干燥組織修復(fù)液公司正在銷(xiāo)售的產(chǎn)品：D(VD)試劑盒Anti-KCNK7 Antibody羅丹明標(biāo)記兔抗FITC
VD2)試劑盒Anti-KCNK9 Antibody羅丹明標(biāo)記羊抗人IgA
(VD3)試劑盒Anti-KCNMB2 Antibody羅丹明標(biāo)記親合素
25羥基D3(25-HVD3)試劑盒 Anti-KCNMB2 Antibody羅丹明標(biāo)記蛋白A
1,25

公司產(chǎn)品僅用于科研具有質(zhì)量可靠、效果穩(wěn)定、靈敏度高、操作簡(jiǎn)單、易保存等特點(diǎn)，咨詢(xún)并訂購(gòu)！

產(chǎn)品分類(lèi)：染色其他

儲(chǔ)存條件：4℃,12個(gè)月

用途：主要用于處理過(guò)程中干燥組織的修復(fù)，便于浸蠟等操作。

注意事項(xiàng)：主要由甘油、乙醇、硫酸鹽等組成。

 

 

配制與標(biāo)定的實(shí)驗(yàn)原理：

1、用EDTA二鈉鹽配制EDTA標(biāo)準(zhǔn)溶液的原因；

EDTA是四元酸，是一種白色晶體粉末，常用H4Y表示，溶解度很小，室溫溶解度為0.02g/100g H2O。

2、標(biāo)定EDTA標(biāo)準(zhǔn)溶液的工作基準(zhǔn)試劑，基準(zhǔn)試劑的預(yù)處理：稱(chēng)量前一般應(yīng)先用稀鹽酸洗去氧化層，然后用水洗凈，烘干。

配制步驟：

1、取適量鋅片放在100mL燒杯中，用0.1mol·L-1 HCl溶液（自配）清洗1min，再用自來(lái)水、純水洗凈，烘干、冷卻。

2、用直接稱(chēng)量法在干燥小燒杯中準(zhǔn)確稱(chēng)取0.15～0.2g Zn，蓋好小表面皿。

3、用滴管從燒杯口加入5mL 1:1 鹽酸，待Zn溶解后吹洗表面皿、杯壁，小心地將溶液轉(zhuǎn)移至250mL容量瓶中，用純水稀釋至標(biāo)線(xiàn)，搖勻。

 

 

實(shí)驗(yàn)方法與判定：

1.對(duì)照品溶液的穩(wěn)定性

2.對(duì)照品溶液的配制：精密量取腦對(duì)照品適量，加無(wú)水乙醇制成每1ml含腦1mg的溶液，作為對(duì)照品溶液。

3.色譜條件：以交聯(lián)鍵合聚乙二醇為固定相的毛細(xì)管柱；柱溫120℃；進(jìn)樣口溫度250℃；檢測(cè)器溫度250℃；分流進(jìn)樣，分流比10:1。理論塔板數(shù)按腦計(jì)算應(yīng)不低于10000。

4.實(shí)驗(yàn)方法：配制的對(duì)照品溶液，一份置冷處保存，一份置室溫中保存，在第1、3、7、10、15天重新配制一份對(duì)照品溶液，三種儲(chǔ)備液同時(shí)稀釋制成每1ml中約含50ug的溶液。照氣相色譜法，并依據(jù)新對(duì)照品的峰面積計(jì)算原對(duì)照品溶液的含量。記錄下來(lái)，保證原對(duì)照品溶液含量在考察期相對(duì)平均偏差不超過(guò)2.0%，驗(yàn)證對(duì)照品溶液在使用期內(nèi)穩(wěn)定可靠。

青藍(lán)鏈霉菌彈性蛋白結(jié)合蛋白Fcn2抗體Human CCDC88A (Girdin) ELISA KIT牛結(jié)核桿菌(MTB)抗體(IgM)免疫試劑盒

假堅(jiān)強(qiáng)芽孢桿菌范可綜合征相關(guān)蛋白FAN1抗體Human COL13A1 (Collagen alpha-1(XIII) chain) ELISA KIT牛結(jié)核桿菌(MTB)抗體(IgG)免疫試劑盒

釀酒酵母范可貧血組蛋白A抗體Human CRAMP1 (Protein cramped-like) ELISA KIT牛結(jié)合珠蛋白/觸珠蛋白(Hpt/HP)免疫試劑盒

大腸埃希氏菌卷曲蛋白3抗體Human FOXC2(Forkhead box protein C2) ELISA Kit牛窖蛋白Caveolin-1(CAV1)免疫試劑盒

Acinetobacter toroneri分裂周期樣蛋白20抗體Human COL13A1 (Collagen alpha-1(XIII) chain) ELISA KIT牛降鈣(CALCA/CALC)免疫試劑盒

蠟狀芽孢桿菌鐵氧化還原蛋白還原抗體Human CSF2RA (Granulocyte-macrophage colony-stimulating factor receptor subunit alpha) ELISA KIT牛堿性成纖維生長(zhǎng)因子/肝結(jié)合生長(zhǎng)因子2(FGF2)免疫試劑盒

瓜類(lèi)炭疽盤(pán)孢菌*磷化堿性成纖維生長(zhǎng)因子受體1抗體Human CCDC88A (Girdin) ELISA KIT牛甲狀腺(T4)免疫試劑盒

湘坪鏈霉菌甲精結(jié)合蛋白17抗體Human CEP85 (Centrosomal protein of 85 kDa) ELISA KIT牛甲狀腺結(jié)合球蛋白(TBG)免疫試劑盒

鹽地桿菌泛樣核糖體蛋白S30/MNSF-β抗體Human CINP (Cyclin-dependent kinase 2-interacting protein) ELISA KIT牛肌激同工MB(CK-MB)免疫試劑盒

胡椒枯萎病F-box蛋白2抗體Human CXCR6 (C-X-C chemokine receptor type 6) ELISA KIT牛肌激同工BB(CK-BB)免疫試劑盒

短小芽孢桿菌F-box蛋白45抗體Human DAB1(Disabled homolog 1) ELISA Kit?；罨疉(ACV-A)免疫試劑盒

嗜鹽噬冷菌法基二磷合抗體Human CLCC1 (Chloride channel CLIC-like protein 1) ELISA KIT牛黃體生成(LH)免疫試劑盒

薛瓦酵母IgG-Fc片斷受體轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白α抗體Human CMKLR1 (Chemokine-like receptor 1) ELISA KIT牛(cAMP)免疫試劑盒

小孢擬盤(pán)多毛孢酰基合成4抗體Human CHKA (Choline kinase alpha) ELISA KIT牛環(huán)磷鳥(niǎo)苷(cGMP)免疫試劑盒

水稻節(jié)桿菌補(bǔ)體因子D抗體Human CDCA7L (Cell division cycle-associated 7-like protein) ELISA KIT牛核心蛋白聚糖(DCN)免疫試劑盒

膠孢補(bǔ)體因子I輕鏈抗體Human CGREF1 (Cell growth regulator with EF hand domain protein 1) ELISA KIT牛過(guò)氧化脂質(zhì)(LPO)免疫試劑盒

: HBUM82306資源名稱(chēng): 鏈霉菌 質(zhì)量規(guī)格：Standard for GC, ≥98.5% (GC)維生C

黑色鏈霉菌Streptomyces│niger 質(zhì)量規(guī)格：standard for GC,≥99%(GC)維生B6

木豆根瘤菌Rhizobium│sp. (Cajanus rhizabia) 質(zhì)量規(guī)格：standard for GC,≥99.5%(GC)維生B2
干燥組織修復(fù)液Human B-Cell Linker Protein,BLNK ELISA Kit  人B細(xì)胞連接蛋白規(guī)格： 48T

Human urease related protein C,UreC ELISA Kit  人尿sumei相關(guān)蛋白C規(guī)格： 48T

Human adaptor molecule apoptotic peptidase activating factor 1,APAF1 ELISA Kit  人銜接蛋白mei活化因子1規(guī)格： 48T

Human ankyrin B,Ank-B ELISA Kit  人錨蛋白B規(guī)格： 48T

Human latent membrane protein-1,LMP-1 ELISA Kit  人潛伏膜蛋白1規(guī)格： 48T

使用方法：

1.  常用篩選濃度

注意：用來(lái)篩選穩(wěn)轉(zhuǎn)株的工作濃度需要根據(jù)細(xì)胞類(lèi)型，培養(yǎng)基，生長(zhǎng)條件和細(xì)胞代謝率而變化，推薦使用濃度為50-1000μg/mL。對(duì)于第一次使用的實(shí)驗(yàn)體系建議通過(guò)建立殺滅曲線(xiàn)（kill curve），即劑量反應(yīng)性曲線(xiàn)，來(lái)確定最佳篩選濃度。

一般而言，哺乳動(dòng)物細(xì)胞50-500μg/mL；細(xì)菌/植物細(xì)胞20-200μg/mL；真菌300-1000μg/mL。

2. 殺滅曲線(xiàn)的建立

注意：為了篩選得到穩(wěn)定表達(dá)目的蛋白的細(xì)胞株，需要確定能夠殺死未轉(zhuǎn)染宿主細(xì)胞的抗生素濃度，可通過(guò)建立殺滅曲線(xiàn)（劑量反應(yīng)曲線(xiàn)）來(lái)實(shí)現(xiàn)，至少選擇5個(gè)濃度。

1）  第一天：未轉(zhuǎn)化的細(xì)胞按照20-25%的細(xì)胞密度鋪在合適的培養(yǎng)板上，37℃，CO2培養(yǎng)過(guò)夜；注：對(duì)于需要更高密度來(lái)檢測(cè)活力的細(xì)胞，可增加接種量。

2）  根據(jù)細(xì)胞類(lèi)型，設(shè)定合適范圍內(nèi)的濃度梯度。以哺乳動(dòng)物細(xì)胞為例，可設(shè)定50，100，250，500，750，1000μg/mL。先用去離子水或者PBS buffer按照1:10的比例將母液稀釋到5 mg/ml，然后按照下表稀釋到相應(yīng)濃度的工作液。

3）  第二天：替換舊的培養(yǎng)基，換用新鮮配制的含有相應(yīng)濃度藥物的培養(yǎng)基。每個(gè)濃度做三個(gè)平行孔。

4）  接下來(lái)每3-4天更換新的含藥物培養(yǎng)基。

5）  按照固定的周期（如每2天）進(jìn)行活細(xì)胞計(jì)數(shù)來(lái)確定阻止未轉(zhuǎn)染細(xì)胞生長(zhǎng)的恰當(dāng)濃度。選擇在理想的天數(shù)（通常是7-10天）內(nèi)能夠殺死絕大多數(shù)細(xì)胞的濃度為穩(wěn)定轉(zhuǎn)染細(xì)胞篩選用的工作濃度。

3.   穩(wěn)定轉(zhuǎn)染細(xì)胞的篩選

1）  轉(zhuǎn)染48h后，用含有適當(dāng)濃度的潮霉素B篩選培養(yǎng)基來(lái)傳代細(xì)胞（直接傳代或者稀釋后傳代）。

注意：細(xì)胞處于活躍分裂狀態(tài)時(shí)抗生素的殺傷。則當(dāng)細(xì)胞過(guò)于稠密，其效率會(huì)降低。為了得到較好的篩選效果，最好將細(xì)胞稀釋至豐度不超過(guò)25%

2）  每隔3-4天更換含有藥物的篩選培養(yǎng)液。

3）  篩選7天后觀(guān)察并評(píng)估細(xì)胞克?。洌┑男纬汕闆r。集落的形成可能還需要一周或者更多的時(shí)間，這取決于宿主細(xì)胞類(lèi)型，轉(zhuǎn)染，以及篩選效果。

4）   挑取并轉(zhuǎn)移5-10個(gè)抗性克隆于35mm細(xì)胞培養(yǎng)板，繼續(xù)用含藥物的篩選培養(yǎng)液維持培養(yǎng)7天。

5）   之后更換正常培養(yǎng)基培養(yǎng)即可。