商品介紹:
商品介紹 測(cè)定意義: 樣品可溶性蛋白質(zhì)含量常常用于酶活性計(jì)算。此外,可溶性蛋白質(zhì)含量也用于食品等質(zhì)量分析。 測(cè)定原理: 堿性條件下,蛋白質(zhì)中半胱氨酸、胱氨酸、色氨酸、酪氨酸以及肽鍵,能將Cu2+還原成Cu+;2分子的BCA與Cu+結(jié)合,生成紫色絡(luò)合物,在540-595nm有吸收峰,562nm處吸收峰*。 自備儀器和用品: 可見分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、微量石英比色皿/96孔板、移液器和蒸餾水。 |
公司產(chǎn)品僅供科研使用:
常見樣本處理方法:
1、血清(漿)樣品:直接檢測(cè)。
2、細(xì)菌、細(xì)胞或組織樣品的制備: 細(xì)菌或培養(yǎng)細(xì)胞:先收集細(xì)菌或細(xì)胞到離心管內(nèi),離心后棄上清;按照細(xì)菌或細(xì)胞數(shù)量(104個(gè)):提取液體積(mL)為500~1000:1的比例(建議500萬細(xì)菌或細(xì)胞加入1mL提取液) ,超聲波破碎細(xì)菌或細(xì)胞(冰浴,功率20%或200W,超聲3s,間隔10s,重復(fù)30次)8000g 4℃離心10min,取上清,置冰上待測(cè)。組織:按照組織質(zhì)量(g) :提取液體積(mL)為1:5~10的比例(建議稱取約0.1g組織,加入1mL提取液),進(jìn)行冰浴勻漿。8000g 4℃離心10min,取上清,置冰上待測(cè)。
產(chǎn)品優(yōu)點(diǎn)如下:
1、快速簡(jiǎn)便:雙試劑,直接操作,快速、簡(jiǎn)便。
2、取樣量微:需要的樣本量是羥胺法的1/10。
3、靈敏度高:檢測(cè)線0.5U/ml,是羥胺法5倍,鄰苯三酚法的200倍
4、穩(wěn)定性好:批內(nèi)CV=5.50%,批間CV=3.32%,試劑盒2~8℃存放3個(gè)月有效。
5、再現(xiàn)性好:變異系數(shù)CV=1.2%。6、回收試驗(yàn): X =102.3%。7、受外界影響因素?。焊蓴_因素少,重復(fù)性強(qiáng)。且特異性強(qiáng),不受類SOD物質(zhì)的干擾8、測(cè)試面廣:可測(cè)動(dòng)物血液、組織、各種體液、灌流液等、各種培養(yǎng)細(xì)胞、細(xì)菌、植物組織、各種水產(chǎn)以及化妝品、保健品等,效果均佳。
測(cè)定步驟:
1.加樣
1. 除包被外都需45度加樣
2.加樣體積要準(zhǔn)確
3.管底加樣,不能加在管壁上
4.加樣時(shí)不能產(chǎn)生氣泡
2.溫浴
1.加標(biāo)本后和加結(jié)合物后,應(yīng)立即放入按規(guī)定的反應(yīng)溫 度的水浴箱。
2.各ELISA板不應(yīng)疊在一起。
3.為避免蒸發(fā),板上應(yīng)加蓋,或?qū)迤椒旁诘撞繅|有濕 紗布的金屬濕盒中。
4.加入底物后,反應(yīng)的時(shí)間和溫度通常不做嚴(yán)格要求。 如室溫高于20℃,ELISA板可避光放在實(shí)驗(yàn)臺(tái)上,以便 不時(shí)觀察,待對(duì)照管顯色適當(dāng)時(shí),即可終止酶反應(yīng)。
3.洗滌
1.洗滌在ELISA過程中不是反應(yīng)步驟,但卻 是決定實(shí)驗(yàn)成敗的關(guān)鍵。
2.目的是洗去反應(yīng)液中沒有與固相抗原或 抗體結(jié)合的物質(zhì)以及在反應(yīng)過程中非特 異性吸附于固相載體的干擾物質(zhì)。
4.讀板
1.陰性對(duì)照顏色極淺,在定性測(cè)定中一般 可采用目視比色。
2.如用酶標(biāo)儀測(cè)定結(jié)果,準(zhǔn)確性決定于 ELISA板底的平整與透明度、酶標(biāo)儀的質(zhì) 量和軟件的算法。
實(shí)驗(yàn)方法學(xué):
一、肝素的配制:
市售肝素凍干粉140單位/mg,1克瓶裝,每瓶140,000單位,稱取0.1克肝素凍干粉,加生理鹽水5ml,配成2800單位/ml。取50~100μl濕潤(rùn)管壁,可抗凝人血3~5ml,血液不會(huì)凝固。老鼠血易凝固,所以最好更濃一些??梢匀?.1克肝素凍干粉,加3ml生理鹽水溶解后,取50~100μl,可抗凝鼠血2~4ml。
肝素抗凝管的制備:取0.1克肝素凍干粉,加2.5ml生理鹽水。取100μl~150μl滴入塑料或玻璃管中,濕潤(rùn)管壁,低于80℃小烤箱中(可以用烤面包的小烤箱),橫向轉(zhuǎn)動(dòng),每隔5~10分鐘轉(zhuǎn)動(dòng)一次,直至干燥后放入4℃保存,可使2~5ml血液不凝固。
二、血液樣本的收集:
全血根據(jù)收集的條件,分成不抗凝和抗凝兩種。同時(shí),不抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血清;抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血漿。
1、不抗凝收集血清:將收集好的全血,靜置1~2小時(shí),直接低速離心分離出血清待用或保存。
2、抗凝收集血漿: 收集抗凝全血,輕輕顛倒充分抗凝后,可直接低速離心分離血漿(也可靜置半小時(shí)左右再低速離心分離血漿)待用或保存。根據(jù)不同抗凝劑的性能特征,選擇合適的抗凝劑。實(shí)驗(yàn)室常用的抗凝劑有肝素的各種鹽、EDTA
選擇抗凝的注意點(diǎn):
①、每一份樣本所加的抗凝劑的量要一致,同時(shí)所取的全血的量也要盡量一致;
②、收集抗凝全血后一定要輕輕顛倒,充分抗凝,防止部分血液未接觸到抗凝劑而導(dǎo)致凝固;
③、抗凝全血收集的血漿相對(duì)較多(1ml抗凝全血能分離出0.4~0.5ml血漿);
④、抗凝收集的血漿冷凍保存后,解凍時(shí)可能會(huì)出現(xiàn)絮狀渾濁,如有則需要離心去掉渾濁后
用于測(cè)定。
博斯氏菌屬磷化熱休克蛋白β5/α晶狀體球蛋白B/αB-crystallin抗體Human PHB(Prohibitin) ELISA Kit人水痘帶狀皰疹病IgM(VZV-IgM)免疫試劑盒
葉球形微桿菌磷化α晶狀體球蛋白B/αB-crystallin抗體Human PIK3Cβ(Phosphoinositide-3-Kinase Catalytic Beta Polypeptide) ELISA Kit人水痘帶狀皰疹病IgG(VZV-IgG)免疫試劑盒
枯斑擬盤多毛孢磷化熱休克蛋白β5/α晶狀體球蛋白B/αB-crystallin抗體Human PK(Pyruvate Kinase, Liver And RBC) ELISA Kit人雙氫睪(DHT)免疫試劑盒
硬水黃桿菌1號(hào)染色體開放閱讀框167抗體Human PLAA(Phospholipase A2 Activating Protein) ELISA Kit人衰變加速因子(DAF/CD55)免疫試劑盒
熱纖梭菌*1號(hào)染色體開放閱讀框168抗體Human PLB(Phospholipase B) ELISA Kit人輸血傳播病/辛型肝炎病抗原免疫試劑盒
肺形側(cè)耳1號(hào)染色體開放閱讀框170抗體Human PK2(Prokineticin 2) ELISA Kit人輸血傳播病(TTV)/辛型肝炎病抗體免疫試劑盒
纖維鏈霉菌1號(hào)染色體開放閱讀框172抗體Human PLCγ1(Phospholipase C Gamma 1) ELISA Kit人輸卵管特異性糖蛋白(OVGP1)免疫試劑盒
茄鏈格孢1號(hào)染色體開放閱讀框173抗體Human PLCγ2(Phospholipase C Gamma 2, Phosphatidylinositol Specific) ELISA Kit人瘦(LEP)免疫試劑盒
叢毛單胞菌1號(hào)染色體開放閱讀框174抗體Human PKC(Protein Kinase C) ELISA Kit人受體型酪蛋白磷樣N(PTPRN)免疫試劑盒
戊糖片球菌1號(hào)染色體開放閱讀框177抗體Human PKCβ1(Protein Kinase C Beta 1) ELISA Kit人受體TNFRSF結(jié)合絲蘇激2(RIPK2)免疫試劑盒
布魯氏菌 生物Ⅵ型1號(hào)染色體開放閱讀框180抗體Human PCNA(ProlifeRating Cell Nuclear Antigen) ELISA Kit人嗜伊紅顆粒主要堿性蛋白(EMBP/MBP)免疫試劑盒
變紫青霉1號(hào)染色體開放閱讀框182抗體Human PDK4(Pyruvate Dehydrogenase Kinase Isozyme 4) ELISA Kit人嗜性粒陽離子蛋白(ECP)免疫試劑盒
尖孢鐮刀菌胡麻?;?/span>1號(hào)染色體開放閱讀框183抗體Human PDP(Pyruvate Dehydrogenase Phosphatase) ELISA Kit人嗜粒趨化蛋白Eotaxin 2(Eotaxin 2/CCL24)免疫試劑盒
梨形毛霉1號(hào)染色體開放閱讀框187抗體Human PDCD1LG1(Programmed Cell Death Protein 1 Ligand 1) ELISA Kit人嗜肺軍團(tuán)菌抗原(LP Ag)免疫試劑盒
屎腸球菌1號(hào)染色體開放閱讀框189抗體Human PCPE1(Procollagen C Proteinase Enhancer 1) ELISA Kit人視黃免疫試劑盒
中慢生華癸根瘤菌1號(hào)染色體開放閱讀框190抗體Human PDCN(Podocin) ELISA Kit人食欲受體(OXR)免疫試劑盒
矮棒曲霉Aspergillus│clavatonanicus 質(zhì)量規(guī)格:>98%,醫(yī)藥級(jí)CD34分子試劑盒冬綠苷
禾生Glomerella│graminicola D.J. Politis 質(zhì)量規(guī)格:>70%,BRCD30分子試劑盒地黃苷D
小單孢菌屬Micromonospora│sp. 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BRCD22分子試劑盒地黃苷A
BCA蛋白法含量測(cè)試盒100管/96樣小葉相思根瘤 7--6-硝基-4-羥基喹唑啉肌酸激B型Elisa
克魯斯假絲酵母 4-溴-3-甲雌受體βElisa
別氏不動(dòng)桿 4-(2-)吡啶5-羥色1AElisa
香菇 碳酸銫5-羥色2AElisa
香菇 鹽酸聯(lián)氨5-羥色2CElisa
異配囊接霉 1-溴-2-甲基丁烷5-羥色3AElisa
黑曲霉 1,2,4-苯三5-羥色3BElisa
大米 轉(zhuǎn)基因成分(陽性) 4,4'-二甲氧基二苯二硫5-羥色4AElisa
毛木耳雜6 4-硫基-1H-吡啶并[3,4-d]嘧啶5-羥色6AElisa
蘇云金桿武漢亞種 3,3'-Dipropylthiacarbocyanine iodide囊泡單轉(zhuǎn)運(yùn)體Elisa
地衣芽孢桿 6-氨基苯并噻唑單氧化AElisa
糞產(chǎn)堿桿 6-溴喹啉犬尿氨基轉(zhuǎn)移Elisa
地衣芽孢桿 5-氨基-2-氟苯肌球蛋白輕鏈磷酸Elisa
赤霉屬 2-氨基-3-苯甲肌球蛋白輕鏈磷酸Elisa
雙歧雙歧桿 2,6-二氟-4-羥基苯甲蛋白激CElisa