詳細介紹
商品介紹:
測定意義葡萄糖不僅是細胞能量代謝的主要底物,而且其代謝中間產(chǎn)物是生物合成的重要底物。植物可通過光合作用產(chǎn)生葡萄糖。就哺乳動物而言,葡萄糖不僅是大腦神經(jīng)系統(tǒng)、肌肉、脂肪組織等的能源,而且與還原性輔酶、乳糖和乳脂的合成密切相關(guān)。測定原理葡萄糖氧化酶催化葡萄糖氧化成葡萄糖酸,并產(chǎn)生過氧化氫;過氧化物酶催化過氧化氫氧化4-氨基安替bi林偶聯(lián)酚,生成有色化合物,在505 nm有特征吸收峰。需自備的儀器和用品可見分光光度計、水浴鍋、可調(diào)式移液器、1mL玻璃比色皿、研缽和蒸餾水 |
商品屬性:
產(chǎn)品名稱 | |
檢測方法 | 紫外分光光度法 |
產(chǎn)品規(guī)格 | 50管/48樣 |
產(chǎn)品貨號 | AS6321165 |
試劑的組成和配制:
酸性提取液:液體50mL×1瓶,4℃保存;堿性提取液:液體50mL×1瓶,4℃保存;試劑一:液體10 mL×1瓶,4℃保存;試劑二:液體3 mL×1瓶,4℃保存;試劑三:粉劑×1瓶,-20 ℃保存,用時加入3mL蒸餾水,混勻,用不完的試劑4℃保存一周;試劑四:粉劑×1瓶,4 ℃保存,用時加入3mL蒸餾水,混勻,用不完的試劑4℃保存一周;試劑五:液體3.6mL×1瓶,4 ℃保存;試劑六:液體30mL×1瓶,4 ℃保存;試劑七:液體50mL×1瓶,4 ℃保存。
自備儀器和用品:
可見分光光度計、臺式離心機、移液器、1 ml玻璃比色皿、研缽、冰和蒸餾水。
NAD+和NADH的提?。?/span>
1、血清(漿)中NAD+和NADH的提取 NAD+的提?。喊凑昭澹{)體積(ml):酸性提取液體積(ml)為1:5~10的比例(建 議取約0.1ml血清(漿),加入1ml酸性提取液),95℃水浴5min(蓋緊,以防止水分散失); 冰浴中冷卻后,10000g 4 ℃離心10min;取500μl上清液,加入500μl堿性提取液使之中 和,混勻,10000g 4 ℃離心10min,取上清,置冰上待測。 NADH的提取:按照血清(漿)體積(ml):堿性提取液體積(ml)為1:5~10的比例(建 議取約0.1ml血清(漿),加入1ml堿性提取液),95℃水浴5min(蓋緊,以防止水分散失); 冰浴中冷卻后,10000g 4 ℃離心10min;取500μl上清液,加入500μl酸性提取液使之中 和,混勻,10000g 4 ℃離心10min,取上清,置冰上待測。 | 2、組織中NAD+和NADH的提取: NAD+的提?。喊凑战M織質(zhì)量(g):酸性提取液體積(ml)為1:5~10的比例(建議取約0.1g 組織,加入1ml酸性提取液),冰浴研磨,95℃水浴5min(蓋緊,以防止水分散失);冰浴 中冷卻后,10000g 4 ℃離心10min;取500μl上清液,加入500μl堿性提取液使之中和,混勻,10000g 4 ℃離心10min,取上清,置冰上待測。 NADH的提?。喊凑战M織質(zhì)量(g):堿性提取液體積(ml)為1:5~10的比例(建議取約0.1g 組織,加入1ml堿性提取液),冰浴研磨,95℃水浴5min(蓋緊,以防止水分散失);冰浴 中冷卻后,10000g 4 ℃離心10min;取500μl上清液,加入500μl酸性提取液使之中和, 混勻,10000g 4 ℃離心10min,取上清,置冰上待測。 | 3、細胞或細菌中NAD+和NADH的提?。?/span> NAD+的提取:先收集細胞或細菌到離心管內(nèi),棄上清,按照細菌或細胞數(shù)量(104個):酸性 提取液體積(ml)為500~1000:1的比例(建議500萬細菌或細胞加入1ml酸性提取液), 超聲波破碎(冰浴,功率20%或200W,超聲3s,間隔10s,重復(fù)30次),95℃水浴5min (蓋緊,以防止水分散失);冰浴中冷卻后,10000g 4 ℃離心10min;取500μl上清液,加 入500μl堿性提取液使之中和,混勻,10000g 4 ℃離心10min,取上清,置冰上待測。 NADH的提?。合仁占毎蚣毦诫x心管內(nèi),棄上清,按照細菌或細胞數(shù)量(104個):堿 性提取液體積(ml)為500~1000:1的比例(建議500萬細菌或細胞加入1ml堿性提取液), 超聲波破碎(冰浴,功率20%或200W,超聲3s,間隔10s,重復(fù)30次),95℃水浴5min (蓋緊,以防止水分散失);冰浴中冷卻后,10000g 4 ℃離心10min;取500μl上清液,加 入500μl酸性提取液使之中和,混勻,10000g 4 ℃離心10min,取上清,置冰上待測。 |
ADH測定操作:
1. 分光光度計預(yù)熱30 min,調(diào)節(jié)波長到340 nm,蒸餾水調(diào)零。
2. 試劑二在25℃水浴中保溫30 min。
3. 空白管:在1mL石英比色皿中依次加入100μL蒸餾水、800μL試劑二和100μL試劑四,迅速混勻后于340nm測定吸光值變化,分別記錄15s和75s時吸光值,分別記為A1和A2。△A空白管=A1-A2。。
4. 測定管:在1mL石英比色皿中依次加入100μL上清液、800μL試劑二和100μL試劑四,迅速混勻后于340nm測定吸光值變化,分別記錄15s和75s時吸光值,分別記為A3和A4。△A測定管=A3-A4。
注意:空白管只需測定一次。
黃芩苷(95%)英文名: lurium standard糖蛋白C抗體包裝1g
黃芩苷(標準品)英文名: Thulium standardγ基丁運載蛋白1抗體包裝5g
黃芩英文名: Vanadium standardGATA結(jié)合蛋白2抗體包裝1g
黃芩(標準品)英文名: Vanadium standard生長休止特定蛋白7抗體包裝5g
黃藤英文名: Ytterbium standard磷化谷受體1抗體包裝1g
黃芫花(標準品)英文名: Ytterbium standardG蛋白偶聯(lián)受體116抗體包裝25g
黃楊堿(標準品)英文名: Zinc standard鳥苷調(diào)節(jié)蛋白12抗體包裝5g
黃鐘花醌;帕 (標準品)英文名: Zinc standard磷化膠質(zhì)纖維性蛋白抗體包裝1g
灰氈毛忍冬皂苷英文名: Sodium dodecylbenzenesulfonate solution磷化G基丁B型受體2抗體包裝250mg
灰氈毛忍冬皂苷乙(標準品)英文名: Sulfamethizole磷化G基丁B型受體2抗體包裝1g
茴芹內(nèi)酯(標準品)英文名: Diphenyl sulfone生長分化因子10抗體(TGF-β超家族10)包裝25g
茴香腦英文名: DimethoateG蛋白偶聯(lián)受體LOC51210蛋白抗體包裝5g
茴香對羥基乙酯英文名: Dicofol standard solution生長抑制蛋白34包裝1g
火麻仁(標準品)英文名: Dicofol standard solution生長激抗體包裝25g
火炭母(標準品)英文名: DiniconazoleGDP甘露糖焦磷化抗體包裝5g
鏈霉菌Streptomyces│sp. 質(zhì)量規(guī)格:含量測定脫氫7家族,成員A1試劑盒蒲公英甾;Taraxasterol
大腸埃希氏菌Escherichia│coli 質(zhì)量規(guī)格:>98%,二合物可用于培養(yǎng)糖還原試劑盒派立辛;Parishin
大腸埃希菌Escherichia│coli 質(zhì)量規(guī)格:含量測定縮試劑盒歐夾竹桃苷;Oleandrin
3磷酸甘油醛脫氫酶(GAPDH)測試盒50管/48樣畢赤酵母 9-BBN三氟甲磺酸酯Gremlin-2蛋白Elisa
枯草芽孢桿 N-甲基酮血管舒緩激肽Elisa
貝倫格葡萄座腔梨生專化型 促性腺 來源于絕經(jīng)期婦女尿液含NLR家族CARD域蛋白4Elisa
Rhizobium nepotum 1-苯基-1-環(huán)羧酸可溶性淀粉前體蛋白βElisa
冷生明串珠 2,2-二甲氧基乙酰線粒體呼吸鏈復(fù)合物ⅤElisa
少根根霉 檸檬酸埃滋蛋白Elisa
北方蜜環(huán) (R)-1-((S)-2-Diphenylphosphino)ferrocenylethylamin黑色瘤標記物Elisa
海洋桿 檸檬酸鋅 二水合物強啡肽AElisa
副豬嗜血桿 羥基乙酰谷氨酰果糖-6-磷酸轉(zhuǎn)氨2Elisa
Bacillus subtilis subsp. inaquosorum (S)-(+)-2-甲基吡咯烷周期蛋白依賴性激6Elisa
柱枝雙孢霉 (叔丁氧基羰基)三苯基溴化叉頭框蛋白O1Elisa
細鏈格孢 5-氨基嘧啶真核翻譯起始因子4A3Elisa
肉桂鏈霉 (R)-(-)-二氫-5-(對-甲苯磺酰氧基)-2(3H)-酮周期蛋白依賴性激4Elisa
總狀毛霉 3-溴-5-甲酸Elisa
福山假絲酵母 Urea-13C表皮生長因子受體3Elisa
注意事項:
①加入試劑的順序應(yīng)一致,以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時間一樣。
②使用干凈的塑料容器配置洗滌液。
③按照說明書中標明的時間、加液的量及順序進行溫育操作。
④底物A應(yīng)揮發(fā),避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感,避免長時間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實驗完成后應(yīng)立即讀取OD值。
⑤洗滌酶標板時應(yīng)充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標反應(yīng)孔中吸水。
⑥使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時,避免使用帶金屬部分的加樣器 。
⑦實驗中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質(zhì)。
⑧試劑應(yīng)按標簽說明書儲存,使用前恢復(fù)到室溫。稀稀過后的標準品應(yīng)丟棄,不可保存。
⑨不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。