詳細(xì)介紹
產(chǎn)品分類(lèi):核酸染色
儲(chǔ)存條件:室溫,避光,6個(gè)月
用途:細(xì)胞核染色,可用于免疫組化的復(fù)染
注意事項(xiàng):染色結(jié)果為:細(xì)胞核呈綠色。
公司產(chǎn)品僅用于科研具有質(zhì)量可靠、效果穩(wěn)定、靈敏度高、操作簡(jiǎn)單、易保存等特點(diǎn),咨詢并訂購(gòu)!
產(chǎn)品名稱(chēng) | 規(guī)格 | 貨號(hào) |
甲基綠染色液 | 100ml | FS-R7083 |
配制與標(biāo)定的實(shí)驗(yàn)原理:
1、用EDTA二鈉鹽配制EDTA標(biāo)準(zhǔn)溶液的原因;
EDTA是四元酸,是一種白色晶體粉末,常用H4Y表示,溶解度很小,室溫溶解度為0.02g/100g H2O。
2、標(biāo)定EDTA標(biāo)準(zhǔn)溶液的工作基準(zhǔn)試劑,基準(zhǔn)試劑的預(yù)處理:稱(chēng)量前一般應(yīng)先用稀鹽酸洗去氧化層,然后用水洗凈,烘干。
配制步驟:
1、取適量鋅片放在100mL燒杯中,用0.1mol·L-1 HCl溶液(自配)清洗1min,再用自來(lái)水、純水洗凈,烘干、冷卻。
2、用直接稱(chēng)量法在干燥小燒杯中準(zhǔn)確稱(chēng)取0.15~0.2g Zn,蓋好小表面皿。
3、用滴管從燒杯口加入5mL 1:1 鹽酸,待Zn溶解后吹洗表面皿、杯壁,小心地將溶液轉(zhuǎn)移至250mL容量瓶中,用純水稀釋至標(biāo)線,搖勻。
實(shí)驗(yàn)方法與判定:
1.對(duì)照品溶液的穩(wěn)定性
2.對(duì)照品溶液的配制:精密量取腦對(duì)照品適量,加無(wú)水乙醇制成每1ml含腦1mg的溶液,作為對(duì)照品溶液。
3.色譜條件:以交聯(lián)鍵合聚乙二醇為固定相的毛細(xì)管柱;柱溫120℃;進(jìn)樣口溫度250℃;檢測(cè)器溫度250℃;分流進(jìn)樣,分流比10:1。理論塔板數(shù)按腦計(jì)算應(yīng)不低于10000。
4.實(shí)驗(yàn)方法:配制的對(duì)照品溶液,一份置冷處保存,一份置室溫中保存,在第1、3、7、10、15天重新配制一份對(duì)照品溶液,三種儲(chǔ)備液同時(shí)稀釋制成每1ml中約含50ug的溶液。照氣相色譜法,并依據(jù)新對(duì)照品的峰面積計(jì)算原對(duì)照品溶液的含量。記錄下來(lái),保證原對(duì)照品溶液含量在考察期相對(duì)平均偏差不超過(guò)2.0%,驗(yàn)證對(duì)照品溶液在使用期內(nèi)穩(wěn)定可靠。
使用方法:
1. 常用篩選濃度
注意:用來(lái)篩選穩(wěn)轉(zhuǎn)株的工作濃度需要根據(jù)細(xì)胞類(lèi)型,培養(yǎng)基,生長(zhǎng)條件和細(xì)胞代謝率而變化,推薦使用濃度為50-1000μg/mL。對(duì)于第一次使用的實(shí)驗(yàn)體系建議通過(guò)建立殺滅曲線(kill curve),即劑量反應(yīng)性曲線,來(lái)確定最佳篩選濃度。
一般而言,哺乳動(dòng)物細(xì)胞50-500μg/mL;細(xì)菌/植物細(xì)胞20-200μg/mL;真菌300-1000μg/mL。
2. 殺滅曲線的建立
注意:為了篩選得到穩(wěn)定表達(dá)目的蛋白的細(xì)胞株,需要確定能夠殺死未轉(zhuǎn)染宿主細(xì)胞的抗生素濃度,可通過(guò)建立殺滅曲線(劑量反應(yīng)曲線)來(lái)實(shí)現(xiàn),至少選擇5個(gè)濃度。
1) 第一天:未轉(zhuǎn)化的細(xì)胞按照20-25%的細(xì)胞密度鋪在合適的培養(yǎng)板上,37℃,CO2培養(yǎng)過(guò)夜;注:對(duì)于需要更高密度來(lái)檢測(cè)活力的細(xì)胞,可增加接種量。
2) 根據(jù)細(xì)胞類(lèi)型,設(shè)定合適范圍內(nèi)的濃度梯度。以哺乳動(dòng)物細(xì)胞為例,可設(shè)定50,100,250,500,750,1000μg/mL。先用去離子水或者PBS buffer按照1:10的比例將母液稀釋到5 mg/ml,然后按照下表稀釋到相應(yīng)濃度的工作液。
3) 第二天:替換舊的培養(yǎng)基,換用新鮮配制的含有相應(yīng)濃度藥物的培養(yǎng)基。每個(gè)濃度做三個(gè)平行孔。
4) 接下來(lái)每3-4天更換新的含藥物培養(yǎng)基。
5) 按照固定的周期(如每2天)進(jìn)行活細(xì)胞計(jì)數(shù)來(lái)確定阻止未轉(zhuǎn)染細(xì)胞生長(zhǎng)的恰當(dāng)濃度。選擇在理想的天數(shù)(通常是7-10天)內(nèi)能夠殺死絕大多數(shù)細(xì)胞的濃度為穩(wěn)定轉(zhuǎn)染細(xì)胞篩選用的工作濃度。
3. 穩(wěn)定轉(zhuǎn)染細(xì)胞的篩選
1) 轉(zhuǎn)染48h后,用含有適當(dāng)濃度的潮霉素B篩選培養(yǎng)基來(lái)傳代細(xì)胞(直接傳代或者稀釋后傳代)。
注意:細(xì)胞處于活躍分裂狀態(tài)時(shí)抗生素的殺傷。則當(dāng)細(xì)胞過(guò)于稠密,其效率會(huì)降低。為了得到較好的篩選效果,最好將細(xì)胞稀釋至豐度不超過(guò)25%
2) 每隔3-4天更換含有藥物的篩選培養(yǎng)液。
3) 篩選7天后觀察并評(píng)估細(xì)胞克?。洌┑男纬汕闆r。集落的形成可能還需要一周或者更多的時(shí)間,這取決于宿主細(xì)胞類(lèi)型,轉(zhuǎn)染,以及篩選效果。
4) 挑取并轉(zhuǎn)移5-10個(gè)抗性克隆于35mm細(xì)胞培養(yǎng)板,繼續(xù)用含藥物的篩選培養(yǎng)液維持培養(yǎng)7天。
5) 之后更換正常培養(yǎng)基培養(yǎng)即可。
凝結(jié)芽胞桿菌陽(yáng)離子轉(zhuǎn)運(yùn)調(diào)控樣蛋白1抗體Human Ang1-7(Angiotensin 1-7) ELISA Kit人可溶性CD38(sCD38)免疫試劑盒
金產(chǎn)色鏈霉菌DNA斷裂因子相似蛋白A抗體Human S1P(Sphingosine 1 Phosphate) ELISA Kit人可溶性CD30配體(sCD30L)免疫試劑盒
蟲(chóng)草屬DNA斷裂因子相似蛋白B抗體Human ACVB(Activin B) ELISA Kit人可溶性CD28(sCD28)免疫試劑盒
*銀耳、白木耳耐藥相關(guān)蛋白9抗體Human ADAMTS12(A Disintegrin And Metalloproteinase With Thrombospondin 12) ELISA Kit人可溶性CD276分子(sCD276/sB7-H3)免疫試劑盒
羽扇豆根瘤菌22號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框40抗體Human SKP2(S-phase kinase-associated protein 2) ELISA Kit人可溶性CD21(CR2/sCD21)免疫試劑盒
香菇嗜粒趨化蛋白3抗體Human SPAG1(Sperm-associated antigen 1) ELISA Kit人可溶性CD163分子(sCD163)免疫試劑盒
阿爾及亞擬盤(pán)多毛孢21號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框33抗體Human IKBKG(NF-kappa-B essential modulator) ELISA Kit人可溶性CD146分子(sCD146)免疫試劑盒
孟氏假單胞菌角蛋白15抗體Human SCAMP1(Secretory carrier-associated membrane protein 1) ELISA Kit人可溶性CD100(sCD100)免疫試劑盒
新月彎孢霉角蛋白14抗體Human SKP2(S-phase kinase-associated protein 2) ELISA Kit人免疫試劑盒
矮棒曲霉神經(jīng)NB3特定蛋白抗體Human SPAG1(Sperm-associated antigen 1) ELISA Kit人顆粒體蛋白(GRN)免疫試劑盒
栗疫菌促胃泌受體抗體Human CHID1(Chitinase domain-containing protein 1) ELISA Kit人顆粒溶(GNLY)免疫試劑盒
丁香鏈霉菌單克抗體Human DUSP1(Dual specificity protein phosphatase 1) ELISA Kit人顆粒H(GZMH/CGL2/CTSGL2)免疫試劑盒
大腸埃希氏菌2號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框72抗體Human PARP2(Poly [ADP-ribose] polymerase 2) ELISA Kit人顆粒B(Gzms-B)免疫試劑盒
腸沙門(mén)氏菌腸炎亞種間粘附分子3抗體Human GPX3(Glutathione peroxidase 3) ELISA Kit人顆粒A(Gzms-A)免疫試劑盒
脫葉鏈霉菌染色質(zhì)結(jié)合蛋白Cbx8抗體Human CTSF(Cathepsin F) ELISA Kit人柯薩奇病腺病受體(CXADR)免疫試劑盒
運(yùn)動(dòng)發(fā)酵單胞菌降鈣抗體Human MYBPC3(Myosin-binding protein C, cardiac-type) ELISA Kit人柯薩奇病IgE(Cox V-IgE)免疫試劑盒
球形賴(lài)芽孢桿菌Lysinibacillus│sphaericus 質(zhì)量規(guī)格:用于液相色譜-質(zhì)譜的離子對(duì)試劑Ⅲ型膠原試劑盒阿彼斯基姆
: ATCC53010資源名稱(chēng): 大腸埃希氏菌 質(zhì)量規(guī)格:用于液相色譜-質(zhì)譜的離子對(duì)試劑3氧代5α類(lèi)固4脫氫2試劑盒澳茄新堿
新城疫病毒Rubulavirus│Newcastle disease virus 質(zhì)量規(guī)格:用于液相色譜-質(zhì)譜的離子對(duì)試劑3型1-磷鞘受體試劑盒7-基-4-基
甲基綠染色液GSTs(Human glutathione S-transferases) ELISA Kit 人S轉(zhuǎn)移mei規(guī)格: 48T
DUB(Human deubiquitinating enzyme) ELISA Kit 人泛su分解mei規(guī)格: 48T
sPLA2(Human secreted phospholipase A2) ELISA Kit 人分泌型磷脂meiA2規(guī)格: 48T
E3/UBPL(Human E3/ubiquitin-protein ligase) ELISA Kit 人泛su連接mei規(guī)格: 48T
MCT(Human mast cell tryptase) ELISA Kit 人肥大細(xì)胞類(lèi)胰蛋白mei規(guī)格: 48T