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詳細(xì)介紹
商品介紹：
商品介紹 測(cè)定意義 高密度脂蛋白為血清蛋白之一，主要由肝臟合成，運(yùn)載周圍組織中的膽固醇，再轉(zhuǎn)化為膽汁酸或直接通過膽汁從腸道排出，是一種抗動(dòng)脈粥樣硬化的血漿脂蛋白，是冠心病的保護(hù)因子，俗稱“血管清道夫"，對(duì)冠心病的臨床診斷是一個(gè)重要的參考指標(biāo)。 測(cè)定原理 用沉淀劑分離血清中的高密度脂蛋白膽固醇，利用酯酶催化膽固醇酯水解生成游離膽固醇和游離脂肪酸，從而把膽固醇酯轉(zhuǎn)化為FC；進(jìn)一步利用膽固醇氧化酶催化FC氧化，生成△4-膽甾烯酮和H2O2；再利用過氧化物酶催化H2O2氧化4-氨基安替bi林和酚，生成紅色醌類化合物；在500nm有特征吸收峰。 需自備的儀器和用品 離心機(jī)，恒溫水浴鍋、可見分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、微量石英比色皿/96孔板、蒸餾水。 |
公司產(chǎn)品僅供科研使用：
產(chǎn)品名稱 | 檢測(cè)方法 | 規(guī)格 | 貨號(hào) |
微量法 | 100管/96樣 | AS6321199 |
常見樣本處理方法：
1、血清（漿）樣品：直接檢測(cè)。
2、細(xì)菌、細(xì)胞或組織樣品的制備： 細(xì)菌或培養(yǎng)細(xì)胞：先收集細(xì)菌或細(xì)胞到離心管內(nèi)，離心后棄上清；按照細(xì)菌或細(xì)胞數(shù)量（104個(gè)）：提取液體積（mL）為500~1000：1的比例（建議500萬細(xì)菌或細(xì)胞加入1mL提取液） ，超聲波破碎細(xì)菌或細(xì)胞（冰浴，功率20％或200W，超聲3s，間隔10s，重復(fù)30次）8000g 4℃離心10min，取上清，置冰上待測(cè)。組織：按照組織質(zhì)量（g） ：提取液體積(mL)為1：5~10的比例（建議稱取約0.1g組織，加入1mL提取液），進(jìn)行冰浴勻漿。8000g 4℃離心10min，取上清，置冰上待測(cè)。
產(chǎn)品優(yōu)點(diǎn)如下：
1、快速簡(jiǎn)便：雙試劑，直接操作，快速、簡(jiǎn)便。
2、取樣量微：需要的樣本量是羥胺法的1/10。
3、靈敏度高：檢測(cè)線0.5U/ml，是羥胺法5倍，鄰苯三酚法的200倍
4、穩(wěn)定性好：批內(nèi)CV=5.50%,批間CV=3.32%，試劑盒2～8℃存放3個(gè)月有效。
5、再現(xiàn)性好：變異系數(shù)CV=1.2%。6、回收試驗(yàn)： X =102.3%。7、受外界影響因素?。焊蓴_因素少，重復(fù)性強(qiáng)。且特異性強(qiáng)，不受類SOD物質(zhì)的干擾8、測(cè)試面廣：可測(cè)動(dòng)物血液、組織、各種體液、灌流液等、各種培養(yǎng)細(xì)胞、細(xì)菌、植物組織、各種水產(chǎn)以及化妝品、保健品等，效果均佳。
測(cè)定步驟：
1.加樣
1. 除包被外都需45度加樣
2.加樣體積要準(zhǔn)確
3.管底加樣，不能加在管壁上
4.加樣時(shí)不能產(chǎn)生氣泡
2.溫浴
1.加標(biāo)本后和加結(jié)合物后，應(yīng)立即放入按規(guī)定的反應(yīng)溫 度的水浴箱。
2.各ELISA板不應(yīng)疊在一起。
3.為避免蒸發(fā)，板上應(yīng)加蓋，或?qū)迤椒旁诘撞繅|有濕 紗布的金屬濕盒中。
4.加入底物后，反應(yīng)的時(shí)間和溫度通常不做嚴(yán)格要求。 如室溫高于20℃，ELISA板可避光放在實(shí)驗(yàn)臺(tái)上，以便 不時(shí)觀察，待對(duì)照管顯色適當(dāng)時(shí)，即可終止酶反應(yīng)。
3.洗滌
1.洗滌在ELISA過程中不是反應(yīng)步驟，但卻 是決定實(shí)驗(yàn)成敗的關(guān)鍵。
2.目的是洗去反應(yīng)液中沒有與固相抗原或 抗體結(jié)合的物質(zhì)以及在反應(yīng)過程中非特 異性吸附于固相載體的干擾物質(zhì)。
4.讀板
1.陰性對(duì)照顏色極淺，在定性測(cè)定中一般 可采用目視比色。
2.如用酶標(biāo)儀測(cè)定結(jié)果，準(zhǔn)確性決定于 ELISA板底的平整與透明度、酶標(biāo)儀的質(zhì) 量和軟件的算法。
實(shí)驗(yàn)方法學(xué)：
一、肝素的配制：
市售肝素凍干粉140單位/mg，1克瓶裝，每瓶140，000單位，稱取0.1克肝素凍干粉，加生理鹽水5ml，配成2800單位/ml。取50～100μl濕潤(rùn)管壁，可抗凝人血3～5ml，血液不會(huì)凝固。老鼠血易凝固，所以最好更濃一些?？梢匀?.1克肝素凍干粉，加3ml生理鹽水溶解后，取50～100μl,可抗凝鼠血2～4ml。
肝素抗凝管的制備：取0.1克肝素凍干粉，加2.5ml生理鹽水。取100μl～150μl滴入塑料或玻璃管中，濕潤(rùn)管壁，低于80℃小烤箱中（可以用烤面包的小烤箱），橫向轉(zhuǎn)動(dòng)，每隔5～10分鐘轉(zhuǎn)動(dòng)一次，直至干燥后放入4℃保存，可使2～5ml血液不凝固。
二、血液樣本的收集：
全血根據(jù)收集的條件，分成不抗凝和抗凝兩種。同時(shí)，不抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血清；抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血漿。
1、不抗凝收集血清:將收集好的全血,靜置1～2小時(shí)，直接低速離心分離出血清待用或保存。
2、抗凝收集血漿: 收集抗凝全血，輕輕顛倒充分抗凝后，可直接低速離心分離血漿(也可靜置半小時(shí)左右再低速離心分離血漿)待用或保存。根據(jù)不同抗凝劑的性能特征，選擇合適的抗凝劑。實(shí)驗(yàn)室常用的抗凝劑有肝素的各種鹽、EDTA
選擇抗凝的注意點(diǎn)：
①、每一份樣本所加的抗凝劑的量要一致，同時(shí)所取的全血的量也要盡量一致;
②、收集抗凝全血后一定要輕輕顛倒，充分抗凝，防止部分血液未接觸到抗凝劑而導(dǎo)致凝固;
③、抗凝全血收集的血漿相對(duì)較多（1ml抗凝全血能分離出0.4～0.5ml血漿）;
④、抗凝收集的血漿冷凍保存后，解凍時(shí)可能會(huì)出現(xiàn)絮狀渾濁，如有則需要離心去掉渾濁后
用于測(cè)定。
血竭高鹽(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名： L-Cysteine methyl ester hydrochloride高密度脂蛋白抗體包裝10MG
鴉膽子（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名： Glycine methyl ester hydrochloride蛋白激底物相關(guān)蛋白抗體包裝5MG
鴉膽子苦(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名： L-Glutamic acid dimethyl ester hydrochloride艾滋病病抗體包裝1g
鴉膽子D(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名： L-Leucine methyl ester hydrochloride流感病H3N2血凝抗體包裝250mg
鴨腳樹葉堿（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名： L-Phenylalanine methyl ester hydrochloride人瘤病16型L2抗體包裝5g
鴨跖草（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名： L-Proline methyl ester hydrochlorideA型病H7N9 M1蛋白抗體包裝1g
亞硫氫鈉內(nèi)酯（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名： L-Serine methyl ester hydrochloride蛭抗體包裝25g
亞麻木（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名： L-Tryptophan methyl ester hydrochloride副腫瘤綜合癥小腦變性相關(guān)蛋白抗體包裝5g
煙堿(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名： L-Tyrosine methyl ester 植物熱休克蛋白93抗體包裝25g
延胡索（元胡）（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名： L-Cysteine ethyl ester hydrochloride重組人瘤病抗體包裝5g
延胡索（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名： H-Phe-OEt.HCl長(zhǎng)鏈烯脂酰脫氫抗體包裝25g
延胡索乙；消旋延胡索乙(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名： Glycine ethyl ester hydrochloride羥脫氫β抗體包裝5g
延齡草苷；地索苷（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名： L-Methionine ethyl ester hydrochloride三羥基三基裂解抗體包裝1g
芫花（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名： L-Tyrosine ethyl ester hydrochloride 高密度脂蛋白抗體包裝250mg
芫花條（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名： L-Aspartic acid β-benzyl ester磷化三羥基三基還原抗體包裝1g
硬結(jié)節(jié)桿菌Arthrobacter│scleromae 質(zhì)量規(guī)格：>98%輪狀病試劑盒柯伊-7-O-葡萄糖苷;Chryso
鏈霉菌屬菌種Streptomyces│sp. 質(zhì)量規(guī)格：>98%,叔丁鹽形式輪狀病試劑盒柯諾辛B;Corynoxine B
橙黃色粘球菌Myxococcus│xanthus 質(zhì)量規(guī)格：>98%,USP卵清蛋白特異性IgG試劑盒柯諾辛;Corynoxine
血清高密度脂蛋白（HDLC）測(cè)試盒100管/96樣青色糖單孢 3-氨基-2-萘甲酸二烯氧化物合Elisa
暗色節(jié)菱孢* 1-甲基-1H-吡唑-4-羧酸酮酸激Elisa
豇豆慢生根瘤 羥鈷鹽酸鹽査爾酮合Elisa
橙色桿狀 維生B1超氧化物歧化Elisa
印度毛殼 磺異惡唑赤霉Elisa
草木樨中華根瘤 磺異惡唑赤霉3Elisa
牧草紅酵母 2-氨基-4,5,6,7-四氫苯并[b]噻吩-3-羧酸單脫氫抗壞血酸還原Elisa
枯草芽孢桿 3,4,5-三氟膽色原脫氨Elisa
光滑青霉 3-(磺酰)-2-噻吩羧酸甲酯淀粉Elisa
土曲霉原變種 3-噻吩-2-羧酸獨(dú)腳金內(nèi)酯Elisa
秀珍菇 2-氨基-4-硝苯多氧化Elisa
耶爾森氏屬 2-羥基-5-多氧化Elisa
腸道致病性大腸埃希氏 5-羧酸多聚半乳糖酸Elisa
亞羅酵母屬 丁酯二磷酸核酮糖羧化Elisa
金黃色葡萄球 丁酯二酰基甘油Elisa
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