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產(chǎn)品名稱(chēng) | 規(guī)格 | 貨號(hào) |
碘化鉀淀粉指示劑 | 100ml | FS-R6963 |
產(chǎn)品分類(lèi):指示劑
儲(chǔ)存條件:4℃,3個(gè)月
用途:氧化還原指示劑,主要用于碘量法。
注意事項(xiàng):遇碘變?yōu)樗{(lán)色。
配制與標(biāo)定的實(shí)驗(yàn)原理:
1、用EDTA二鈉鹽配制EDTA標(biāo)準(zhǔn)溶液的原因;
EDTA是四元酸,是一種白色晶體粉末,常用H4Y表示,溶解度很小,室溫溶解度為0.02g/100g H2O。
2、標(biāo)定EDTA標(biāo)準(zhǔn)溶液的工作基準(zhǔn)試劑,基準(zhǔn)試劑的預(yù)處理:稱(chēng)量前一般應(yīng)先用稀鹽酸洗去氧化層,然后用水洗凈,烘干。
配制步驟:
1、取適量鋅片放在100mL燒杯中,用0.1mol·L-1 HCl溶液(自配)清洗1min,再用自來(lái)水、純水洗凈,烘干、冷卻。
2、用直接稱(chēng)量法在干燥小燒杯中準(zhǔn)確稱(chēng)取0.15~0.2g Zn,蓋好小表面皿。
3、用滴管從燒杯口加入5mL 1:1 鹽酸,待Zn溶解后吹洗表面皿、杯壁,小心地將溶液轉(zhuǎn)移至250mL容量瓶中,用純水稀釋至標(biāo)線,搖勻。
實(shí)驗(yàn)方法與判定:
1.對(duì)照品溶液的穩(wěn)定性
2.對(duì)照品溶液的配制:精密量取腦對(duì)照品適量,加無(wú)水乙醇制成每1ml含腦1mg的溶液,作為對(duì)照品溶液。
3.色譜條件:以交聯(lián)鍵合聚乙二醇為固定相的毛細(xì)管柱;柱溫120℃;進(jìn)樣口溫度250℃;檢測(cè)器溫度250℃;分流進(jìn)樣,分流比10:1。理論塔板數(shù)按腦計(jì)算應(yīng)不低于10000。
4.實(shí)驗(yàn)方法:配制的對(duì)照品溶液,一份置冷處保存,一份置室溫中保存,在第1、3、7、10、15天重新配制一份對(duì)照品溶液,三種儲(chǔ)備液同時(shí)稀釋制成每1ml中約含50ug的溶液。照氣相色譜法,并依據(jù)新對(duì)照品的峰面積計(jì)算原對(duì)照品溶液的含量。記錄下來(lái),保證原對(duì)照品溶液含量在考察期相對(duì)平均偏差不超過(guò)2.0%,驗(yàn)證對(duì)照品溶液在使用期內(nèi)穩(wěn)定可靠。
黑曲霉alpha 1腎上腺能受體B抗體Human HERC4 ELISA Kit小鼠高敏甲狀腺(u-T4)免疫試劑盒
根霉屬Bcl2 alpha蛋白抗體Human HINFP ELISA Kit小鼠高密度脂蛋白膽固(HDL-C)免疫試劑盒
Risungbinella白抗原B相關(guān)轉(zhuǎn)錄蛋白5抗體Human HERPUD2 ELISA Kit小鼠高靈敏度促甲狀腺激(U-TSH)免疫試劑盒
枯草芽孢桿菌枯草亞種BTB/POZ結(jié)構(gòu)域蛋白1(型肝炎病的NS5A反轉(zhuǎn)錄蛋白8)抗體Human HERC5 ELISA Kit小鼠高爾基蛋白73(GP-73)免疫試劑盒
鏈格孢BCL7B蛋白抗體Human HESX1 ELISA Kit小鼠高半胱(Hcy)免疫試劑盒
灰藍(lán)毛霉堿性核蛋白2(鋅指蛋白basonuclin2)抗體Human HES5 ELISA Kit小鼠肝脂(HL)免疫試劑盒
草假單胞菌B白血病/淋巴瘤蛋白7抗體Human HECTD1 ELISA Kit小鼠肝臟型脂肪結(jié)合蛋白(L-FABP)免疫試劑盒
異常漢遜酵母異常變種先天性脂肪代謝障礙蛋白2抗體(常染色體顯性遺傳痙攣性截癱17)Human HEXA ELISA Kit小鼠肝生長(zhǎng)因子受體(c-MET/HGFR)免疫試劑盒
黃柄曲霉B遷移基因1抗體Human HECTD2 ELISA Kit小鼠肝生長(zhǎng)因子激活物(HGFAC)免疫試劑盒
毛殼(菌)科脊髓小腦共濟(jì)失調(diào)蛋白BEAN1抗體Human HECTD3 ELISA Kit小鼠肝生長(zhǎng)因子(HGF)免疫試劑盒
腫紅皮孔菌B7H6蛋白抗體Human HELT ELISA Kit小鼠甘油三酯(TG)免疫試劑盒
釀酒酵母B特異性轉(zhuǎn)錄因子抗體Human HELB ELISA Kit小鼠甘油-3-磷脫氫(GAPDH/G3PDH)免疫試劑盒
梨形卷枝霉橋連整合因子蛋白抗體Human HELLS ELISA Kit小鼠干因子/肥大生長(zhǎng)因子(SCF/MGF)免疫試劑盒
裂孔平伏菌BADH2抗體(水稻)Human HEMGN ELISA Kit小鼠干擾誘導(dǎo)蛋白10(IP-10/CXCL10)免疫試劑盒
海洋桿菌丁酰酯單克抗體Human HDDC2 ELISA Kit小鼠干擾調(diào)節(jié)因子5(IRF5)免疫試劑盒
嗜堿假單胞菌磷化β 連環(huán)蛋白抗體Human HDDC3 ELISA Kit小鼠鈣衛(wèi)蛋白(CALP)免疫試劑盒
針層孔菌Phellinus│sp. 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BRγ谷-半胱合成試劑盒鯊肌
葡萄座腔菌Botryosphaeria│dothidea (Moug.) Ces. & De Not. 質(zhì)量規(guī)格:>99%,BCγ干擾誘導(dǎo)蛋白16/p16試劑盒石杉?jí)A乙
: ATCC23218=CCM2713=CIP107115=DSM43111=IAM14287資源名稱(chēng): 達(dá)松維爾擬諾氏菌達(dá)松維爾亞種 質(zhì)量規(guī)格:BRγ干擾誘導(dǎo)單核因子試劑盒三尖杉?jí)A
碘化鉀淀粉指示劑ANNA-2/Ri(Human neuronal nuclear autoantibody) ELISA Kit 人抗神經(jīng)元核2型/抗Ri規(guī)格: 48T
hnRNP/RA33(Human heterogeneous nuclear ribonucleoprotein compies/RA33-antibody) ELISA Kit 人異質(zhì)型核糖核蛋白復(fù)合物/抗RA33規(guī)格: 48T
Q-Ab(Human Q fever antibody) ELISA Kit 人抗Q熱規(guī)格: 48T
PM-Scl/PM-1(Human polymyositis-sclerosis antibody) ELISA Kit 人抗多發(fā)性肌炎硬皮病規(guī)格: 48T
Human PL7-antibody ELISA Kit 人PL7/抗蘇氨酰tRNA合成mei規(guī)格: 48T
使用方法:
1. 常用篩選濃度
注意:用來(lái)篩選穩(wěn)轉(zhuǎn)株的工作濃度需要根據(jù)細(xì)胞類(lèi)型,培養(yǎng)基,生長(zhǎng)條件和細(xì)胞代謝率而變化,推薦使用濃度為50-1000μg/mL。對(duì)于第一次使用的實(shí)驗(yàn)體系建議通過(guò)建立殺滅曲線(kill curve),即劑量反應(yīng)性曲線,來(lái)確定最佳篩選濃度。
一般而言,哺乳動(dòng)物細(xì)胞50-500μg/mL;細(xì)菌/植物細(xì)胞20-200μg/mL;真菌300-1000μg/mL。
2. 殺滅曲線的建立
注意:為了篩選得到穩(wěn)定表達(dá)目的蛋白的細(xì)胞株,需要確定能夠殺死未轉(zhuǎn)染宿主細(xì)胞的抗生素濃度,可通過(guò)建立殺滅曲線(劑量反應(yīng)曲線)來(lái)實(shí)現(xiàn),至少選擇5個(gè)濃度。
1) 第一天:未轉(zhuǎn)化的細(xì)胞按照20-25%的細(xì)胞密度鋪在合適的培養(yǎng)板上,37℃,CO2培養(yǎng)過(guò)夜;注:對(duì)于需要更高密度來(lái)檢測(cè)活力的細(xì)胞,可增加接種量。
2) 根據(jù)細(xì)胞類(lèi)型,設(shè)定合適范圍內(nèi)的濃度梯度。以哺乳動(dòng)物細(xì)胞為例,可設(shè)定50,100,250,500,750,1000μg/mL。先用去離子水或者PBS buffer按照1:10的比例將母液稀釋到5 mg/ml,然后按照下表稀釋到相應(yīng)濃度的工作液。
3) 第二天:替換舊的培養(yǎng)基,換用新鮮配制的含有相應(yīng)濃度藥物的培養(yǎng)基。每個(gè)濃度做三個(gè)平行孔。
4) 接下來(lái)每3-4天更換新的含藥物培養(yǎng)基。
5) 按照固定的周期(如每2天)進(jìn)行活細(xì)胞計(jì)數(shù)來(lái)確定阻止未轉(zhuǎn)染細(xì)胞生長(zhǎng)的恰當(dāng)濃度。選擇在理想的天數(shù)(通常是7-10天)內(nèi)能夠殺死絕大多數(shù)細(xì)胞的濃度為穩(wěn)定轉(zhuǎn)染細(xì)胞篩選用的工作濃度。
3. 穩(wěn)定轉(zhuǎn)染細(xì)胞的篩選
1) 轉(zhuǎn)染48h后,用含有適當(dāng)濃度的潮霉素B篩選培養(yǎng)基來(lái)傳代細(xì)胞(直接傳代或者稀釋后傳代)。
注意:細(xì)胞處于活躍分裂狀態(tài)時(shí)抗生素的殺傷。則當(dāng)細(xì)胞過(guò)于稠密,其效率會(huì)降低。為了得到較好的篩選效果,最好將細(xì)胞稀釋至豐度不超過(guò)25%
2) 每隔3-4天更換含有藥物的篩選培養(yǎng)液。
3) 篩選7天后觀察并評(píng)估細(xì)胞克隆(集落)的形成情況。集落的形成可能還需要一周或者更多的時(shí)間,這取決于宿主細(xì)胞類(lèi)型,轉(zhuǎn)染,以及篩選效果。
4) 挑取并轉(zhuǎn)移5-10個(gè)抗性克隆于35mm細(xì)胞培養(yǎng)板,繼續(xù)用含藥物的篩選培養(yǎng)液維持培養(yǎng)7天。
5) 之后更換正常培養(yǎng)基培養(yǎng)即可。