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詳細介紹
商品屬性：
產(chǎn)品名稱 | |
檢測方法 | 紫外分光光度法 |
產(chǎn)品規(guī)格 | 50管/48樣 |
產(chǎn)品貨號 | AS6321198 |
商品介紹：
測定意義 高密度脂蛋白為血清蛋白之一，主要由肝臟合成，運載周圍組織中的膽固醇，再轉(zhuǎn)化為膽汁酸或直接通過膽汁從腸道排出，是一種抗動脈粥樣硬化的血漿脂蛋白，是冠心病的保護因子，俗稱“血管清道夫"，對冠心病的臨床診斷是一個重要的參考指標。 測定原理 用沉淀劑分離血清中的高密度脂蛋白膽固醇，利用酯酶催化膽固醇酯水解生成游離膽固醇和游離脂肪酸，從而把膽固醇酯轉(zhuǎn)化為FC；進一步利用膽固醇氧化酶催化FC氧化，生成△4-膽甾烯酮和H2O2；再利用過氧化物酶催化H2O2氧化4-氨基安替bi林和酚，生成紅色醌類化合物；在500nm有特征吸收峰。 需自備的儀器和用品 離心機，恒溫水浴鍋、可見分光光度計、1mL玻璃比色皿、蒸餾水。 |
試劑的組成和配制：
酸性提取液：液體50mL×1瓶，4℃保存；堿性提取液：液體50mL×1瓶，4℃保存；試劑一：液體10 mL×1瓶，4℃保存；試劑二：液體3 mL×1瓶，4℃保存；試劑三：粉劑×1瓶，-20 ℃保存，用時加入3mL蒸餾水，混勻，用不完的試劑4℃保存一周；試劑四：粉劑×1瓶，4 ℃保存，用時加入3mL蒸餾水，混勻，用不完的試劑4℃保存一周；試劑五：液體3.6mL×1瓶，4 ℃保存；試劑六：液體30mL×1瓶，4 ℃保存；試劑七：液體50mL×1瓶，4 ℃保存。
自備儀器和用品：
可見分光光度計、臺式離心機、移液器、1 ml玻璃比色皿、研缽、冰和蒸餾水。
NAD+和NADH的提?。?/span>
1、血清（漿）中NAD+和NADH的提取 NAD+的提取：按照血清（漿）體積（ml）：酸性提取液體積（ml）為1：5~10的比例（建 議取約0.1ml血清（漿），加入1ml酸性提取液），95℃水浴5min（蓋緊，以防止水分散失）； 冰浴中冷卻后，10000g 4 ℃離心10min；取500μl上清液，加入500μl堿性提取液使之中 和，混勻，10000g 4 ℃離心10min，取上清，置冰上待測。 NADH的提?。喊凑昭澹{）體積（ml）：堿性提取液體積（ml）為1：5~10的比例（建 議取約0.1ml血清（漿），加入1ml堿性提取液），95℃水浴5min（蓋緊，以防止水分散失）； 冰浴中冷卻后，10000g 4 ℃離心10min；取500μl上清液，加入500μl酸性提取液使之中 和，混勻，10000g 4 ℃離心10min，取上清，置冰上待測。 | 2、組織中NAD+和NADH的提?。?/span> NAD+的提取：按照組織質(zhì)量（g）：酸性提取液體積（ml）為1：5~10的比例（建議取約0.1g 組織，加入1ml酸性提取液），冰浴研磨，95℃水浴5min（蓋緊，以防止水分散失）；冰浴 中冷卻后，10000g 4 ℃離心10min；取500μl上清液，加入500μl堿性提取液使之中和，混勻，10000g 4 ℃離心10min，取上清，置冰上待測。 NADH的提?。喊凑战M織質(zhì)量（g）：堿性提取液體積（ml）為1：5~10的比例（建議取約0.1g 組織，加入1ml堿性提取液），冰浴研磨，95℃水浴5min（蓋緊，以防止水分散失）；冰浴 中冷卻后，10000g 4 ℃離心10min；取500μl上清液，加入500μl酸性提取液使之中和， 混勻，10000g 4 ℃離心10min，取上清，置冰上待測。 | 3、細胞或細菌中NAD+和NADH的提?。?/span> NAD+的提取：先收集細胞或細菌到離心管內(nèi)，棄上清，按照細菌或細胞數(shù)量（104個）：酸性 提取液體積（ml）為500~1000：1的比例（建議500萬細菌或細胞加入1ml酸性提取液）， 超聲波破碎（冰浴，功率20％或200W，超聲3s，間隔10s，重復(fù)30次），95℃水浴5min （蓋緊，以防止水分散失）；冰浴中冷卻后，10000g 4 ℃離心10min；取500μl上清液，加 入500μl堿性提取液使之中和，混勻，10000g 4 ℃離心10min，取上清，置冰上待測。 NADH的提?。合仁占毎蚣毦诫x心管內(nèi)，棄上清，按照細菌或細胞數(shù)量（104個）：堿 性提取液體積（ml）為500~1000：1的比例（建議500萬細菌或細胞加入1ml堿性提取液）， 超聲波破碎（冰浴，功率20％或200W，超聲3s，間隔10s，重復(fù)30次），95℃水浴5min （蓋緊，以防止水分散失）；冰浴中冷卻后，10000g 4 ℃離心10min；取500μl上清液，加 入500μl酸性提取液使之中和，混勻，10000g 4 ℃離心10min，取上清，置冰上待測。 |
ADH測定操作：
1. 分光光度計預(yù)熱30 min，調(diào)節(jié)波長到340 nm，蒸餾水調(diào)零。
2. 試劑二在25℃水浴中保溫30 min。
3. 空白管：在1mL石英比色皿中依次加入100μL蒸餾水、800μL試劑二和100μL試劑四，迅速混勻后于340nm測定吸光值變化，分別記錄15s和75s時吸光值，分別記為A1和A2?！鰽空白管=A1-A2。。
4. 測定管：在1mL石英比色皿中依次加入100μL上清液、800μL試劑二和100μL試劑四，迅速混勻后于340nm測定吸光值變化，分別記錄15s和75s時吸光值，分別記為A3和A4?！鰽測定管=A3-A4。
注意：空白管只需測定一次。
注意事項：
①加入試劑的順序應(yīng)一致，以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時間一樣。
②使用干凈的塑料容器配置洗滌液。
③按照說明書中標明的時間、加液的量及順序進行溫育操作。
④底物A應(yīng)揮發(fā)，避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感，避免長時間暴露于光下。避免用手接觸，有毒。實驗完成后應(yīng)立即讀取OD值。
⑤洗滌酶標板時應(yīng)充分拍干，不要將吸水紙直接放入酶標反應(yīng)孔中吸水。
⑥使用一次性的吸頭以免交叉污染，吸取終止液和底物A、B液時，避免使用帶金屬部分的加樣器 。
⑦實驗中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中，密封保存，以免變質(zhì)。
⑧試劑應(yīng)按標簽說明書儲存，使用前恢復(fù)到室溫。稀稀過后的標準品應(yīng)丟棄，不可保存。
⑨不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。
熊果；烏蘇(標準品)英文名： L-Pipecolic acid HDHD2B蛋白抗體包裝5g
繡線菊（標準品）英文名： L-Norvaline造血干特異性相關(guān)結(jié)合蛋白1抗體包裝10MG
溴東莨菪堿（標準品）英文名： L-tert-LeucineI類組織相容性H-2抗原D-Dalpha鏈抗體包裝1g
徐長卿（標準品）英文名： L-TheanineHEAT重復(fù)內(nèi)含蛋白5A蛋白抗體包裝5g
續(xù)斷（川續(xù)斷）（標準品）英文名： L-Theanine熱休克蛋白70抗體包裝1g
續(xù)斷苷A英文名： D-Glucuronic acid羥類固脫氫17β抗體（17β-HSD8）包裝5g
續(xù)斷苷B英文名： L(+)-allo-Threonine透明質(zhì)結(jié)合蛋白4抗體包裝250mg
玄參（標準品）英文名： Lysine acetateA型流感病H5N1凝集抗體包裝100ml
旋覆花（標準品）英文名： L-Cystine dimethyl ester dihydrochlorideA型流感病核衣殼蛋白抗體包裝100g
雪膽（標準品）英文名： GSK-2636771A型流感病核衣殼蛋白抗體包裝500g
雪膽乙英文名： N-Cbz-L-threonine Benzyl EsterA型流感病核衣殼蛋白抗體包裝1g
雪上一支蒿（標準品）英文名： (+)-2-Methyl-L-serineB型流感病蛋白抗體包裝5g
雪上一枝蒿(標準品)英文名： 3,3-Diphenyl-L-alanine人類狀瘤病16-E7抗體包裝100g
血根堿(標準品)英文名： α-Methyl-L-phenylalanine跨膜蛋白絲1抗體包裝25g
血竭(麒麟竭)（標準品）英文名： L-Aspartic acid dimethyl ester hydrochloride肺癌癌基因蛋白3抗體包裝5g
根瘤菌Rhizobium│sp. 質(zhì)量規(guī)格：>98%落葉型天皰瘡抗體試劑盒1-咖啡酰奎寧;1-Caffeoylq
舟形毛殼Chaetomium│cymbiforme 質(zhì)量規(guī)格：>97.0%,BR,可用于培養(yǎng)絡(luò)試劑盒康普瑞磷二鈉;Combretasta
酵母屬Saccharomyces│sp. 質(zhì)量規(guī)格：>98%;ATP競爭性PI3K和mTOR抑制劑輪狀病抗原試劑盒康普瑞;Combretastatin
ATP檸檬酸裂解酶（ACL）測試盒50管/48樣毛木耳 3--2-4-香豆酸連接Elisa
大腸桿 N-芐氧羰基-L-苯氨6-芐氨基腺Elisa
聚生殼 2,4,6-三酸Bt-Cry1Ac蛋白Elisa
芽孢桿 甲基環(huán)氧烷氫ATPElisa
禾生 2,5-二苯甲酰L-苯解氨Elisa
緊密帚枝霉 硫代嗎啉1,1-二氧化物鹽酸鹽NADPH氧化Elisa
三葉草根瘤 2,3-二-5-NADP蘋果酸Elisa
釀酒酵母 2,5-二-3-Rubisco活化Elisa
根瘤 N'-芐氧羰基-L-賴叔丁酯鹽酸鹽UDP-葡萄糖焦磷酸化Elisa
草地阿格雷氏 2-甲酸乙酯苯磺酰α酮戊二酸脫氫Elisa
孢淡灰鏈霉 6-氨基-3-噠甲酸β-1,3-葡聚糖Elisa
尖孢鐮刀 3,4-二甲β-葡萄糖苷酸Elisa
平田頭菇7-2 三苯基溴γ氨基丁酸Elisa
肉葡萄球（可訂） 葡萄糖酸鎂二水合物苯解氨Elisa
總狀毛霉 二溴熒光二Elisa
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