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細胞核懸浮基液

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更新時間:2022-07-04 14:50:07瀏覽次數(shù):240

聯(lián)系我們時請說明是化工儀器網(wǎng)上看到的信息,謝謝!

產(chǎn)品簡介

供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 100ml
貨號 FS-R6520 應(yīng)用領(lǐng)域 化工
主要用途 僅供科研 貨號 FS-R6520
細胞核懸浮基液公司正在銷售的產(chǎn)品:兔肝配蛋白A受體1 (EPHA1)試劑盒Anti-FGFR2 Antibody分選連接蛋白6抗體
兔C4結(jié)合蛋白β(C4BPβ)試劑盒 Anti-FGR Antibody生成相關(guān)蛋白3抗體
兔Toll樣受體9(TLR9/CD289)試劑盒Anti-FGG Antibody磷酸化非受體氨酸激酶c-Abl抗體
兔球蛋白G1(IgG1)試劑盒Anti-FGFR4 An

詳細介紹

產(chǎn)品分類:細胞組分分離

儲存條件:4℃,3個月

用途:分離細胞核膜

注意事項:主要由蔗糖、氯化鎂、蛋白酶抑制劑等組成。

公司產(chǎn)品僅用于科研具有質(zhì)量可靠、效果穩(wěn)定、靈敏度高、操作簡單、易保存等特點,咨詢并訂購!

產(chǎn)品名稱

規(guī)格

貨號

細胞核懸浮基液

100ml

FS-R6520

 

63.jpg 

 

配制與標定的實驗原理:

1、用EDTA二鈉鹽配制EDTA標準溶液的原因;

EDTA是四元酸,是一種白色晶體粉末,常用H4Y表示,溶解度很小,室溫溶解度為0.02g/100g H2O。

2、標定EDTA標準溶液的工作基準試劑,基準試劑的預處理:稱量前一般應(yīng)先用稀鹽酸洗去氧化層,然后用水洗凈,烘干。

配制步驟:

1、取適量鋅片放在100mL燒杯中,用0.1mol·L-1 HCl溶液(自配)清洗1min,再用自來水、純水洗凈,烘干、冷卻。

2、用直接稱量法在干燥小燒杯中準確稱取0.15~0.2g Zn,蓋好小表面皿。

3、用滴管從燒杯口加入5mL 1:1 鹽酸,待Zn溶解后吹洗表面皿、杯壁,小心地將溶液轉(zhuǎn)移至250mL容量瓶中,用純水稀釋至標線,搖勻。

13.jpg 

 

實驗方法與判定:

1.對照品溶液的穩(wěn)定性

2.對照品溶液的配制:精密量取腦對照品適量,加無水乙醇制成每1ml含腦1mg的溶液,作為對照品溶液。

3.色譜條件:以交聯(lián)鍵合聚乙二醇為固定相的毛細管柱;柱溫120℃;進樣口溫度250℃;檢測器溫度250℃;分流進樣,分流比10:1。理論塔板數(shù)按腦計算應(yīng)不低于10000。

4.實驗方法:配制的對照品溶液,一份置冷處保存,一份置室溫中保存,在第1、3、7、10、15天重新配制一份對照品溶液,三種儲備液同時稀釋制成每1ml中約含50ug的溶液。照氣相色譜法,并依據(jù)新對照品的峰面積計算原對照品溶液的含量。記錄下來,保證原對照品溶液含量在考察期相對平均偏差不超過2.0%,驗證對照品溶液在使用期內(nèi)穩(wěn)定可靠。

使用方法:

1.  常用篩選濃度

注意:用來篩選穩(wěn)轉(zhuǎn)株的工作濃度需要根據(jù)細胞類型,培養(yǎng)基,生長條件和細胞代謝率而變化,推薦使用濃度為50-1000μg/mL。對于第一次使用的實驗體系建議通過建立殺滅曲線(kill curve),即劑量反應(yīng)性曲線,來確定最佳篩選濃度。

一般而言,哺乳動物細胞50-500μg/mL;細菌/植物細胞20-200μg/mL;真菌300-1000μg/mL。

2. 殺滅曲線的建立

注意:為了篩選得到穩(wěn)定表達目的蛋白的細胞株,需要確定能夠殺死未轉(zhuǎn)染宿主細胞的抗生素濃度,可通過建立殺滅曲線(劑量反應(yīng)曲線)來實現(xiàn),至少選擇5個濃度。

1)  第一天:未轉(zhuǎn)化的細胞按照20-25%的細胞密度鋪在合適的培養(yǎng)板上,37℃,CO2培養(yǎng)過夜;注:對于需要更高密度來檢測活力的細胞,可增加接種量。

2)  根據(jù)細胞類型,設(shè)定合適范圍內(nèi)的濃度梯度。以哺乳動物細胞為例,可設(shè)定50,100,250,500,750,1000μg/mL。先用去離子水或者PBS buffer按照1:10的比例將母液稀釋到5 mg/ml,然后按照下表稀釋到相應(yīng)濃度的工作液。

3)  第二天:替換舊的培養(yǎng)基,換用新鮮配制的含有相應(yīng)濃度藥物的培養(yǎng)基。每個濃度做三個平行孔。

4)  接下來每3-4天更換新的含藥物培養(yǎng)基。

5)  按照固定的周期(如每2天)進行活細胞計數(shù)來確定阻止未轉(zhuǎn)染細胞生長的恰當濃度。選擇在理想的天數(shù)(通常是7-10天)內(nèi)能夠殺死絕大多數(shù)細胞的濃度為穩(wěn)定轉(zhuǎn)染細胞篩選用的工作濃度。

3.   穩(wěn)定轉(zhuǎn)染細胞的篩選

1)  轉(zhuǎn)染48h后,用含有適當濃度的潮霉素B篩選培養(yǎng)基來傳代細胞(直接傳代或者稀釋后傳代)。

注意:細胞處于活躍分裂狀態(tài)時抗生素的殺傷。則當細胞過于稠密,其效率會降低。為了得到較好的篩選效果,最好將細胞稀釋至豐度不超過25%

2)  每隔3-4天更換含有藥物的篩選培養(yǎng)液。

3)  篩選7天后觀察并評估細胞克?。洌┑男纬汕闆r。集落的形成可能還需要一周或者更多的時間,這取決于宿主細胞類型,轉(zhuǎn)染,以及篩選效果。

4)   挑取并轉(zhuǎn)移5-10個抗性克隆于35mm細胞培養(yǎng)板,繼續(xù)用含藥物的篩選培養(yǎng)液維持培養(yǎng)7天。

5)   之后更換正常培養(yǎng)基培養(yǎng)即可。

(標準品) ProbenecidC型凝集結(jié)構(gòu)域家族9成員A抗體包裝5mg

白藜蘆(標準品) Norfloxacin腦鈣粘蛋白12抗體包裝1g

(標準品) Norfloxacin鈣粘蛋白20抗體包裝1g

棓酯(標準品) Norfloxacin HCl鈣粘蛋白29抗體包裝5g

胞嘧啶(標準品) Norfloxacin HClCD200受體抗體包裝1g

胞嘧啶核苷,胞苷(標準品) Indometacin鈣粘蛋白26抗體包裝5g

(標準品) Indometacin鈣粘蛋白14抗體包裝50mg

(標準品) Cimetidine鈣激活離子通道蛋白3抗體包裝1g

貝格(標準品) CimetidineCD200受體抗體包裝5g

貝那普/那普(標準品) Adefovir dipivoxil彈性蛋白1抗體包裝1g

(標準品) Adefovir dipivoxil干生長因子受體/表面分化抗原抗體包裝5g

蓓薩羅丁(標準品) R-Pramipexole Dihydrochloride MonohydrateCD99樣蛋白2抗體包裝1g

酯(標準品) Clozapine鈣粘蛋白相關(guān)蛋白CTNNA3抗體包裝250mg

諾龍(標準品) Clozapine緊密連接蛋白15抗體包裝1g

丁氮芥(標準品) Enrofloxacin 緊密連接蛋白12抗體包裝5g

皮氏羅爾斯通氏菌Ralstonia│pickettii 質(zhì)量規(guī)格:>97%血管內(nèi)皮鈣粘著蛋白復合體試劑盒夏佛塔苷;Schaftoside

白僵菌Beauveria│sp. 質(zhì)量規(guī)格:含量測定血管緊張轉(zhuǎn)化2試劑盒小白菊內(nèi)酯;Parthenolide

百日咳博德特氏菌Bordetella│pertussis 質(zhì)量規(guī)格:>99%,BR血管緊張原試劑盒熊去氧膽;Ursodeoxycholi
細胞核懸浮基液Phospho-p95/NBS1 (Ser343) /FITC  熒光標記化DNA修復蛋白NBS1IgG2,2,2-三氟 98%

N-cadherin /FITC  熒光標記N-鈣粘附分子IgG7,7,8,8-四苯醌二 98%

CD171/NCAM-L1/FITC  熒光標記神經(jīng)粘附分子配體1IgG2-(三氟)烯 98%

CD172a/SIRP Alpha/FITC  熒光標記信號調(diào)節(jié)蛋白αIgG二亞砜  >99.8%(GC)

NCF/NCF4/p40phox/FITC  熒光標記嗜中性粒胞漿因子4IgG二亞砜 電子級

nck2/FITC  熒光標記NCK銜接因子蛋白2IgG壬二 99%

NCOA2/KAT13C /FITC  熒光標記核受體輔助激活蛋白2IgG壬二  technical, ~85% (GC)

NCoR1 /FITC  熒光標記核受體輔助抑制因子1IgG3-芐-5-(2-羥)-4-化噻唑鎓 98%


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