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人沙眼衣原體抗體,CISA試劑盒使用說明書 

本試劑盒僅供研究使用公司實(shí)驗(yàn)室提供免費(fèi)代測，7個(gè)工作日出結(jié)果，提供原始數(shù)據(jù)！

檢測范圍：每種的檢測范圍都有所不同,具體請(qǐng)查看說明書 

特異性：本試劑盒可同時(shí)檢測天然或重組的指標(biāo)，且與其他相關(guān)蛋白無交叉反應(yīng)。 

有效期：6個(gè)月 

預(yù)期應(yīng)用：ELISA法檢測指標(biāo)血清、血漿、細(xì)胞培養(yǎng)上清或其它相關(guān)生物液體中含量或靈敏度。 

實(shí)驗(yàn)原理 

用純化的抗體包被微孔板，制成固相載體，往包被抗指標(biāo)抗體的微孔中依次加入標(biāo)本或標(biāo)準(zhǔn)品、生物素化的抗指標(biāo)抗體、HRP標(biāo)記的親和素，經(jīng)過*洗滌后用底物TMB顯色。TMB在過氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成zui終的黃色。顏色的深淺和樣品中的指標(biāo)呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長下測定吸光度（OD值），計(jì)算樣品濃度。 

試劑盒組成及試劑配制 

1．試劑盒保存：-20℃（較長時(shí)間不用時(shí)）；2-8℃（頻繁使用時(shí)）。 

2．濃洗滌液低溫保存會(huì)有鹽析出，稀釋時(shí)可在水浴中加溫助溶。 

3．中、英文說明書可能會(huì)有不一致之處，請(qǐng)以英文說明書為準(zhǔn)。 

4．剛開啟的酶聯(lián)板孔中可能會(huì)含有少許水樣物質(zhì)，此為正?，F(xiàn)象，不會(huì)對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果造成任何影響。 

需要而未提供的試劑和器材 

1. 標(biāo)準(zhǔn)規(guī)格酶標(biāo)儀 

2. 高速離心機(jī) 

3. 電熱恒溫培養(yǎng)箱 

4. 干凈的試管和Eppendof管 

5. 系列可調(diào)節(jié)移液器及吸頭，一次檢測樣品較多時(shí)，用多通道移液器 

6. 蒸餾水，容量瓶等 

1. 酶聯(lián)板（Assay plate ）：一塊（96孔）。 

2. 標(biāo)準(zhǔn)品（Standard）：2瓶。 

3. 樣品稀釋液（Sample Diluent）：1×20ml/瓶。 

4. 生物素標(biāo)記抗體稀釋液（Biotin-antibody Diluent）：1×10ml/瓶。 

5. 辣根過氧化物酶標(biāo)記親和素稀釋液 （HRP-avidin Diluent）：1×10ml/瓶。 

6. 生物素標(biāo)記抗體（Biotin-antibody）：1×120μl/瓶（1：100） 

7. 辣根過氧化物酶標(biāo)記親和素（HRP-avidin）：1×120μl/瓶（1：100） 

8. 底物溶液（TMB Substrate）：1×10ml/瓶。 

9. 濃洗滌液（Wash Buffer）：1×20ml/瓶，使用時(shí)每瓶用蒸餾水稀釋25倍。 

10. 終止液（Stop Solution）：1×10ml/瓶（2N H2SO4）。 

人沙眼衣原體抗體,CISA試劑盒本品用純化的抗體包被微孔板，制成固相載體，往包被抗HVA抗體的微孔中依次加入標(biāo)本或標(biāo)準(zhǔn)品、生物素化的抗HVA抗體、HRP標(biāo)記的親和素，經(jīng)過*洗滌后用底物TMB顯色。TMB在過氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成zui終的黃色。顏色的深淺和樣品中的HVA呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長下測定吸光度（OD值），計(jì)算樣品濃度。

1. 酶標(biāo)儀（建議參考儀器使用說明提前預(yù)熱）

2. 微量加液器及吸頭，EP管

3. 蒸餾水或去離子水，全新濾紙

1. 酶聯(lián)板：一塊（96孔）

2. 標(biāo)準(zhǔn)品，2瓶，每瓶臨用前以樣品稀釋液稀釋至1ml，蓋好后靜置10分鐘以上，然后反復(fù)顛倒/搓動(dòng)以助溶解，其濃度為100 ug/ml，做系列倍比稀釋（注：不要直接在板中進(jìn)行倍比稀釋）后，分別稀釋成100 ug/ml，50 ug/ml，25 ug/ml，12.5 ug/ml，6.25 ug/ml，3.12 ug/ml，1.56 ug/ml，樣品稀釋液直接作為標(biāo)準(zhǔn)濃度0 ug/ml，臨用前15分鐘內(nèi)配制。如配制 50 ug/ml標(biāo)準(zhǔn)品：取0.5ml （不要少于0.5ml ） 100 ug/ml的上述標(biāo)準(zhǔn)品加入含有0.5ml樣品稀釋液的Eppendorf管中，混勻即可，其余濃度以此類推。

3. 樣品稀釋液：1×20ml。 

4. 檢測稀釋液A：1×10ml。

5. 檢測稀釋液B：1×10ml。

6. 檢測溶液A：1×120μl（1:100）臨用前以檢測稀釋液A 1:100稀釋，稀釋前根據(jù)預(yù)先計(jì)算好的每次實(shí)驗(yàn)所需的總量配制（100μl/孔），實(shí)際配制時(shí)應(yīng)多配制 0.1-0.2ml。如10μl檢測溶液A加990μl檢測稀釋液A的比例配制，輕輕混勻，在使用前一小時(shí)內(nèi)配制。

7. 檢測溶液B：1×120μl/瓶（1:100）臨用前以檢測稀釋液B 1:100稀釋。稀釋方法同檢測溶液A。

8. 底物溶液：1×10ml/瓶。

9. 濃洗滌液：1×30ml/瓶，使用時(shí)每瓶用蒸餾水稀釋25倍。

10. 終止液：1×10ml/瓶（2N H2SO4）。

11. 覆膜：5張

人沙眼衣原體抗體,CISA試劑盒公司其他產(chǎn)品：human schistosoma 人血吸蟲（schistosoma）
Human Rotavirus antigen,RV Ag 人輪狀病毒抗原（RV Ag）
Human Legionella pneumophila antigen,LP Ag 人軍團(tuán)菌抗原（LP Ag）
human colicin 人大腸菌素（colicin）
Human Adenovirus Antigen,ADV-Ag 人腺病毒抗原（ADV-Ag）
Human Trichinella antibody 人旋毛蟲抗體（Trichinella Ab）
Human Tetanus Antibody 人破傷風(fēng)抗體（Tetanus Ab）
Human Lebtospira IgM 人鉤端螺旋體IgM（Lebtospira）
Human Leptospira IgG,Lep IgG 人鉤端螺旋體IgG（Lep IgG）
Human Amebiasis 人阿米巴（Amebiasis）
Human Diphtheria antibody 人白喉抗體（Diphtheria Ab）
Human Cysticercosis antybody,CYT Ab 人囊蟲病抗體（CYT Ab）
Human Brucella Antibody IgG,Brucella Ab IgG 人布魯氏菌抗體IgG（Brucella Ab IgG）
Human Varicella zoster virus IgM,VZV IgM 人水痘帶狀皰疹病毒IgM（VZV-IgM）
Human Varicella zoster virus IgG,VZV-IgG 人水痘帶狀皰疹病毒IgG（VZV-IgG）
Human Legionella antibody IgA,LP Ab-IgA 人軍團(tuán)菌抗體IgA（LP Ab-IgA）
Human Legionella antibody IgM,LP Ab-IgM 人軍團(tuán)菌抗體IgM（LP Ab-IgM ）
Human Legionella antibody IgG,LP Ab-IgG 人軍團(tuán)菌抗體IgG（LP Ab-IgG）

人沙眼衣原體抗體,CISA試劑盒實(shí)驗(yàn)開始前，各試劑均應(yīng)平衡至室溫（試劑不能直接在37℃溶解）；試 劑或樣品稀釋時(shí)，均需混勻，混勻時(shí)盡量避免起泡。實(shí)驗(yàn)前應(yīng)預(yù)測樣品含量，如樣品濃度過高時(shí)，應(yīng)對(duì)樣品進(jìn)行稀釋，以使稀釋后的樣品符合試劑盒的檢測范圍，計(jì)算時(shí)再乘以相應(yīng)的稀釋倍數(shù)。 

 加樣：分別設(shè)空白孔、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測樣品孔?？瞻卓准訕悠废♂屢?nbsp;100μl，余孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品或待測樣品100μl，注意不要有氣泡，加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動(dòng)混勻，酶標(biāo)板加上蓋或覆膜，37℃反應(yīng)120分鐘。為保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果有效性，每次實(shí)驗(yàn)請(qǐng)使用新的標(biāo)準(zhǔn)品溶液。

 棄去液體，甩干，不用洗滌。每孔加 檢測溶液A工作液 100μl（在使用前一小時(shí)內(nèi)配制），酶標(biāo)板加上覆膜，37℃反應(yīng)60分鐘。

  溫育60分鐘后，棄去孔內(nèi)液體，甩干，洗板 3次，每次浸泡1-2分鐘，大約400μl/每孔，甩干（也可輕拍將孔內(nèi)液體拍干）。

 每孔加檢測溶液B工作液（同檢測A工作液） 100μl，酶標(biāo)板加上覆膜37℃反應(yīng)60分鐘。

 溫育60分鐘后，棄去孔內(nèi)液體，甩干，洗板5次，每次浸泡1-2分鐘，350μl/每孔，甩干（也可輕拍將孔內(nèi)液體拍干）。

 依序每孔加底物溶液90μl，酶標(biāo)板加上覆膜37℃避光顯色（30分鐘內(nèi)，此時(shí)肉眼可見標(biāo)準(zhǔn)品的前3-4孔有明顯的梯度蘭色，后3-4孔梯度不明顯，即可終止）。

 依序每孔加終止溶液50μl，終止反應(yīng)，此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色。終止液的加入順序應(yīng)盡量與底物液的加入順序相同。為了保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性，底物反應(yīng)時(shí)間到后應(yīng)盡快加入終止液。

 用酶聯(lián)儀在450nm波長依序測量各孔的光密度（OD值）。 在加終止液后立即進(jìn)行檢測。