化工儀器網(wǎng)
詳細(xì)介紹
產(chǎn)品分類：免疫組化
儲(chǔ)存條件：4℃,6個(gè)月
用途：免疫染色中稀釋一抗、可以防止抗體效價(jià)下降,減少抗體在組織上的非特異性吸附
注意事項(xiàng)：主要由TBS、明膠、BSA、防腐劑等組成。
公司產(chǎn)品僅用于科研具有質(zhì)量可靠、效果穩(wěn)定、靈敏度高、操作簡(jiǎn)單、易保存等特點(diǎn)，咨詢并訂購(gòu)！
產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 貨號(hào) |
免疫染色封閉液 | 100ml | FS-R7283 |
配制與標(biāo)定的實(shí)驗(yàn)原理：
1、用EDTA二鈉鹽配制EDTA標(biāo)準(zhǔn)溶液的原因；
EDTA是四元酸，是一種白色晶體粉末，常用H4Y表示，溶解度很小，室溫溶解度為0.02g/100g H2O。
2、標(biāo)定EDTA標(biāo)準(zhǔn)溶液的工作基準(zhǔn)試劑，基準(zhǔn)試劑的預(yù)處理：稱量前一般應(yīng)先用稀鹽酸洗去氧化層，然后用水洗凈，烘干。
配制步驟：
1、取適量鋅片放在100mL燒杯中，用0.1mol·L-1 HCl溶液（自配）清洗1min，再用自來(lái)水、純水洗凈，烘干、冷卻。
2、用直接稱量法在干燥小燒杯中準(zhǔn)確稱取0.15～0.2g Zn，蓋好小表面皿。
3、用滴管從燒杯口加入5mL 1:1 鹽酸，待Zn溶解后吹洗表面皿、杯壁，小心地將溶液轉(zhuǎn)移至250mL容量瓶中，用純水稀釋至標(biāo)線，搖勻。
實(shí)驗(yàn)方法與判定：
1.對(duì)照品溶液的穩(wěn)定性
2.對(duì)照品溶液的配制：精密量取腦對(duì)照品適量，加無(wú)水乙醇制成每1ml含腦1mg的溶液，作為對(duì)照品溶液。
3.色譜條件：以交聯(lián)鍵合聚乙二醇為固定相的毛細(xì)管柱；柱溫120℃；進(jìn)樣口溫度250℃；檢測(cè)器溫度250℃；分流進(jìn)樣，分流比10:1。理論塔板數(shù)按腦計(jì)算應(yīng)不低于10000。
4.實(shí)驗(yàn)方法：配制的對(duì)照品溶液，一份置冷處保存，一份置室溫中保存，在第1、3、7、10、15天重新配制一份對(duì)照品溶液，三種儲(chǔ)備液同時(shí)稀釋制成每1ml中約含50ug的溶液。照氣相色譜法，并依據(jù)新對(duì)照品的峰面積計(jì)算原對(duì)照品溶液的含量。記錄下來(lái)，保證原對(duì)照品溶液含量在考察期相對(duì)平均偏差不超過(guò)2.0%，驗(yàn)證對(duì)照品溶液在使用期內(nèi)穩(wěn)定可靠。
使用方法：
1. 常用篩選濃度
注意：用來(lái)篩選穩(wěn)轉(zhuǎn)株的工作濃度需要根據(jù)細(xì)胞類型，培養(yǎng)基，生長(zhǎng)條件和細(xì)胞代謝率而變化，推薦使用濃度為50-1000μg/mL。對(duì)于第一次使用的實(shí)驗(yàn)體系建議通過(guò)建立殺滅曲線（kill curve），即劑量反應(yīng)性曲線，來(lái)確定最佳篩選濃度。
一般而言，哺乳動(dòng)物細(xì)胞50-500μg/mL；細(xì)菌/植物細(xì)胞20-200μg/mL；真菌300-1000μg/mL。
2. 殺滅曲線的建立
注意：為了篩選得到穩(wěn)定表達(dá)目的蛋白的細(xì)胞株，需要確定能夠殺死未轉(zhuǎn)染宿主細(xì)胞的抗生素濃度，可通過(guò)建立殺滅曲線（劑量反應(yīng)曲線）來(lái)實(shí)現(xiàn)，至少選擇5個(gè)濃度。
1） 第一天：未轉(zhuǎn)化的細(xì)胞按照20-25%的細(xì)胞密度鋪在合適的培養(yǎng)板上，37℃，CO2培養(yǎng)過(guò)夜；注：對(duì)于需要更高密度來(lái)檢測(cè)活力的細(xì)胞，可增加接種量。
2） 根據(jù)細(xì)胞類型，設(shè)定合適范圍內(nèi)的濃度梯度。以哺乳動(dòng)物細(xì)胞為例，可設(shè)定50，100，250，500，750，1000μg/mL。先用去離子水或者PBS buffer按照1:10的比例將母液稀釋到5 mg/ml，然后按照下表稀釋到相應(yīng)濃度的工作液。
3） 第二天：替換舊的培養(yǎng)基，換用新鮮配制的含有相應(yīng)濃度藥物的培養(yǎng)基。每個(gè)濃度做三個(gè)平行孔。
4） 接下來(lái)每3-4天更換新的含藥物培養(yǎng)基。
5） 按照固定的周期（如每2天）進(jìn)行活細(xì)胞計(jì)數(shù)來(lái)確定阻止未轉(zhuǎn)染細(xì)胞生長(zhǎng)的恰當(dāng)濃度。選擇在理想的天數(shù)（通常是7-10天）內(nèi)能夠殺死絕大多數(shù)細(xì)胞的濃度為穩(wěn)定轉(zhuǎn)染細(xì)胞篩選用的工作濃度。
3. 穩(wěn)定轉(zhuǎn)染細(xì)胞的篩選
1） 轉(zhuǎn)染48h后，用含有適當(dāng)濃度的潮霉素B篩選培養(yǎng)基來(lái)傳代細(xì)胞（直接傳代或者稀釋后傳代）。
注意：細(xì)胞處于活躍分裂狀態(tài)時(shí)抗生素的殺傷。則當(dāng)細(xì)胞過(guò)于稠密，其效率會(huì)降低。為了得到較好的篩選效果，最好將細(xì)胞稀釋至豐度不超過(guò)25%
2） 每隔3-4天更換含有藥物的篩選培養(yǎng)液。
3） 篩選7天后觀察并評(píng)估細(xì)胞克隆（集落）的形成情況。集落的形成可能還需要一周或者更多的時(shí)間，這取決于宿主細(xì)胞類型，轉(zhuǎn)染，以及篩選效果。
4） 挑取并轉(zhuǎn)移5-10個(gè)抗性克隆于35mm細(xì)胞培養(yǎng)板，繼續(xù)用含藥物的篩選培養(yǎng)液維持培養(yǎng)7天。
5） 之后更換正常培養(yǎng)基培養(yǎng)即可。
釀酒酵母同源異型盒基因HLX1蛋白抗體Human SNX15 ELISA Kit大鼠白介32(IL-32)免疫試劑盒
霍氏瓶霉三羥基基合成1Human SNX18 ELISA Kit大鼠白介3(IL-3)免疫試劑盒
釀酒酵母熱休克因子1抗體Human SNX19 ELISA Kit大鼠白介2可溶性受體β鏈(sIL-2Rβ)免疫試劑盒
漢遜德巴酵母磷化熱休克因子1抗體Human SNX20 ELISA Kit大鼠白介2可溶性受體α鏈(sIL-2Rα/CD25)免疫試劑盒
疣孢青霉熱休克蛋白71抗體Human SNRPB ELISA Kit大鼠白介28B(IL-28B)免疫試劑盒
無(wú)花果擬盤(pán)多毛孢微絲相關(guān)蛋白hHBrk1抗體Human SMO ELISA Kit大鼠白介28A(IL-28A)免疫試劑盒
竹瘤座菌植烷酰羥化2抗體Human SNX22 ELISA Kit大鼠白介27(IL-27)免疫試劑盒
食用香料 折光指數(shù)、相對(duì)密度 A型流感病H9N1神經(jīng)型抗體Human SNAPC5 ELISA Kit大鼠白介26(IL-26)免疫試劑盒
鹽敏芽孢桿菌A型流感病H9N1血凝型抗體Human SMPDL3B(Sphingomyelin Phosphodiesterase Acid Like 3B) ELISA Kit大鼠白介23(IL-23)免疫試劑盒
多帶革孔菌人類狀瘤病33抗體Human SMPX ELISA Kit大鼠白介22(IL-22)免疫試劑盒
少根根霉A型病H1N1蛋白抗體Human SNAPIN ELISA Kit大鼠白介21(IL-21)免疫試劑盒
多主葡萄殼菌甲型肝炎病聚蛋白VP1抗體Human SNCAIP ELISA Kit大鼠白介20(IL-20)免疫試劑盒
長(zhǎng)雙歧桿菌長(zhǎng)亞種造血干特異性蛋白抗體Human CALB1(Calbindin) ELISA Kit大鼠白介2(IL-2)免疫試劑盒
滑菇轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β1誘導(dǎo)轉(zhuǎn)錄因子1抗體Human SMNDC1 ELISA Kit大鼠白介1受體樣1(IL1RL1)免疫試劑盒
枯草芽孢桿菌同源盒蛋白C6抗體Human SNAP29 ELISA Kit大鼠白介1受體拮抗劑(IL1Ra)免疫試劑盒
植物乳桿菌植物亞種同源盒蛋白C4抗體Human SMO ELISA Kit大鼠白介1可溶性受體Ⅱ(sIL-1RⅡ)免疫試劑盒
肺形側(cè)耳Pleurotus│pulmonarius 質(zhì)量規(guī)格：分析標(biāo)準(zhǔn)品
黎巴嫩珊瑚狀放線菌屬Actinocorallia│libanotica 質(zhì)量規(guī)格：分析標(biāo)準(zhǔn)品芍藥內(nèi)酯苷
曲霉屬Aspergillus│sp. 質(zhì)量規(guī)格：分析標(biāo)準(zhǔn)品,用于環(huán)境分析,≥99.5%(GC)仙苷
免疫染色封閉液MHC I /AgB I /H-1 I ELISA Kit 大鼠主要組織相容性復(fù)合體Ⅰ類規(guī)格： 48T
GATA4 ELISA Kit 大鼠GATA結(jié)合蛋白4規(guī)格： 48T
IP-/CXCL ELISA Kit 大鼠干擾su誘導(dǎo)蛋白規(guī)格： 48T
ENA-78/CXCL5 ELISA Kit 大鼠上皮中性粒細(xì)胞活化肽78規(guī)格： 48T
AT- III ELISA Kit 大鼠抗凝血meiⅢ規(guī)格： 48T
化工儀器網(wǎng)