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公司產(chǎn)品僅用于科研具有質(zhì)量可靠、效果穩(wěn)定、靈敏度高、操作簡單、易保存等特點(diǎn)，咨詢并訂購！
產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 貨號 |
核酮糖1,5-二磷酸羧化酶提取試劑 | 500ml | FS-R6556 |
產(chǎn)品分類：細(xì)胞組分分離
儲存條件：4℃,6個月
用途：主要用于裂解植物組織，提取樣品中的核酮糖1,5-二磷酸羧化酶
注意事項(xiàng)：一種酶(EC 4.1.1.39)，分子量約為53kD，由8個大亞基和8個小亞基組成，是光合作用中決定碳同化速率的關(guān)鍵酶，該酶活力的大小反應(yīng)了植物光合能力的強(qiáng)弱，RUBP羧化酶是光合作用碳代謝中的重要的調(diào)節(jié)酶，主要存在于葉綠體的可溶部分，總量占葉綠體可溶蛋白50-60%。在植物葉片發(fā)育過程中，此酶活性呈規(guī)律性的變化，在植物衰老或遭受環(huán)境脅迫時，酶活性呈下降趨勢。
配制與標(biāo)定的實(shí)驗(yàn)原理：
1、用EDTA二鈉鹽配制EDTA標(biāo)準(zhǔn)溶液的原因；
EDTA是四元酸，是一種白色晶體粉末，常用H4Y表示，溶解度很小，室溫溶解度為0.02g/100g H2O。
2、標(biāo)定EDTA標(biāo)準(zhǔn)溶液的工作基準(zhǔn)試劑，基準(zhǔn)試劑的預(yù)處理：稱量前一般應(yīng)先用稀鹽酸洗去氧化層，然后用水洗凈，烘干。
配制步驟：
1、取適量鋅片放在100mL燒杯中，用0.1mol·L-1 HCl溶液（自配）清洗1min，再用自來水、純水洗凈，烘干、冷卻。
2、用直接稱量法在干燥小燒杯中準(zhǔn)確稱取0.15～0.2g Zn，蓋好小表面皿。
3、用滴管從燒杯口加入5mL 1:1 鹽酸，待Zn溶解后吹洗表面皿、杯壁，小心地將溶液轉(zhuǎn)移至250mL容量瓶中，用純水稀釋至標(biāo)線，搖勻。
實(shí)驗(yàn)方法與判定：
1.對照品溶液的穩(wěn)定性
2.對照品溶液的配制：精密量取腦對照品適量，加無水乙醇制成每1ml含腦1mg的溶液，作為對照品溶液。
3.色譜條件：以交聯(lián)鍵合聚乙二醇為固定相的毛細(xì)管柱；柱溫120℃；進(jìn)樣口溫度250℃；檢測器溫度250℃；分流進(jìn)樣，分流比10:1。理論塔板數(shù)按腦計算應(yīng)不低于10000。
4.實(shí)驗(yàn)方法：配制的對照品溶液，一份置冷處保存，一份置室溫中保存，在第1、3、7、10、15天重新配制一份對照品溶液，三種儲備液同時稀釋制成每1ml中約含50ug的溶液。照氣相色譜法，并依據(jù)新對照品的峰面積計算原對照品溶液的含量。記錄下來，保證原對照品溶液含量在考察期相對平均偏差不超過2.0%，驗(yàn)證對照品溶液在使用期內(nèi)穩(wěn)定可靠。
他環(huán),烯土霉(標(biāo)準(zhǔn)品) Amlodipine角蛋白13抗體包裝25g
托宗(標(biāo)準(zhǔn)品) Amlodipine白免疫球蛋白樣受體-B抗體包裝500g
雄諾龍（標(biāo)準(zhǔn)品） NizatidineCD33L抗體包裝100g
門冬胰島（標(biāo)準(zhǔn)品） Carboxymethyl cellulose 角蛋白10抗體包裝25g
（標(biāo)準(zhǔn)品） Fludarabine軸突生長因子CD108抗體包裝5g
(標(biāo)準(zhǔn)品) Fludarabine唾液結(jié)合性免疫球蛋白樣凝集5抗體包裝1g
咪喹莫特（標(biāo)準(zhǔn)品） G-418 disulfate,GeneticinCD329抗體包裝1g
咪唑（標(biāo)準(zhǔn)品） Erlotinib嗜粒趨化蛋白14抗體包裝1g
咪唑煙(標(biāo)準(zhǔn)品) N-Acetyl-cysteine1號染色體開放閱讀框57抗體包裝250mg
米(標(biāo)準(zhǔn)品) Zopiclone2號染色體開放閱讀框18抗體包裝100ml
米奈鈣(標(biāo)準(zhǔn)品) Zopiclone色c氧化6抗體包裝100g
(標(biāo)準(zhǔn)品) Aniracetam嗜粒趨化蛋白24抗體包裝25g
米諾地爾（硫鹽）敏樂啶(標(biāo)準(zhǔn)品) Aniracetam巨噬炎性蛋白15包裝100ml
米屈肼(標(biāo)準(zhǔn)品) L-Glutamine巨噬炎性蛋白抗體包裝500ml
米替福新(標(biāo)準(zhǔn)品) RoflumilastCD72蛋白抗體包裝1g
擬青霉屬Paecilomyces│sp. 質(zhì)量規(guī)格：>720IU/MG,BR膜DNA抗體試劑盒1-脫氧野尻霉;1-Deoxynoji
醋化醋桿菌Acetobacter│aceti 質(zhì)量規(guī)格：效價測定角蛋白21-1片段試劑盒;Tacrolimus
肺炎克雷伯氏菌Klebsiella│pneumoniae 質(zhì)量規(guī)格：EP/USP角蛋白18-M65試劑盒10－脫乙酰基巴丁III;10-Dea
核酮糖1,5-二磷酸羧化酶提取試劑PDK1(phospho Y373 + Y376) /FITC 熒光標(biāo)記兔抗人、大、小鼠化3肌依賴性蛋白激1IgG2-酰吡啶 Standard for GC ,≥99.5% (GC)
Phospho-PDK1 (Ser241) /FITC 熒光標(biāo)記化3肌依賴性蛋白激1IgG1-己硫 96%
Pdk4/FITC 熒光標(biāo)記酮脫氫激4IgG2,3-戊二酮 98%
Pdx1/FITC 熒光標(biāo)記胰十二指腸同源異型盒因IgG2,4-二羥苯酮 99%
PEA3/FITC 熒光標(biāo)記多瘤促活化因子IgG2,6-二羥苯酮 99%
PEA15/FITC 熒光標(biāo)記星形膠質(zhì)PEA15IgG三(3,6-二氧雜庚) 95%
Phospho-PEA15 (Ser4)/FITC 熒光標(biāo)記化星形膠質(zhì)PEA15IgG AR
Phospho-PEA15 (Ser116) /FITC 熒光標(biāo)記化星形膠質(zhì)PEA15IgG 99.99% metals basis
使用方法：
1. 常用篩選濃度
注意：用來篩選穩(wěn)轉(zhuǎn)株的工作濃度需要根據(jù)細(xì)胞類型，培養(yǎng)基，生長條件和細(xì)胞代謝率而變化，推薦使用濃度為50-1000μg/mL。對于第一次使用的實(shí)驗(yàn)體系建議通過建立殺滅曲線（kill curve），即劑量反應(yīng)性曲線，來確定最佳篩選濃度。
一般而言，哺乳動物細(xì)胞50-500μg/mL；細(xì)菌/植物細(xì)胞20-200μg/mL；真菌300-1000μg/mL。
2. 殺滅曲線的建立
注意：為了篩選得到穩(wěn)定表達(dá)目的蛋白的細(xì)胞株，需要確定能夠殺死未轉(zhuǎn)染宿主細(xì)胞的抗生素濃度，可通過建立殺滅曲線（劑量反應(yīng)曲線）來實(shí)現(xiàn)，至少選擇5個濃度。
1） 第一天：未轉(zhuǎn)化的細(xì)胞按照20-25%的細(xì)胞密度鋪在合適的培養(yǎng)板上，37℃，CO2培養(yǎng)過夜；注：對于需要更高密度來檢測活力的細(xì)胞，可增加接種量。
2） 根據(jù)細(xì)胞類型，設(shè)定合適范圍內(nèi)的濃度梯度。以哺乳動物細(xì)胞為例，可設(shè)定50，100，250，500，750，1000μg/mL。先用去離子水或者PBS buffer按照1:10的比例將母液稀釋到5 mg/ml，然后按照下表稀釋到相應(yīng)濃度的工作液。
3） 第二天：替換舊的培養(yǎng)基，換用新鮮配制的含有相應(yīng)濃度藥物的培養(yǎng)基。每個濃度做三個平行孔。
4） 接下來每3-4天更換新的含藥物培養(yǎng)基。
5） 按照固定的周期（如每2天）進(jìn)行活細(xì)胞計數(shù)來確定阻止未轉(zhuǎn)染細(xì)胞生長的恰當(dāng)濃度。選擇在理想的天數(shù)（通常是7-10天）內(nèi)能夠殺死絕大多數(shù)細(xì)胞的濃度為穩(wěn)定轉(zhuǎn)染細(xì)胞篩選用的工作濃度。
3. 穩(wěn)定轉(zhuǎn)染細(xì)胞的篩選
1） 轉(zhuǎn)染48h后，用含有適當(dāng)濃度的潮霉素B篩選培養(yǎng)基來傳代細(xì)胞（直接傳代或者稀釋后傳代）。
注意：細(xì)胞處于活躍分裂狀態(tài)時抗生素的殺傷。則當(dāng)細(xì)胞過于稠密，其效率會降低。為了得到較好的篩選效果，最好將細(xì)胞稀釋至豐度不超過25%
2） 每隔3-4天更換含有藥物的篩選培養(yǎng)液。
3） 篩選7天后觀察并評估細(xì)胞克隆（集落）的形成情況。集落的形成可能還需要一周或者更多的時間，這取決于宿主細(xì)胞類型，轉(zhuǎn)染，以及篩選效果。
4） 挑取并轉(zhuǎn)移5-10個抗性克隆于35mm細(xì)胞培養(yǎng)板，繼續(xù)用含藥物的篩選培養(yǎng)液維持培養(yǎng)7天。
5） 之后更換正常培養(yǎng)基培養(yǎng)即可。
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