公司產(chǎn)品僅供科研使用:
商品介紹:
商品介紹 測(cè)定意義: GR是廣泛存在于真核和原核生物中的一種黃素蛋白氧化還原酶,是谷胱甘肽氧化還原循環(huán)的關(guān)鍵酶之一(通常昆蟲中GR被TrxR取代)。GR催化NADPH還原GSSG生成GSH,有助于維持體內(nèi)GSH/GSSG比值。GR在氧化脅迫反應(yīng)中對(duì)活性氧清除起關(guān)鍵作用,此外GR還參與抗壞血酸-谷胱甘肽循環(huán)途徑。 測(cè)定原理: GR能催化NADPH還原GSSG再生GSH,同時(shí)NADPH脫氫生成NADP+;NADPH在340 nm有特征吸收峰,相反NADP+在該波長(zhǎng)無(wú)吸收峰;通過測(cè)定340 nm吸光度下降速率來(lái)測(cè)定NADPH脫氫速率,從而計(jì)算GR活性。 自備儀器和用品: 低溫離心機(jī)、水浴鍋、移液器、紫外分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、微量石英比色皿/96孔板、和蒸餾水 |
常見樣本處理方法:
1、血清(漿)樣品:直接檢測(cè)。
2、細(xì)菌、細(xì)胞或組織樣品的制備: 細(xì)菌或培養(yǎng)細(xì)胞:先收集細(xì)菌或細(xì)胞到離心管內(nèi),離心后棄上清;按照細(xì)菌或細(xì)胞數(shù)量(104個(gè)):提取液體積(mL)為500~1000:1的比例(建議500萬(wàn)細(xì)菌或細(xì)胞加入1mL提取液) ,超聲波破碎細(xì)菌或細(xì)胞(冰浴,功率20%或200W,超聲3s,間隔10s,重復(fù)30次)8000g 4℃離心10min,取上清,置冰上待測(cè)。組織:按照組織質(zhì)量(g) :提取液體積(mL)為1:5~10的比例(建議稱取約0.1g組織,加入1mL提取液),進(jìn)行冰浴勻漿。8000g 4℃離心10min,取上清,置冰上待測(cè)。
產(chǎn)品優(yōu)點(diǎn)如下:
1、快速簡(jiǎn)便:雙試劑,直接操作,快速、簡(jiǎn)便。
2、取樣量微:需要的樣本量是羥胺法的1/10。
3、靈敏度高:檢測(cè)線0.5U/ml,是羥胺法5倍,鄰苯三酚法的200倍
4、穩(wěn)定性好:批內(nèi)CV=5.50%,批間CV=3.32%,試劑盒2~8℃存放3個(gè)月有效。
5、再現(xiàn)性好:變異系數(shù)CV=1.2%。6、回收試驗(yàn): X =102.3%。7、受外界影響因素?。焊蓴_因素少,重復(fù)性強(qiáng)。且特異性強(qiáng),不受類SOD物質(zhì)的干擾8、測(cè)試面廣:可測(cè)動(dòng)物血液、組織、各種體液、灌流液等、各種培養(yǎng)細(xì)胞、細(xì)菌、植物組織、各種水產(chǎn)以及化妝品、保健品等,效果均佳。
測(cè)定步驟:
1.加樣
1. 除包被外都需45度加樣
2.加樣體積要準(zhǔn)確
3.管底加樣,不能加在管壁上
4.加樣時(shí)不能產(chǎn)生氣泡
2.溫浴
1.加標(biāo)本后和加結(jié)合物后,應(yīng)立即放入按規(guī)定的反應(yīng)溫 度的水浴箱。
2.各ELISA板不應(yīng)疊在一起。
3.為避免蒸發(fā),板上應(yīng)加蓋,或?qū)迤椒旁诘撞繅|有濕 紗布的金屬濕盒中。
4.加入底物后,反應(yīng)的時(shí)間和溫度通常不做嚴(yán)格要求。 如室溫高于20℃,ELISA板可避光放在實(shí)驗(yàn)臺(tái)上,以便 不時(shí)觀察,待對(duì)照管顯色適當(dāng)時(shí),即可終止酶反應(yīng)。
3.洗滌
1.洗滌在ELISA過程中不是反應(yīng)步驟,但卻 是決定實(shí)驗(yàn)成敗的關(guān)鍵。
2.目的是洗去反應(yīng)液中沒有與固相抗原或 抗體結(jié)合的物質(zhì)以及在反應(yīng)過程中非特 異性吸附于固相載體的干擾物質(zhì)。
4.讀板
1.陰性對(duì)照顏色極淺,在定性測(cè)定中一般 可采用目視比色。
2.如用酶標(biāo)儀測(cè)定結(jié)果,準(zhǔn)確性決定于 ELISA板底的平整與透明度、酶標(biāo)儀的質(zhì) 量和軟件的算法。
白介1可溶性受體Ⅱ(IL-1sRⅡ)英文名:IL-1sRⅡ ELISA Kit炭疽桿菌抗體包裝1g
白介1可溶性受體Ⅰ(IL-1sRⅠ)英文名:IL-1sRⅠ ELISA Kit腎上腺皮質(zhì)發(fā)育異常蛋白抗體包裝1g
白介1β前體(pro-IL1B)英文名:pro-IL1B ELISA Kit血管緊張Ⅱ1A型受體抗體包裝250mg
白介1β(IL-1β)英文名:IL-1β ELISA KitABI1/SSH3BP1蛋白抗體包裝25g
白介1β(IL-1β)英文名:IL-1β ELISA Kit乙?;M蛋白H1b抗體包裝5g
白介1α(IL-1α)英文名:IL-1α ELISA Kit磷化雄激受體抗體包裝1g
白介1α(IL-1α)英文名:IL-1α ELISA Kit多功能DNA修復(fù)抗體包裝5g
白介18結(jié)合蛋白(IL-18BP)英文名:IL-18BP ELISA KitAP2關(guān)聯(lián)激1抗體包裝1g
白介18(IL-18)英文名:IL-18 ELISA Kit通道蛋白1抗體包裝200mg
白介18(IL-18)英文名:IL-18 ELISA KitAATK凋亡關(guān)聯(lián)酪激抗體包裝100mg
白介17A(IL-17A)英文名:IL-17A ELISA KitATP結(jié)合蛋白家族5抗體包裝25g
白介17(IL-17)英文名:IL-17 ELISA KitN-基DNA糖基化包裝5g
白介16(IL-16)英文名:IL-16 ELISA KitAU5 tag標(biāo)簽抗體包裝1g
白介15(IL-15)英文名:IL-15 ELISA Kit鈣離子ATP通道蛋白抗體包裝5g
白介13(IL-13)英文名:IL-13 ELISA Kit果桃α-L-阿伯糖苷抗體包裝1g
磷化促腎上腺皮質(zhì)激ACTH抗體基質(zhì)金屬蛋白10(MMP10)ELR510444是新型微管阻斷劑,抑制MDA-MB-231增殖的IC50值為30.9nM,P-gp底物分子。
谷胱甘肽還原酶(GR)測(cè)試盒100管/96樣蠟樣芽孢桿 N-3,4-二苯(基)硫脲抗肝腎微粒體抗體Elisa
板栗蛇孢日規(guī)殼 4-叔丁基苯基異酸酯抗肝PF4復(fù)合物抗體;HIT抗體Elisa
高加索異常倚囊霉 5-溴-2-甲基-4-硝基-1H-咪唑抗肝特異性脂蛋白抗體Elisa
外來(lái)毛霉橙色變種 2--1,3-二溴苯抗肝膜抗體Elisa
累四菲鏈霉 反-4,4'-二溴芪抗核抗體Elisa
鞘氨桿屬 5--2-并惡唑抗核周因子抗體Elisa
三葉草根瘤 4-異喹啉酸抗環(huán)瓜肽抗體Elisa
谷棒桿 溴化1-癸基-3-甲基咪唑抗肌聯(lián)蛋白抗體Elisa
黃灰鏈霉 5-甲基噻吩-2-羧酸抗甲型肝炎病IgG抗體Elisa
云芝栓孔(變色栓) 4-溴-2-氟芐抗甲型肝炎病IgM抗體Elisa
鐘器腐霉 1,4-二硝基咪唑抗甲狀腺過氧化物抗體Elisa
黑曲霉 啶??辜谞钕偾虻鞍卓贵wElisa
頭孢屬 5-甲氧基-2-甲抗甲狀腺微粒體抗體Elisa
類諾氏 2,3-二-4-抗角蛋白絲聚集;絲集蛋白抗體Elisa
點(diǎn)枝頂孢 1-甲基-3-乙酸抗酸性磷酸Elisa
實(shí)驗(yàn)方法學(xué):
一、肝素的配制:
市售肝素凍干粉140單位/mg,1克瓶裝,每瓶140,000單位,稱取0.1克肝素凍干粉,加生理鹽水5ml,配成2800單位/ml。取50~100μl濕潤(rùn)管壁,可抗凝人血3~5ml,血液不會(huì)凝固。老鼠血易凝固,所以最好更濃一些??梢匀?.1克肝素凍干粉,加3ml生理鹽水溶解后,取50~100μl,可抗凝鼠血2~4ml。
肝素抗凝管的制備:取0.1克肝素凍干粉,加2.5ml生理鹽水。取100μl~150μl滴入塑料或玻璃管中,濕潤(rùn)管壁,低于80℃小烤箱中(可以用烤面包的小烤箱),橫向轉(zhuǎn)動(dòng),每隔5~10分鐘轉(zhuǎn)動(dòng)一次,直至干燥后放入4℃保存,可使2~5ml血液不凝固。
二、血液樣本的收集:
全血根據(jù)收集的條件,分成不抗凝和抗凝兩種。同時(shí),不抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血清;抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血漿。
1、不抗凝收集血清:將收集好的全血,靜置1~2小時(shí),直接低速離心分離出血清待用或保存。
2、抗凝收集血漿: 收集抗凝全血,輕輕顛倒充分抗凝后,可直接低速離心分離血漿(也可靜置半小時(shí)左右再低速離心分離血漿)待用或保存。根據(jù)不同抗凝劑的性能特征,選擇合適的抗凝劑。實(shí)驗(yàn)室常用的抗凝劑有肝素的各種鹽、EDTA
選擇抗凝的注意點(diǎn):
①、每一份樣本所加的抗凝劑的量要一致,同時(shí)所取的全血的量也要盡量一致;
②、收集抗凝全血后一定要輕輕顛倒,充分抗凝,防止部分血液未接觸到抗凝劑而導(dǎo)致凝固;
③、抗凝全血收集的血漿相對(duì)較多(1ml抗凝全血能分離出0.4~0.5ml血漿);
④、抗凝收集的血漿冷凍保存后,解凍時(shí)可能會(huì)出現(xiàn)絮狀渾濁,如有則需要離心去掉渾濁后
用于測(cè)定。