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過氧化物酶染色液

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更新時(shí)間:2022-07-24 09:34:46瀏覽次數(shù):479

聯(lián)系我們時(shí)請說明是化工儀器網(wǎng)上看到的信息,謝謝!

產(chǎn)品簡介

供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 4×10ml
貨號 FS-R6776 應(yīng)用領(lǐng)域 化工
主要用途 僅供科研 貨號 FS-R6776
過氧化物酶染色液公司正在銷售的產(chǎn)品:雞心鈉肽(ANP)試劑盒Anti-PTGS2 Antibody磷酸化轉(zhuǎn)錄因子SOX9蛋白抗體
雞酮酸脫氫酶β(PDHβ)試劑盒Anti-PTGS2 Antibody磷酸化蛋白磷酸酶2抗體
雞胰腺再生蛋白3γ(REG3γ)試劑盒Anti-PTGS2 Antibody長鏈脂肪酸輔連接酶抗體
雞髓樣前體抑制因子2(MPIF2)試劑盒Anti-PTK2 Antibo

詳細(xì)介紹

產(chǎn)品分類:酶類染色

儲(chǔ)存條件:4℃,避光,6個(gè)月

用途:過氧化物酶酶染色

注意事項(xiàng):ICSH推薦方法。主要由聯(lián)苯胺等組成,染色液需臨用前配置,且不宜久置。

公司產(chǎn)品僅用于科研具有質(zhì)量可靠、效果穩(wěn)定、靈敏度高、操作簡單、易保存等特點(diǎn),咨詢并訂購!

產(chǎn)品名稱

規(guī)格

貨號

過氧化物酶染色液

4×10ml

FS-R6776

 

63.jpg 

 

配制與標(biāo)定的實(shí)驗(yàn)原理:

1、用EDTA二鈉鹽配制EDTA標(biāo)準(zhǔn)溶液的原因;

EDTA是四元酸,是一種白色晶體粉末,常用H4Y表示,溶解度很小,室溫溶解度為0.02g/100g H2O。

2、標(biāo)定EDTA標(biāo)準(zhǔn)溶液的工作基準(zhǔn)試劑,基準(zhǔn)試劑的預(yù)處理:稱量前一般應(yīng)先用稀鹽酸洗去氧化層,然后用水洗凈,烘干。

配制步驟:

1、取適量鋅片放在100mL燒杯中,用0.1mol·L-1 HCl溶液(自配)清洗1min,再用自來水、純水洗凈,烘干、冷卻。

2、用直接稱量法在干燥小燒杯中準(zhǔn)確稱取0.15~0.2g Zn,蓋好小表面皿。

3、用滴管從燒杯口加入5mL 1:1 鹽酸,待Zn溶解后吹洗表面皿、杯壁,小心地將溶液轉(zhuǎn)移至250mL容量瓶中,用純水稀釋至標(biāo)線,搖勻。

13.jpg 

 

實(shí)驗(yàn)方法與判定:

1.對照品溶液的穩(wěn)定性

2.對照品溶液的配制:精密量取腦對照品適量,加無水乙醇制成每1ml含腦1mg的溶液,作為對照品溶液。

3.色譜條件:以交聯(lián)鍵合聚乙二醇為固定相的毛細(xì)管柱;柱溫120℃;進(jìn)樣口溫度250℃;檢測器溫度250℃;分流進(jìn)樣,分流比10:1。理論塔板數(shù)按腦計(jì)算應(yīng)不低于10000。

4.實(shí)驗(yàn)方法:配制的對照品溶液,一份置冷處保存,一份置室溫中保存,在第1、3、7、10、15天重新配制一份對照品溶液,三種儲(chǔ)備液同時(shí)稀釋制成每1ml中約含50ug的溶液。照氣相色譜法,并依據(jù)新對照品的峰面積計(jì)算原對照品溶液的含量。記錄下來,保證原對照品溶液含量在考察期相對平均偏差不超過2.0%,驗(yàn)證對照品溶液在使用期內(nèi)穩(wěn)定可靠。

使用方法:

1.  常用篩選濃度

注意:用來篩選穩(wěn)轉(zhuǎn)株的工作濃度需要根據(jù)細(xì)胞類型,培養(yǎng)基,生長條件和細(xì)胞代謝率而變化,推薦使用濃度為50-1000μg/mL。對于第一次使用的實(shí)驗(yàn)體系建議通過建立殺滅曲線(kill curve),即劑量反應(yīng)性曲線,來確定最佳篩選濃度。

一般而言,哺乳動(dòng)物細(xì)胞50-500μg/mL;細(xì)菌/植物細(xì)胞20-200μg/mL;真菌300-1000μg/mL。

2. 殺滅曲線的建立

注意:為了篩選得到穩(wěn)定表達(dá)目的蛋白的細(xì)胞株,需要確定能夠殺死未轉(zhuǎn)染宿主細(xì)胞的抗生素濃度,可通過建立殺滅曲線(劑量反應(yīng)曲線)來實(shí)現(xiàn),至少選擇5個(gè)濃度。

1)  第一天:未轉(zhuǎn)化的細(xì)胞按照20-25%的細(xì)胞密度鋪在合適的培養(yǎng)板上,37℃,CO2培養(yǎng)過夜;注:對于需要更高密度來檢測活力的細(xì)胞,可增加接種量。

2)  根據(jù)細(xì)胞類型,設(shè)定合適范圍內(nèi)的濃度梯度。以哺乳動(dòng)物細(xì)胞為例,可設(shè)定50,100,250,500,750,1000μg/mL。先用去離子水或者PBS buffer按照1:10的比例將母液稀釋到5 mg/ml,然后按照下表稀釋到相應(yīng)濃度的工作液。

3)  第二天:替換舊的培養(yǎng)基,換用新鮮配制的含有相應(yīng)濃度藥物的培養(yǎng)基。每個(gè)濃度做三個(gè)平行孔。

4)  接下來每3-4天更換新的含藥物培養(yǎng)基。

5)  按照固定的周期(如每2天)進(jìn)行活細(xì)胞計(jì)數(shù)來確定阻止未轉(zhuǎn)染細(xì)胞生長的恰當(dāng)濃度。選擇在理想的天數(shù)(通常是7-10天)內(nèi)能夠殺死絕大多數(shù)細(xì)胞的濃度為穩(wěn)定轉(zhuǎn)染細(xì)胞篩選用的工作濃度。

3.   穩(wěn)定轉(zhuǎn)染細(xì)胞的篩選

1)  轉(zhuǎn)染48h后,用含有適當(dāng)濃度的潮霉素B篩選培養(yǎng)基來傳代細(xì)胞(直接傳代或者稀釋后傳代)。

注意:細(xì)胞處于活躍分裂狀態(tài)時(shí)抗生素的殺傷。則當(dāng)細(xì)胞過于稠密,其效率會(huì)降低。為了得到較好的篩選效果,最好將細(xì)胞稀釋至豐度不超過25%

2)  每隔3-4天更換含有藥物的篩選培養(yǎng)液。

3)  篩選7天后觀察并評估細(xì)胞克?。洌┑男纬汕闆r。集落的形成可能還需要一周或者更多的時(shí)間,這取決于宿主細(xì)胞類型,轉(zhuǎn)染,以及篩選效果。

4)   挑取并轉(zhuǎn)移5-10個(gè)抗性克隆于35mm細(xì)胞培養(yǎng)板,繼續(xù)用含藥物的篩選培養(yǎng)液維持培養(yǎng)7天。

5)   之后更換正常培養(yǎng)基培養(yǎng)即可。

地瓜藤(標(biāo)準(zhǔn)品) Eupalinolide B整合α5抗體Integrin α5包裝25g

地黃(生地黃)(標(biāo)準(zhǔn)品) Vinorelbine整合β1/Integrin β1抗體包裝5g

地錦草(斑地錦)(標(biāo)準(zhǔn)品) Vinorelbine tartrate整合αVβ3抗體包裝100g

地錦草(標(biāo)準(zhǔn)品) Nifura胰島樣生長因子2 mRNA 結(jié)合蛋白3抗體包裝25g

地龍(參環(huán)毛蚓)(標(biāo)準(zhǔn)品) Nifura型流感病血凝抗體包裝5g

地稔(標(biāo)準(zhǔn)品) Hydroxytyrosol型流感病血凝抗體包裝25g

地蜈蚣(標(biāo)準(zhǔn)品) 4',5,7-Trihydroxy-3',6-dimethoxyflavone整合αVβ5抗體包裝5g

地榆(地榆)(標(biāo)準(zhǔn)品) Tiliroside干擾調(diào)節(jié)因子1抗體包裝1g

地榆皂苷II(標(biāo)準(zhǔn)品) 4',5-Dihydroxy-7-methoxyflavone白介6包裝25g

地榆皂苷I(標(biāo)準(zhǔn)品) Khasianineγ干擾誘導(dǎo)蛋白16抗體包裝5g

滇藏五味子G Ligustroflavone整合αVβ1抗體包裝1g

滇桂艾納香(標(biāo)準(zhǔn)品) Schaftoside白介-20抗體包裝5g

滇雞血藤(標(biāo)準(zhǔn)品) 9,10-Dimethoxy-2,3-(methylenedioxy)-13,13a-didehydrob干擾相關(guān)發(fā)育調(diào)節(jié)因子2抗體包裝1g

滇(標(biāo)準(zhǔn)品) Tangeretin白介-1受體相關(guān)激2抗體包裝5g

化木蘭花堿 Tangeretin磷化胰島受體β抗體包裝25g

舟形毛殼Chaetomium│cymbiforme 質(zhì)量規(guī)格:HPLC>99%,標(biāo)準(zhǔn)品柯薩奇病腺病受體試劑盒黃芪苷;Astragaloside I

需鹽色鹽桿菌Chromohalobacter│salexigens 質(zhì)量規(guī)格:>99%,醫(yī)藥級柯薩奇病IgE試劑盒虎杖苷;Polydatin

大腸埃希氏菌Escherichia│coli 質(zhì)量規(guī)格:>99.0%,BR柯薩奇病IgA試劑盒槲皮苷;Quercitrin
過氧化物酶染色液IL-14(human)  人白介su-14規(guī)格: 96T

IL-15  人白介su-15規(guī)格: 48T

IL-16  人白介su-16規(guī)格: 48T

IL-17  人白介su-17規(guī)格: 48T

IL-18  人白介su-18規(guī)格: 48T


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