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發(fā)酵培養(yǎng)基pH值影響有哪些
閱讀:1343 發(fā)布時(shí)間:2022-3-23發(fā)酵培養(yǎng)基的pH值,對(duì)微生物生長(zhǎng)具有非常明顯的影響,也是影響發(fā)酵過(guò)程中各種酶活的重要因素。pH值對(duì)微生物的生長(zhǎng)繁殖和產(chǎn)物合成的影響有以下幾個(gè)方面:
①影響酶的活性,當(dāng)pH值抑制菌體中某些酶的活性時(shí),會(huì)阻礙菌體的新陳代謝;
②影響微生物細(xì)胞膜所帶電荷的狀態(tài),改變細(xì)胞膜的通透性,影響微生物對(duì)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的吸收和代謝產(chǎn)物的排泄;
③影響培養(yǎng)基中某些組分的解離,進(jìn)而微生物對(duì)這些成分的吸收;
④pH值不同,往往引起菌體代謝過(guò)程的不同,使代謝產(chǎn)物的質(zhì)量和比例發(fā)生改變。
培養(yǎng)基中營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的代謝,是引起pH值變化的主要原因,發(fā)酵液pH值的變化乃是菌體代謝的綜合效果。由于pH值不當(dāng),可能?chē)?yán)重影響菌體的生長(zhǎng)和產(chǎn)物的合成,因此對(duì)微生物發(fā)酵來(lái)說(shuō)有各自的最適生長(zhǎng)pH值和最適pH值。各種不同的微生物,對(duì)pH值的要求不同。多數(shù)微生物生長(zhǎng)都有最適pH值范圍及其變化的上下限:上限都在8.5左右,超過(guò)此上限,微生物將無(wú)法忍受而自溶;下限以酵母為*低(2.5)。但菌體內(nèi)的pH值一般認(rèn)為是中性附近。pH值對(duì)產(chǎn)物的合成有明顯的影響,因?yàn)榫w生長(zhǎng)和產(chǎn)物合成都是酶反應(yīng)的結(jié)果,僅僅是酶的種類(lèi)不同而已,因此代謝產(chǎn)物的合成也有自己最適的pH值范圍,如合成青霉素的最適pH值范圍為6.5~6.8。這兩種pH值的范圍對(duì)發(fā)酵控制來(lái)說(shuō)都是很重要的參數(shù)。另外,pH值還會(huì)影響某些霉菌的形態(tài)。
一般認(rèn)為,細(xì)胞內(nèi)的H+或OH-能影響酶蛋白的解離度和電荷情況,改變酶的結(jié)構(gòu)和功能,引起酶活性的改變。但培養(yǎng)基的H+或OH-并不是直接作用在胞內(nèi)酶蛋白上,而是首先作用在胞外的弱酸(或弱堿)上,使之成為易于透過(guò)細(xì)胞膜的分子狀態(tài)的弱酸(或弱堿),它們進(jìn)入細(xì)胞后,再行解離,產(chǎn)生H+或OH-,改變胞內(nèi)原先存在的中性狀態(tài),進(jìn)而影響酶的結(jié)構(gòu)和活性。所以培養(yǎng)基中H+或OH-是通過(guò)間接作用來(lái)產(chǎn)生影響的。pH值還影響菌體對(duì)基質(zhì)的利用速率和細(xì)胞的結(jié)構(gòu),影響菌體的生長(zhǎng)和產(chǎn)物的合成。Collnig等人發(fā)現(xiàn)產(chǎn)黃曲霉的細(xì)胞壁的厚度就隨pH值的增加而減?。浩渚z直徑在pH6.0時(shí)為2~3μm;pH7.4時(shí)為2~18μm,并呈膨脹酵母狀;pH值下降后菌絲形態(tài)又會(huì)恢復(fù)正常。pH值還影響菌體細(xì)胞膜的電荷狀況,引起膜透性發(fā)生改變,因而影響菌體對(duì)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的吸收和代謝產(chǎn)物的形成等。
如同溫度對(duì)發(fā)酵影響一樣,pH值對(duì)產(chǎn)物穩(wěn)定性也有影響。如在β-內(nèi)酰胺抗生素沙納霉素(thienamycin)的發(fā)酵中,考察pH值對(duì)產(chǎn)物生物合成的影響時(shí),發(fā)現(xiàn)pH6.7~7.5之間,抗生素的產(chǎn)量相近,高于或低于這個(gè)范圍,合成就受到抑制。在這個(gè)pH值范圍內(nèi),沙納霉素的穩(wěn)定性未受到嚴(yán)重影響,半衰期也無(wú)大的變化;但pH>7.5時(shí),穩(wěn)定性下降,半衰期縮短,發(fā)酵單位也下降。青霉素在堿性條件下發(fā)酵單位低,也與青霉素的穩(wěn)定性有關(guān)。
由于pH值的高低對(duì)菌體生長(zhǎng)和產(chǎn)物的合成產(chǎn)生明顯的影響,所以在工業(yè)發(fā)酵中,維持最適pH值已成為成敗的關(guān)鍵因素之一。