasin-A receptor-associated adapter protein) ELISA KIT犬CC趨化因子受體2(CCR2)免疫試劑盒

: 10002資源名稱: 滄州擬諾氏菌 質(zhì)量規(guī)格：100μg/ml,u=2%D-阿伯糖

: K85/39資源名稱: 西蘭地沙門氏菌 質(zhì)量規(guī)格：10μg/ml,u=2%L-組鹽鹽

亞鐵氧化硫桿狀菌Acidithiobacillus│ferrooxidans 質(zhì)量規(guī)格：分析標(biāo)準(zhǔn)品L-組
Heinz小體染色液Human apelin 12,AP12 ELISA Kit  人apelin 12規(guī)格： 48T

Human Glucose dependent insulin releasing polypeptide,GIP ELISA Kit  人葡萄糖依賴性胰島su釋放多肽規(guī)格： 48T

Human Proinsulin,PI ELISA Kit  人胰島su原規(guī)格： 48T

Human Insulin Receptor Beta,ISR- Beta ELISA KIT  人胰島su受體β規(guī)格： 48T

Human Glycated hemoglobin A1c,GHbA1c ELISA Kit  人糖化血紅蛋白A1c規(guī)格： 48T

使用方法：

1.  常用篩選濃度

注意：用來(lái)篩選穩(wěn)轉(zhuǎn)株的工作濃度需要根據(jù)細(xì)胞類型，培養(yǎng)基，生長(zhǎng)條件和細(xì)胞代謝率而變化，推薦使用濃度為50-1000μg/mL。對(duì)于第一次使用的實(shí)驗(yàn)體系建議通過(guò)建立殺滅曲線（kill curve），即劑量反應(yīng)性曲線，來(lái)確定最佳篩選濃度。

一般而言，哺乳動(dòng)物細(xì)胞50-500μg/mL；細(xì)菌/植物細(xì)胞20-200μg/mL；真菌300-1000μg/mL。

2. 殺滅曲線的建立

注意：為了篩選得到穩(wěn)定表達(dá)目的蛋白的細(xì)胞株，需要確定能夠殺死未轉(zhuǎn)染宿主細(xì)胞的抗生素濃度，可通過(guò)建立殺滅曲線（劑量反應(yīng)曲線）來(lái)實(shí)現(xiàn)，至少選擇5個(gè)濃度。

1）  第一天：未轉(zhuǎn)化的細(xì)胞按照20-25%的細(xì)胞密度鋪在合適的培養(yǎng)板上，37℃，CO2培養(yǎng)過(guò)夜；注：對(duì)于需要更高密度來(lái)檢測(cè)活力的細(xì)胞，可增加接種量。

2）  根據(jù)細(xì)胞類型，設(shè)定合適范圍內(nèi)的濃度梯度。以哺乳動(dòng)物細(xì)胞為例，可設(shè)定50，100，250，500，750，1000μg/mL。先用去離子水或者PBS buffer按照1:10的比例將母液稀釋到5 mg/ml，然后按照下表稀釋到相應(yīng)濃度的工作液。

3）  第二天：替換舊的培養(yǎng)基，換用新鮮配制的含有相應(yīng)濃度藥物的培養(yǎng)基。每個(gè)濃度做三個(gè)平行孔。

4）  接下來(lái)每3-4天更換新的含藥物培養(yǎng)基。

5）  按照固定的周期（如每2天）進(jìn)行活細(xì)胞計(jì)數(shù)來(lái)確定阻止未轉(zhuǎn)染細(xì)胞生長(zhǎng)的恰當(dāng)濃度。選擇在理想的天數(shù)（通常是7-10天）內(nèi)能夠殺死絕大多數(shù)細(xì)胞的濃度為穩(wěn)定轉(zhuǎn)染細(xì)胞篩選用的工作濃度。

3.   穩(wěn)定轉(zhuǎn)染細(xì)胞的篩選

1）  轉(zhuǎn)染48h后，用含有適當(dāng)濃度的潮霉素B篩選培養(yǎng)基來(lái)傳代細(xì)胞（直接傳代或者稀釋后傳代）。

注意：細(xì)胞處于活躍分裂狀態(tài)時(shí)抗生素的殺傷。則當(dāng)細(xì)胞過(guò)于稠密，其效率會(huì)降低。為了得到較好的篩選效果，最好將細(xì)胞稀釋至豐度不超過(guò)25%

2）  每隔3-4天更換含有藥物的篩選培養(yǎng)液。

3）  篩選7天后觀察并評(píng)估細(xì)胞克?。洌┑男纬汕闆r。集落的形成可能還需要一周或者更多的時(shí)間，這取決于宿主細(xì)胞類型，轉(zhuǎn)染，以及篩選效果。

4）   挑取并轉(zhuǎn)移5-10個(gè)抗性克隆于35mm細(xì)胞培養(yǎng)板，繼續(xù)用含藥物的篩選培養(yǎng)液維持培養(yǎng)7天。

5）   之后更換正常培養(yǎng)基培養(yǎng)即可。