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技術(shù)文章

熒光核酸試劑使用方法產(chǎn)品

閱讀:263          發(fā)布時間:2021-2-4

熒光核酸試劑使用方法:

注:所有試劑使用前需*解凍,混合均勻,6,000rpm離心數(shù)秒后使用。

1.樣本處理(樣本處理區(qū))
待檢樣本的核酸提取可采用病毒RNA提取試劑盒或自動化核酸提取儀等,具體提取方法請參照相關(guān)說明書;陽性質(zhì)控品及陰性質(zhì)控品無需提取,可直接使用。

2. 擴增試劑準備(PCR前準備區(qū))
取N個(N=陰性質(zhì)控品+待檢樣本+陽性質(zhì)控品)PCR反應(yīng)管,每管分別加入FMD RT-PCR反應(yīng)液19μl、RT-PCR酶1 μl (也可根據(jù)每頭份用量計算N+1份FMD RT-PCR反應(yīng)液、RT-PCR酶所需總量,兩者混勻離心后分裝20 μl至單個PCR反應(yīng)管)。

組分每頭份用量FMD  RT-PCR反應(yīng)液19 μlRT-PCR酶。

1 .將所有PCR反應(yīng)管于6,000rpm離心30s,轉(zhuǎn)移至樣本處理區(qū)。

2.加樣(樣本處理區(qū))

3.在上述的PCR反應(yīng)管中分別加入待檢樣本RNA提取物、陰性質(zhì)控品和陽性質(zhì)控品各5 μl,蓋緊管蓋,于6,000rpm離心10s,轉(zhuǎn)移至擴增區(qū)。

熒光核酸試劑產(chǎn)品特點:

靈敏度高:產(chǎn)品僅用于科研可檢測個位拷貝數(shù)的基因

特異性高:有效避免非特異性擴增的出現(xiàn)

穩(wěn)定性高:復(fù)孔間差異小,實驗結(jié)果重復(fù)性強

擴增性能優(yōu):擴增效率高,熒光信號強

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