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堿性蛋白染色液

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更新時間:2022-07-06 10:46:26瀏覽次數(shù):256

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產(chǎn)品簡介

供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 2×50ml
貨號 FS-R6689 應(yīng)用領(lǐng)域 化工
主要用途 僅供科研 貨號 FS-R6689
堿性蛋白染色液公司正在銷售的產(chǎn)品:豚鼠腺苷酸環(huán)化酶1(ADCY1)試劑盒 Anti-MX2 Antibody鋅指FYVE結(jié)構(gòu)域蛋白27抗體
豚鼠間隙連接蛋白40(CX40)試劑盒 Anti-MYB Antibody受精卵抑制蛋白1抗體
豚鼠嗜環(huán)蛋白/親環(huán)素A(CYPA)試劑盒 Anti-MXD1 Antibody鋅指蛋白471抗體
豚鼠彈性蛋白微纖維界面蛋白1(EMILIN 1)試劑盒Anti-M

詳細(xì)介紹

公司產(chǎn)品僅用于科研具有質(zhì)量可靠、效果穩(wěn)定、靈敏度高、操作簡單、易保存等特點,咨詢并訂購!

產(chǎn)品名稱

規(guī)格

貨號

堿性蛋白染色液

2×50ml

FS-R6689

產(chǎn)品分類:細(xì)胞染色

儲存條件:室溫,避光,12個月

用途:顯示細(xì)胞中堿性蛋白,尤其是組蛋白

注意事項:細(xì)胞核大部分被染成綠色。

63.jpg 

 

配制與標(biāo)定的實驗原理:

1、用EDTA二鈉鹽配制EDTA標(biāo)準(zhǔn)溶液的原因;

EDTA是四元酸,是一種白色晶體粉末,常用H4Y表示,溶解度很小,室溫溶解度為0.02g/100g H2O。

2、標(biāo)定EDTA標(biāo)準(zhǔn)溶液的工作基準(zhǔn)試劑,基準(zhǔn)試劑的預(yù)處理:稱量前一般應(yīng)先用稀鹽酸洗去氧化層,然后用水洗凈,烘干。

配制步驟:

1、取適量鋅片放在100mL燒杯中,用0.1mol·L-1 HCl溶液(自配)清洗1min,再用自來水、純水洗凈,烘干、冷卻。

2、用直接稱量法在干燥小燒杯中準(zhǔn)確稱取0.15~0.2g Zn,蓋好小表面皿。

3、用滴管從燒杯口加入5mL 1:1 鹽酸,待Zn溶解后吹洗表面皿、杯壁,小心地將溶液轉(zhuǎn)移至250mL容量瓶中,用純水稀釋至標(biāo)線,搖勻。

13.jpg 

 

實驗方法與判定:

1.對照品溶液的穩(wěn)定性

2.對照品溶液的配制:精密量取腦對照品適量,加無水乙醇制成每1ml含腦1mg的溶液,作為對照品溶液。

3.色譜條件:以交聯(lián)鍵合聚乙二醇為固定相的毛細(xì)管柱;柱溫120℃;進樣口溫度250℃;檢測器溫度250℃;分流進樣,分流比10:1。理論塔板數(shù)按腦計算應(yīng)不低于10000。

4.實驗方法:配制的對照品溶液,一份置冷處保存,一份置室溫中保存,在第1、3、7、10、15天重新配制一份對照品溶液,三種儲備液同時稀釋制成每1ml中約含50ug的溶液。照氣相色譜法,并依據(jù)新對照品的峰面積計算原對照品溶液的含量。記錄下來,保證原對照品溶液含量在考察期相對平均偏差不超過2.0%,驗證對照品溶液在使用期內(nèi)穩(wěn)定可靠。

前杯莧甾 Metalaxyl solutionGATA結(jié)合蛋白5抗體包裝1g

前胡(標(biāo)準(zhǔn)品) Fenitrothion生長分化因子9抗體包裝250mg

芡實(標(biāo)準(zhǔn)品)  (2-Chloroethyl)trimethylammonium chloride促代謝型谷受體4抗體包裝5g

茜草(標(biāo)準(zhǔn)品) BrassinolideGST標(biāo)簽蛋白抗體包裝25g

茜雙酯(標(biāo)準(zhǔn)品) Acetamiprid磷脂?;鞍拙厶?4抗體包裝5g

羌活(寬葉羌活)(標(biāo)準(zhǔn)品) Carbendazim眼鏡蛇蛇蛋白抗體包裝1g

羌活(標(biāo)準(zhǔn)品) CarbarylGalNAc-T14抗體包裝250mg

羌活(標(biāo)準(zhǔn)品) Stachydrine hydrochloride骨形態(tài)形成蛋白拮抗蛋白2抗體包裝500mg

羥基紅花黃色A(標(biāo)準(zhǔn)品) Isosilybin甘油?;D(zhuǎn)移4抗體包裝1g

羥基積雪草苷(標(biāo)準(zhǔn)品) Theaflavin 3,3′-digallate葡萄糖轉(zhuǎn)運蛋白12抗體包裝250mg

羥基積雪草(標(biāo)準(zhǔn)品) Palmatine chloride hydrate顆粒溶抗體包裝1g

羥基酪;3,4-二羥基乙(標(biāo)準(zhǔn)品) N,O-Bis(trimethylsilyl)acetamide腦膠質(zhì)瘤相關(guān)蛋白抗體(鋅指蛋白5)包裝5g

羥基茜草/紅紫(標(biāo)準(zhǔn)品) N,O-Bis(trimethylsilyl)trifluoroacetamide生長調(diào)節(jié)致癌基因gamma(GROγ)抗體包裝1g

喬松(標(biāo)準(zhǔn)品) TMS-Imidazole (=N-Trimethylsilylimidazole)G蛋白信號調(diào)節(jié)蛋白2抗體包裝5g

茄(標(biāo)準(zhǔn)品) N,O-Bis(trimethylsilyl)acetamideG蛋白偶聯(lián)受體GPR142蛋白抗體包裝100g

嗜氣單胞菌Aeromonas│hydrophila 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BRⅦ試劑盒馬錢苷;Loganin

炭疽芽孢桿菌Bacillus│anthracis 質(zhì)量規(guī)格:>98%Ⅴ試劑盒蒙花苷;Linarin

食芽孢桿菌Bacillus benzoevorans Pichinoty et al. 1987 質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品Ⅱ試劑盒馬錢苷;Loganic acid
堿性蛋白染色液LI-cadherin(liver-intestine cadherin)  肝腸鈣粘連蛋白抗原規(guī)格: 0.5mg

PDCD4(programmed cell death 4)  凋亡相關(guān)蛋白4抗原規(guī)格: 0.5mg

TFAR19(TF-1 cell apoptsis-related gene 19)  凋亡相關(guān)蛋白TFAR19抗原規(guī)格: 0.5mg

PCNA(phosphos Dyr211)peptide  磷suan化增殖細(xì)胞核多肽抗原規(guī)格: 0.5mg

PCX/PODXL(Podocalyxin)  足細(xì)胞特異蛋白抗原規(guī)格: 0.5mg

使用方法:

1.  常用篩選濃度

注意:用來篩選穩(wěn)轉(zhuǎn)株的工作濃度需要根據(jù)細(xì)胞類型,培養(yǎng)基,生長條件和細(xì)胞代謝率而變化,推薦使用濃度為50-1000μg/mL。對于第一次使用的實驗體系建議通過建立殺滅曲線(kill curve),即劑量反應(yīng)性曲線,來確定最佳篩選濃度。

一般而言,哺乳動物細(xì)胞50-500μg/mL;細(xì)菌/植物細(xì)胞20-200μg/mL;真菌300-1000μg/mL。

2. 殺滅曲線的建立

注意:為了篩選得到穩(wěn)定表達目的蛋白的細(xì)胞株,需要確定能夠殺死未轉(zhuǎn)染宿主細(xì)胞的抗生素濃度,可通過建立殺滅曲線(劑量反應(yīng)曲線)來實現(xiàn),至少選擇5個濃度。

1)  第一天:未轉(zhuǎn)化的細(xì)胞按照20-25%的細(xì)胞密度鋪在合適的培養(yǎng)板上,37℃,CO2培養(yǎng)過夜;注:對于需要更高密度來檢測活力的細(xì)胞,可增加接種量。

2)  根據(jù)細(xì)胞類型,設(shè)定合適范圍內(nèi)的濃度梯度。以哺乳動物細(xì)胞為例,可設(shè)定50,100,250,500,750,1000μg/mL。先用去離子水或者PBS buffer按照1:10的比例將母液稀釋到5 mg/ml,然后按照下表稀釋到相應(yīng)濃度的工作液。

3)  第二天:替換舊的培養(yǎng)基,換用新鮮配制的含有相應(yīng)濃度藥物的培養(yǎng)基。每個濃度做三個平行孔。

4)  接下來每3-4天更換新的含藥物培養(yǎng)基。

5)  按照固定的周期(如每2天)進行活細(xì)胞計數(shù)來確定阻止未轉(zhuǎn)染細(xì)胞生長的恰當(dāng)濃度。選擇在理想的天數(shù)(通常是7-10天)內(nèi)能夠殺死絕大多數(shù)細(xì)胞的濃度為穩(wěn)定轉(zhuǎn)染細(xì)胞篩選用的工作濃度。

3.   穩(wěn)定轉(zhuǎn)染細(xì)胞的篩選

1)  轉(zhuǎn)染48h后,用含有適當(dāng)濃度的潮霉素B篩選培養(yǎng)基來傳代細(xì)胞(直接傳代或者稀釋后傳代)。

注意:細(xì)胞處于活躍分裂狀態(tài)時抗生素的殺傷。則當(dāng)細(xì)胞過于稠密,其效率會降低。為了得到較好的篩選效果,最好將細(xì)胞稀釋至豐度不超過25%

2)  每隔3-4天更換含有藥物的篩選培養(yǎng)液。

3)  篩選7天后觀察并評估細(xì)胞克隆(集落)的形成情況。集落的形成可能還需要一周或者更多的時間,這取決于宿主細(xì)胞類型,轉(zhuǎn)染,以及篩選效果。

4)   挑取并轉(zhuǎn)移5-10個抗性克隆于35mm細(xì)胞培養(yǎng)板,繼續(xù)用含藥物的篩選培養(yǎng)液維持培養(yǎng)7天。

5)   之后更換正常培養(yǎng)基培養(yǎng)即可。

 


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