詳細介紹
試劑的組成和配制:
酸性提取液:液體50mL×1瓶,4℃保存;堿性提取液:液體50mL×1瓶,4℃保存;試劑一:液體10 mL×1瓶,4℃保存;試劑二:液體3 mL×1瓶,4℃保存;試劑三:粉劑×1瓶,-20 ℃保存,用時加入3mL蒸餾水,混勻,用不完的試劑4℃保存一周;試劑四:粉劑×1瓶,4 ℃保存,用時加入3mL蒸餾水,混勻,用不完的試劑4℃保存一周;試劑五:液體3.6mL×1瓶,4 ℃保存;試劑六:液體30mL×1瓶,4 ℃保存;試劑七:液體50mL×1瓶,4 ℃保存。
自備儀器和用品:
可見分光光度計、臺式離心機、移液器、1 ml玻璃比色皿、研缽、冰和蒸餾水。
商品介紹:
測定意義 植物細胞壁中的果膠是植物初生細胞壁的主要成分,除了起結構支撐、物質(zhì)運輸?shù)茸饔猛猓€具有抵抗逆境的作用。果膠甲酯化程度影響了細胞壁的堅韌程度及其抗性。 測定原理 果膠甲酯鍵經(jīng)皂化處理后釋放出甲醇,甲醇與2,4-戊二酮反應顯色,在412nm下測定吸光值;同時半乳糖醛酸在70℃下與濃硫酸反應生成5-甲酰基-2-呋喃甲酸,5-甲酰基-2-呋喃甲酸與3,5-二甲基ben酚反應產(chǎn)生有色物質(zhì),在450nm下有最大吸光值。以甲醇生成量與半乳糖醛酸含量的比值代表果膠甲酯化程度。 自備實驗用品及儀器 天平、低溫離心機、酶標儀、96孔板、恒溫水浴鍋、蒸餾水、硫酸。 |
商品屬性:
產(chǎn)品名稱 | |
檢測方法 | 微量法 |
產(chǎn)品規(guī)格 | 100管/96樣 |
產(chǎn)品貨號 | AS6321399 |
NAD+和NADH的提取:
1、血清(漿)中NAD+和NADH的提取 NAD+的提取:按照血清(漿)體積(ml):酸性提取液體積(ml)為1:5~10的比例(建 議取約0.1ml血清(漿),加入1ml酸性提取液),95℃水浴5min(蓋緊,以防止水分散失); 冰浴中冷卻后,10000g 4 ℃離心10min;取500μl上清液,加入500μl堿性提取液使之中 和,混勻,10000g 4 ℃離心10min,取上清,置冰上待測。 NADH的提?。喊凑昭澹{)體積(ml):堿性提取液體積(ml)為1:5~10的比例(建 議取約0.1ml血清(漿),加入1ml堿性提取液),95℃水浴5min(蓋緊,以防止水分散失); 冰浴中冷卻后,10000g 4 ℃離心10min;取500μl上清液,加入500μl酸性提取液使之中 和,混勻,10000g 4 ℃離心10min,取上清,置冰上待測。 | 2、組織中NAD+和NADH的提?。?/span> NAD+的提取:按照組織質(zhì)量(g):酸性提取液體積(ml)為1:5~10的比例(建議取約0.1g 組織,加入1ml酸性提取液),冰浴研磨,95℃水浴5min(蓋緊,以防止水分散失);冰浴 中冷卻后,10000g 4 ℃離心10min;取500μl上清液,加入500μl堿性提取液使之中和,混勻,10000g 4 ℃離心10min,取上清,置冰上待測。 NADH的提?。喊凑战M織質(zhì)量(g):堿性提取液體積(ml)為1:5~10的比例(建議取約0.1g 組織,加入1ml堿性提取液),冰浴研磨,95℃水浴5min(蓋緊,以防止水分散失);冰浴 中冷卻后,10000g 4 ℃離心10min;取500μl上清液,加入500μl酸性提取液使之中和, 混勻,10000g 4 ℃離心10min,取上清,置冰上待測。 | 3、細胞或細菌中NAD+和NADH的提取: NAD+的提?。合仁占毎蚣毦诫x心管內(nèi),棄上清,按照細菌或細胞數(shù)量(104個):酸性 提取液體積(ml)為500~1000:1的比例(建議500萬細菌或細胞加入1ml酸性提取液), 超聲波破碎(冰浴,功率20%或200W,超聲3s,間隔10s,重復30次),95℃水浴5min (蓋緊,以防止水分散失);冰浴中冷卻后,10000g 4 ℃離心10min;取500μl上清液,加 入500μl堿性提取液使之中和,混勻,10000g 4 ℃離心10min,取上清,置冰上待測。 NADH的提?。合仁占毎蚣毦诫x心管內(nèi),棄上清,按照細菌或細胞數(shù)量(104個):堿 性提取液體積(ml)為500~1000:1的比例(建議500萬細菌或細胞加入1ml堿性提取液), 超聲波破碎(冰浴,功率20%或200W,超聲3s,間隔10s,重復30次),95℃水浴5min (蓋緊,以防止水分散失);冰浴中冷卻后,10000g 4 ℃離心10min;取500μl上清液,加 入500μl酸性提取液使之中和,混勻,10000g 4 ℃離心10min,取上清,置冰上待測。 |
ADH測定操作:
1. 分光光度計預熱30 min,調(diào)節(jié)波長到340 nm,蒸餾水調(diào)零。
2. 試劑二在25℃水浴中保溫30 min。
3. 空白管:在1mL石英比色皿中依次加入100μL蒸餾水、800μL試劑二和100μL試劑四,迅速混勻后于340nm測定吸光值變化,分別記錄15s和75s時吸光值,分別記為A1和A2?!鰽空白管=A1-A2。。
4. 測定管:在1mL石英比色皿中依次加入100μL上清液、800μL試劑二和100μL試劑四,迅速混勻后于340nm測定吸光值變化,分別記錄15s和75s時吸光值,分別記為A3和A4?!鰽測定管=A3-A4。
注意:空白管只需測定一次。
注意事項:
①加入試劑的順序應一致,以保證所有反應板孔溫育的時間一樣。
②使用干凈的塑料容器配置洗滌液。
③按照說明書中標明的時間、加液的量及順序進行溫育操作。
④底物A應揮發(fā),避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感,避免長時間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實驗完成后應立即讀取OD值。
⑤洗滌酶標板時應充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標反應孔中吸水。
⑥使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時,避免使用帶金屬部分的加樣器 。
⑦實驗中不用的板條應立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質(zhì)。
⑧試劑應按標簽說明書儲存,使用前恢復到室溫。稀稀過后的標準品應丟棄,不可保存。
⑨不用的其它試劑應包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。
炭黑曲霉9號染色體開放閱讀框174抗體Human HPX(Hemopexin) ELISA Kit人黑色瘤免疫試劑盒
大腸埃希氏菌6號染色體開放閱讀框64抗體Human TLR5(Toll-like receptor 5) ELISA Kit人黑色免疫試劑盒
類芽孢桿菌屬免疫球蛋白G Fc段受體Ⅱ抗體Human PRKACB(cAMP-dependent protein kinase catalytic subunit beta) ELISA Kit人核因子κB抑制物激β(IKK-β)免疫試劑盒
亞細亞菌屬透明質(zhì)介導游走受體抗體Human ARRB2(Beta-arrestin-2) ELISA Kit人核因子κB抑制物激α(IKK-α)免疫試劑盒
東方伊薩酵母周期樣Y1抗體Human CNN1(Calponin-1) ELISA Kit人核因子κB(NF-κB)免疫試劑盒
根瘤菌周期J抗體Human ProHAMP(Hepcidin prohormone) ELISA Kit人核心結合因子α1,CBFA1/RUNX2 免疫試劑盒
青紫鏈霉菌周期L抗體Human MMP28(Matrix metalloproteinase-28) ELISA Kit人核心蛋白聚糖(DCN)免疫試劑盒
北方蜜環(huán)菌補體C1RL鏈多肽抗體Human CBS(Cystathionine beta-synthase) ELISA Kit人核糖體合成蛋白NSA2同源物(NSA2)免疫試劑盒
釀酒酵母周期M2抗體Human ADAMTS7(A disintegrin and metalloproteinase with thrombospondin motifs 7) ELISA Kit人核糖體蛋白S9(RPS9)免疫試劑盒
鏈霉菌周期T2抗體Human EDA(Ectodysplasin-A) ELISA Kit人核糖體蛋白S25(RPS25)免疫試劑盒
白地霉周期K抗體Human TNC(Tenascin) ELISA Kit人核糖核抑止劑(RNH1/PRI/RNH)免疫試劑盒
天藍褐鏈霉菌抗菌肽CAMP抗體Human IL36A(Interleukin-36 alpha) ELISA Kit人核糖核,核糖核A家族,(肝臟,嗜性粒源性神經(jīng))(RNASE2)免疫試劑盒
釀酒酵母5號染色體開放閱讀框4抗體Human HPX(Hemopexin) ELISA Kit人核糖核(RNASE1/RIB1/RNS1)免疫試劑盒
大腸埃希菌4號染色體開放閱讀框44抗體Human MAPT(Microtubule-associated protein tau) ELISA Kit人核仁纖維蛋白抗體(AFA/snoRNP/U3RNP)免疫試劑盒
膠孢4號染色體開放閱讀框33抗體Human TLR5(Toll-like receptor 5) ELISA Kit人核基質(zhì)蛋白22(NMP-22)免疫試劑盒
pET-23a4號染色體開放閱讀框42抗體Human PRKACB(cAMP-dependent protein kinase catalytic subunit beta) ELISA Kit人核黃激(RFK)免疫試劑盒
Microsphaeropsis arundinisMicrosphaeropsis│arundinis 質(zhì)量規(guī)格:IND紫蘇烯
缺陷短波單胞菌Brevundimonas│diminuta 質(zhì)量規(guī)格:AR;IND苦蒿
立枯絲核菌Thanatephorus│cucumeris (A.B. Frank) Donk 質(zhì)量規(guī)格:0.9西瑞香
果膠甲酯化程度測試盒100管/96樣洲哈茨木霉 4-氟葡萄糖氧化Elisa
奇異變形 2-氟-4-羥基苯甲敏感性脂肪Elisa
鹽城海桿 二(2,6,10-十二碳三烯-1,12-二基)釕(IV)脂蛋白酯Elisa
半軟干酪居真細 1,5-環(huán)辛二烯(六氟乙酰酮)(I)銥肝脂Elisa
大腸埃希氏桿 4-氟苯基苯乙酮強啡肽Elisa
灰黃青霉 5-溴異喹啉血管緊張轉換抑制劑Elisa
枯草芽孢桿 甲基烯酸二環(huán)戊基酯脂肪酸β氧化Elisa
雞油 2-三氟甲基喹啉二酰基甘油?;D移Elisa
冠突曲霉 1-[3-(trifluoromethoxy)phenyl]ethanol硫酸角質(zhì)Elisa
環(huán)狀芽孢桿 5-羥基-1-茚酮鳥核苷酸交換因子4Elisa
葡萄座腔 (R)-(-)-3-甲基-2-丁鳥核苷酸交換因子4Elisa
多粘類芽孢桿 2,2′-聯(lián)嘧啶肥大β類胰蛋白Elisa
蘇云金芽孢桿 4-溴苯甲砜Rhodes激Elisa
枯草芽孢桿 2-(4-溴苯基)咪唑并[1,2-a]吡啶線粒體呼吸鏈復合物IVElisa
果生鏈核盤 2-甲氧基-5-(三氟甲基)苯甲線粒體呼吸鏈復合物VElisa